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人脐带间充质干细胞衍生的外泌体对新生大鼠脑白质损伤小胶质细胞极化的影响
1
作者
王超
徐倩倩
+1 位作者
张书绢
朱艳萍
《实用医学杂志》
北大核心
2025年第16期2447-2454,共8页
目的观察人脐带间充质干细胞衍生的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cellderived exosomes,HUC-MSC-Exo)对新生大鼠脑白质损伤(white matter injury,WMI)小胶质细胞极化的影响。方法将3日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成假...
目的观察人脐带间充质干细胞衍生的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cellderived exosomes,HUC-MSC-Exo)对新生大鼠脑白质损伤(white matter injury,WMI)小胶质细胞极化的影响。方法将3日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成假手术(Sham)组、缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)组和HUC-MSC-Exo组纳入研究,每组12只大鼠。采用单侧颈总动脉结扎联合缺氧(8%氧气和92%氮气)构建WMI大鼠模型;超高速离心法提取外泌体(exosomes,Exo)并通过纳米流式、免疫印迹实验和透射电镜进行表征;脑立体定位仪辅助下侧脑室移植Exo(2×10^(8)粒子/μL)并于HI后14 d进行脑组织样本获取。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑组织形态学改变;尼氏染色观察脑组织尼氏小体形成;劳克坚劳蓝(luxol fast blue,LFB)染色观察脑组织髓鞘的形成;免疫荧光染色观察离子钙结合适配器分子1(ionic calcium binds adaptor molecule 1,Iba1)的定位表达;免疫印迹实验检测分化簇86(cluster of differentiation86,CD86)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和CD206、精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)、IL-10、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)蛋白表达水平。结果纳米流式、免疫印迹实验和透射电镜结果显示,HUC-MSC-Exo粒子直径处于30~150 nm之间,呈现类椭圆形态并可见膜状结构,Exo标志物CD9、CD63、TSG101阳性而calnexin阴性表达。HE染色、尼氏染色和LFB染色显示,与Sham组相比,HI组出现脑组织结构破坏,表现为细胞形态改变、神经纤维排列紊乱及空泡化,尼氏小体溶解甚至消失,髓鞘形成受阻;HUC-MSC-Exo明显逆转了HI组病理学改变。免疫荧光染色和免疫印迹实验结果显示,小胶质细胞标志物Iba1主要表达于脑室下区(subventricular zone,SVZ),与Sham组相比,HI后SVZ区Iba1蛋白表达增加(t=15.95、20.31,P<0.01);HUC-MSC-Exo明显降低了HI组Iba1蛋白表达(t=10.35、11.01,P<0.01)。免疫印迹实验结果显示,与Sham组相比,HI后M1小胶质细胞标志物(CD86和i NOS)和促炎细胞因子(TNF-α和IL-1β)的表达均明显增加(t=10.98、7.68、15.13、13.13,均P<0.01),M2小胶质细胞标志物(CD206和Arg-1)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的表达亦增加(t=14.26、9.38、8.82、7.42,均为P<0.01);与HI组相比,HUC-MSC-Exo降低了CD86、iNOS、TNF-α和IL-1β的蛋白表达(t=9.79、5.81、8.06、7.03,均P<0.01)而增加了CD206、Arg-1、IL-10和TGF-β的蛋白表达水平(t=12.90、8.16、8.98、9.49,均P<0.01)。结论HUC-MSC-Exo通过调控小胶质细胞极化减轻新生大鼠WMI。
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关键词
人脐带间充质干细胞
外泌体
白质损伤
小胶质细胞
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职称材料
题名
人脐带间充质干细胞衍生的外泌体对新生大鼠脑白质损伤小胶质细胞极化的影响
1
作者
王超
徐倩倩
张书绢
朱艳萍
机构
新疆医科大学儿科学院
新疆医科大学第一附属医院新生儿科
出处
《实用医学杂志》
北大核心
2025年第16期2447-2454,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:82060288)。
文摘
目的观察人脐带间充质干细胞衍生的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cellderived exosomes,HUC-MSC-Exo)对新生大鼠脑白质损伤(white matter injury,WMI)小胶质细胞极化的影响。方法将3日龄Sprague-Dawley大鼠随机分成假手术(Sham)组、缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)组和HUC-MSC-Exo组纳入研究,每组12只大鼠。采用单侧颈总动脉结扎联合缺氧(8%氧气和92%氮气)构建WMI大鼠模型;超高速离心法提取外泌体(exosomes,Exo)并通过纳米流式、免疫印迹实验和透射电镜进行表征;脑立体定位仪辅助下侧脑室移植Exo(2×10^(8)粒子/μL)并于HI后14 d进行脑组织样本获取。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑组织形态学改变;尼氏染色观察脑组织尼氏小体形成;劳克坚劳蓝(luxol fast blue,LFB)染色观察脑组织髓鞘的形成;免疫荧光染色观察离子钙结合适配器分子1(ionic calcium binds adaptor molecule 1,Iba1)的定位表达;免疫印迹实验检测分化簇86(cluster of differentiation86,CD86)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和CD206、精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)、IL-10、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)蛋白表达水平。结果纳米流式、免疫印迹实验和透射电镜结果显示,HUC-MSC-Exo粒子直径处于30~150 nm之间,呈现类椭圆形态并可见膜状结构,Exo标志物CD9、CD63、TSG101阳性而calnexin阴性表达。HE染色、尼氏染色和LFB染色显示,与Sham组相比,HI组出现脑组织结构破坏,表现为细胞形态改变、神经纤维排列紊乱及空泡化,尼氏小体溶解甚至消失,髓鞘形成受阻;HUC-MSC-Exo明显逆转了HI组病理学改变。免疫荧光染色和免疫印迹实验结果显示,小胶质细胞标志物Iba1主要表达于脑室下区(subventricular zone,SVZ),与Sham组相比,HI后SVZ区Iba1蛋白表达增加(t=15.95、20.31,P<0.01);HUC-MSC-Exo明显降低了HI组Iba1蛋白表达(t=10.35、11.01,P<0.01)。免疫印迹实验结果显示,与Sham组相比,HI后M1小胶质细胞标志物(CD86和i NOS)和促炎细胞因子(TNF-α和IL-1β)的表达均明显增加(t=10.98、7.68、15.13、13.13,均P<0.01),M2小胶质细胞标志物(CD206和Arg-1)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的表达亦增加(t=14.26、9.38、8.82、7.42,均为P<0.01);与HI组相比,HUC-MSC-Exo降低了CD86、iNOS、TNF-α和IL-1β的蛋白表达(t=9.79、5.81、8.06、7.03,均P<0.01)而增加了CD206、Arg-1、IL-10和TGF-β的蛋白表达水平(t=12.90、8.16、8.98、9.49,均P<0.01)。结论HUC-MSC-Exo通过调控小胶质细胞极化减轻新生大鼠WMI。
关键词
人脐带间充质干细胞
外泌体
白质损伤
小胶质细胞
Keywords
human umbilical cord mesenchymal stem cells
exosomes
white matter injuy
microg-lia
分类号
R741 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人脐带间充质干细胞衍生的外泌体对新生大鼠脑白质损伤小胶质细胞极化的影响
王超
徐倩倩
张书绢
朱艳萍
《实用医学杂志》
北大核心
2025
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