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题名鸡蛋清溶菌酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达研究
被引量：1
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作者
权志中
张丞斌
余荣
刘长江
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机构
沈阳农业大学食品学院
浙江工业大学生物与环境工程学院
杭州康德权科技有限公司
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出处
《饲料工业》
2007年第24期18-22,共5页
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文摘
研究从鸡输卵管组织提取细胞总RNA,根据Gene Bank中已发表的鸡溶菌酶基因序列,设计合成特异引物,合成cDNA序列,并以此为模版,PCR扩增鸡溶菌酶基因。用Xho I和Xba I对LYZ基因的PCR产物和真核表达载体pPIC6αA进行双酶切后转化到大肠杆菌(DH5α)中,构建成为真核重组表达载体pPIC6αA-LYZ。该载体经PstXI酶切线性化后,以电击转化方法导入到毕赤酵母宿主菌X-33中,经Blasticidin抗性筛选,得到鸡溶菌酶基因重组毕赤酵母菌株;甲醇96h(发酵罐诱导100h)诱导表达,经Wetern-blot检测分析,基因重组工程菌株摇瓶诱导表达溶菌酶的表达量约为4mg/l,发酵罐诱导表达的表达量约为10mg/l。
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关键词
溶菌酶
克隆
表达
毕赤酵母
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分类号
Q55
[生物学—生物化学]
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