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进境番茄种子中番茄花叶病毒的检测与鉴定 被引量:6
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作者 廖富荣 郭木金 +5 位作者 林石明 陈红运 陈青 黄蓬英 吴媛 谢惠明 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期124-128,134,共6页
利用双抗夹心-酶联免疫吸附试验(DAF〉EI。ISA)和反转录-聚合酶链式反应(Rrr_PCR)方法对来自韩国的番茄种子进行种传病毒检测。结果表明,在该批番茄种子中检测到番茄花叶病毒(ToMV)和烟草花叶病毒(TMV)。PCR产物测序结果表明,... 利用双抗夹心-酶联免疫吸附试验(DAF〉EI。ISA)和反转录-聚合酶链式反应(Rrr_PCR)方法对来自韩国的番茄种子进行种传病毒检测。结果表明,在该批番茄种子中检测到番茄花叶病毒(ToMV)和烟草花叶病毒(TMV)。PCR产物测序结果表明,ToMV特异引物(ToA/ToB)与TMV特异引物(TA/TB)扩增的片段均为ToMV的外壳蛋白(CP)基因及3’非编码区(3’-UTR),该片段与其他ToMV分离物的核苷酸序列相似性为98.2%~99.9%。本研究利用重新设计合成TMV和ToMV特异引物对该批种子进行RT-PCR检测,仅ToMV特异性引物(ToMfl/ToMrl)扩增到670bp的预期片段,TMV特异引物(TMfl/TMrl)则未出现特异性扩增,表明重新设计的引物可准确区分ToMV和TMV。以上结果证实该批番茄种子仅携带ToMV。 展开更多
关键词 番茄种子 双抗夹心-酶联免疫吸附试验 反转录-聚合酶链式反应 番茄花叶病毒 烟草花叶病毒 种子传播
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进境西瓜种子中西瓜细菌性果斑病菌的检测鉴定 被引量:3
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作者 廖富荣 林石明 +4 位作者 方志鹏 黄蓬英 陈红运 陈青 吴媛 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期135-138,共4页
由嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)引起的西瓜细菌性果斑病是西瓜等葫芦科作物上的一种极具毁灭性的病害,该病原细菌可以由种子携带传播。本研究通过直接研磨种子,用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)和免疫捕捉聚合酶链式... 由嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)引起的西瓜细菌性果斑病是西瓜等葫芦科作物上的一种极具毁灭性的病害,该病原细菌可以由种子携带传播。本研究通过直接研磨种子,用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)和免疫捕捉聚合酶链式反应法(IC-PCR)对进境的西瓜种子进行检测,并且对PCR产物进一步克隆测序。结果表明,在DAS-ELISA产生阳性结果的样品中,IC-PCR结果也产生阳性。序列分析表明,该序列与已知的该病菌16S rRNA基因的相应序列具有100%同源性。因此,2006年这批来自台湾的西瓜种子携带有嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)。 展开更多
关键词 西瓜种子 DAS-ELISA IC-PCR 嗜酸菌属西瓜种 种子携带
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豇豆重花叶病毒RT-LAMP检测方法的建立 被引量:14
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作者 郭木金 廖富荣 +3 位作者 陈青 林石明 陈红运 沈建国 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期123-127,共5页
豇豆重花叶病毒(Cowpea severe mosaic virus,CPSMV)是我国进境植物检疫性有害生物,本研究根据CPSMV的外壳蛋白基因序列设计引物,以期建立CPSMV的反转录-环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,... 豇豆重花叶病毒(Cowpea severe mosaic virus,CPSMV)是我国进境植物检疫性有害生物,本研究根据CPSMV的外壳蛋白基因序列设计引物,以期建立CPSMV的反转录-环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测方法。条件优化后,建立了CPSMV的RT-LAMP方法,该方法可将CPSMV与同属其他病毒准确区分,具有良好的特异性。灵敏度试验显示,RT-LAMP比普通RT-PCR灵敏度高10倍。说明本研究建立的RT-LAMP方法适用于CPSMV的快速、特异和灵敏的检测。 展开更多
关键词 豇豆重花叶病毒 反转录-环介导等温扩增 检测
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葫芦种子传黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测 被引量:6
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作者 秦碧霞 蔡健和 +3 位作者 陆秀红 林林 廖富荣 刘志明 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期109-112,共4页
从感染黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的葫芦植株上收取种子,通过苗期症状观察法、双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)、免疫捕获反转录PCR(IC-RT-PCR)法测定葫芦种子的带毒情况,并用生物学接种方法... 从感染黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的葫芦植株上收取种子,通过苗期症状观察法、双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)、免疫捕获反转录PCR(IC-RT-PCR)法测定葫芦种子的带毒情况,并用生物学接种方法测定葫芦种子携带病毒的侵染活性。苗期症状观察法结果表明,199株幼苗有2株表现花叶斑驳症状,种子传毒率为1.01%;而利用DAS-ELISA和IC-RT-PCR法随机检测30粒葫芦病株种子,CGMMV检出率为100%。种子各部位携带的CGMMV接种葫芦表现典型的花叶斑驳症状,表明葫芦种子携带的CGMMV具有侵染活性。DAS-ELISA检测葫芦种子CGMMV的灵敏度为1/5120种子研磨液。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 种子带毒 检测
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我国5种芒果瘿蚊类害虫的识别比较 被引量:2
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作者 蔡鸿娇 姚锦爱 +2 位作者 傅建炜 王宏毅 廖富荣 《中国森林病虫》 北大核心 2014年第3期41-43,共3页
芒果瘿蚊类害虫由于个体微小不容易鉴定识别,通过比较其危害特征、生物学和生态学差异,可以为我国常见的芒果瘿蚊Procontarinia mangicola Shi、芒果阳茎戟瘿蚊Hastatomyia hastiphalla Yang et Luo、芒果花瘿蚊Dasineura amaramanjarae... 芒果瘿蚊类害虫由于个体微小不容易鉴定识别,通过比较其危害特征、生物学和生态学差异,可以为我国常见的芒果瘿蚊Procontarinia mangicola Shi、芒果阳茎戟瘿蚊Hastatomyia hastiphalla Yang et Luo、芒果花瘿蚊Dasineura amaramanjarae Grover、芒果柑桔花蕾蛆Contarinia citri Barnes和芒果状铗普瘿蚊Procontarinia robusta Li,Pu&Zhang等5种瘿蚊的识别鉴定提供帮助。 展开更多
关键词 芒果瘿蚊 芒果阳茎戟瘿蚊 芒果花瘿蚊 芒果柑桔花蕾蛆 芒果状铗普瘿蚊
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作物品种鉴定和纯度分析技术研究进展 被引量:6
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作者 陈芳芳 陈青 +1 位作者 王惠英 廖富荣 《福建农业科技》 2007年第2期13-16,共4页
关键词 作物品种鉴定 纯度分析 鉴定技术 种子检验 农业生产 作物育种 假冒伪劣 农民利益
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柚子GAP种植技术
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作者 方志鹏 廖富荣 +1 位作者 郑万里 李晓琳 《福建农业科技》 2009年第1期49-51,共3页
关键词 种植技术 柚子 GAP 出口基地 白俄罗斯 芸香科植物 沙特阿拉伯 成熟果实
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高效液相色谱法测定三聚氰胺假阳性结果的原因及其对策分析 被引量:5
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作者 康燕玉 廖富荣 +1 位作者 曾志杰 陈琼 《福建分析测试》 CAS 2010年第1期6-9,共4页
目前用高效液相色谱法测定三聚氰胺是一种常用方法。本文经过长期实验积累,分析液相色谱法测定三聚氰胺可能出现"假阳性"的各方面原因,考虑样品在实验过程中可能被污染,对包括流动相、色谱柱、检测器等各环节进行分析,归纳出... 目前用高效液相色谱法测定三聚氰胺是一种常用方法。本文经过长期实验积累,分析液相色谱法测定三聚氰胺可能出现"假阳性"的各方面原因,考虑样品在实验过程中可能被污染,对包括流动相、色谱柱、检测器等各环节进行分析,归纳出排除"假阳性"结果的几种方法,为广大检测人员提供参考。 展开更多
关键词 三聚氰胺 高效液相色谱法 假阳性
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美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 陈细红 杨小龙 +2 位作者 廖富荣 高芳銮 沈建国 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期162-165,171,共5页
本文以我国台湾进境美人蕉病株为材料,根据已报道的美人蕉黄斑驳病毒Canna yellow mottle virus(CaYMV)基因序列设计2对特异性引物(外侧引物1对、内侧引物1对),建立了巢式PCR快速检测CaYMV的方法,并对进境的50份美人蕉样品进行了检测。... 本文以我国台湾进境美人蕉病株为材料,根据已报道的美人蕉黄斑驳病毒Canna yellow mottle virus(CaYMV)基因序列设计2对特异性引物(外侧引物1对、内侧引物1对),建立了巢式PCR快速检测CaYMV的方法,并对进境的50份美人蕉样品进行了检测。结果显示,该方法特异性强,且灵敏度高于常规PCR,是常规PCR的1 000倍,表明该方法能够实现对CaYMV的快速、准确、灵敏检测,适用于口岸快速检测CaYMV。 展开更多
关键词 美人蕉黄斑驳病毒 巢式PCR 检测
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燕窝显微特征及基于DNA条形码的基源鉴别 被引量:3
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作者 黄蓬英 廖富荣 +5 位作者 范群艳 柳训才 张晓婷 王雅馨 何金麟 徐敦明 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第23期9141-9149,共9页
目的建立基于Cytb等5种基因序列的燕窝(edible bird’s nest,EBN)基源DNA条形码鉴别方法。方法以泰国、越南、马来西亚、印度尼西亚等地的20个正品燕窝和1个伪品燕窝为研究对象,利用显微技术对21个样品进行观察,再提取基因组DNA,分别利... 目的建立基于Cytb等5种基因序列的燕窝(edible bird’s nest,EBN)基源DNA条形码鉴别方法。方法以泰国、越南、马来西亚、印度尼西亚等地的20个正品燕窝和1个伪品燕窝为研究对象,利用显微技术对21个样品进行观察,再提取基因组DNA,分别利用5对引物扩增Cytb、ND2、12S、COI和Fib7基因序列并双向测序。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)产物测序分析后,NCBI中进行BLAST搜索,分析样品遗传距离,利用最大似然法(maximum likelihood,ML)进行系统发育分析。结果正品燕窝和伪品燕窝在形态上具有较明显区别。BLAST分析表明,所获得的Cytb、ND2、12S、COI基因序列均与雨燕科的爪哇金丝燕(Aerodramus fuciphagus)具有最高的序列一致性。系统发育分析表明不同种类的燕窝处于不同分支中,所测定的4个基因序列均与爪哇金丝燕处于同一分支中,显示最近的亲缘关系。结论该方法可用于燕窝基源的分子鉴定,也为燕窝的真伪鉴别及溯源提供理论依据。 展开更多
关键词 燕窝 显微特征 DNA条形码 基源鉴别
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