肾病综合征患儿血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶活力的研究

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作者 庞希宁 宋今丹 +2 位作者 王淑兰 陈铭 杨春宏 《中国医科大学学报》 CSCD 1996年第3期274-275,278,共3页

本文对１７例肾病综合征（ＮＳ）患儿和１５例健康对照组儿童血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶（ＰＨＧＰｘ）活力，脂溶性荧光色素（ＬＳＦＰ）含量进行了研究。结果表明，ＮＳ急性期ＰＨＧＰｘ活力明显降低．ＬＳＦＰ含量增加... 本文对１７例肾病综合征（ＮＳ）患儿和１５例健康对照组儿童血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶（ＰＨＧＰｘ）活力，脂溶性荧光色素（ＬＳＦＰ）含量进行了研究。结果表明，ＮＳ急性期ＰＨＧＰｘ活力明显降低．ＬＳＦＰ含量增加；恢复期ＰＨＧＰｘ活力较急性期明显提高，但仍低于正常对照组，ＬＳＦＰ虽较急性期下降，但仍高于正常对照组。说明ＮＳ存在ＰＨＧＰｘ和ＬＳＦＰ的改变，但可逐渐恢复。 展开更多

关键词 肾病综合征 磷脂 谷胱甘肽 过氧化物酶 儿童

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急性肾小球肾炎患儿血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶活力的研究

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作者 庞希宁 宋今丹 王淑兰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第z1期1-2,5,共3页

目的:探讨急性肾小球肾炎（AGN）与磷脂过氧化的关系。方法:用生物化学的方法检测血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶（PHGPx）活力和脂溶性荧光色素（MFP）含量。结果:通过对17例AGN患儿和15例健康人研究表明:AGN急性期PHGPx活力... 目的:探讨急性肾小球肾炎（AGN）与磷脂过氧化的关系。方法:用生物化学的方法检测血红细胞磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶（PHGPx）活力和脂溶性荧光色素（MFP）含量。结果:通过对17例AGN患儿和15例健康人研究表明:AGN急性期PHGPx活力明显降低,LSFP含量增加,恢复期二者与正常对照组均无显著差异。结论:AGN存在磷脂过氧化改变,并且是可逆的。 展开更多

关键词 急性肾小球肾炎 磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶 脂溶性荧光色素

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细胞重编程:调节关键基因获得需要细胞

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作者 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期689-695,共7页

细胞重编程是在一定条件下成体细胞的记忆被擦除,重新程序化产生新的表型和功能,导致细胞命运发生改变,主要发生在不涉及基因组DNA序列改变的基因表达水平,即通过改变细胞基因表达程序(时空和差异),对其进行重新编程而改变细胞的分化方... 细胞重编程是在一定条件下成体细胞的记忆被擦除,重新程序化产生新的表型和功能,导致细胞命运发生改变,主要发生在不涉及基因组DNA序列改变的基因表达水平,即通过改变细胞基因表达程序(时空和差异),对其进行重新编程而改变细胞的分化方向,获得所需要的细胞。对于细胞重编程的深入研究有助于掌握机体细胞的发生发育机制,为解决再生医学种子细胞来源问题提供理论基础。人类未来将从许多分化的细胞获得更多所需要的另外一些分化细胞,这对细胞分化机制和疾病的细胞替代治疗研究具有划时代的意义,本文总结了细胞重编程的分类、影响因素、方法及最新进展。 展开更多

关键词 细胞 重编程 基因表达 去分化 转分化

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人羊膜负载人羊膜间充质干细胞对SD大鼠皮肤创面愈合的影响 被引量：12

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作者 霍双枝 施萍 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期611-614,I0005-I0009,共9页

目的观察人羊膜(HAM)负载人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对SD大鼠皮肤创面愈合的影响。方法采用胰酶消化HAM的上皮细胞,将hAMSCs接种于HAM上培养,然后贴覆于大鼠创面,观察创面大体变化,采用HE染色和免疫组织化学染色法检测创面愈合情况,并... 目的观察人羊膜(HAM)负载人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对SD大鼠皮肤创面愈合的影响。方法采用胰酶消化HAM的上皮细胞,将hAMSCs接种于HAM上培养,然后贴覆于大鼠创面,观察创面大体变化,采用HE染色和免疫组织化学染色法检测创面愈合情况,并与单纯羊膜组和对照组进行比较。结果 HAM负载hAMSCs组大鼠创面的平均愈合时间为(18.3±0.9)d,明显快于对照组的(26.4±0.7)d(P<0.01)和单纯羊膜组的(21.5±1.2)d(P<0.05);术后11 d和14 d,HAM负载hAMSCs组大鼠的创面愈合率分别为(81.5±7.2)%和(94.3±3.6)%,明显高于对照组的(48.5±3.2)%和(74.3±4.3)%及单纯羊膜组的(68.5±4.5)%和(86.8±4.8)%(P均<0.01)。皮肤切片HE染色结果证实,HAM负载hAMSCs组大鼠的伤口愈合质量明显优于单纯羊膜组和对照组。免疫组织化学染色结果显示,术后14 d,HAM负载hAMSCs组大鼠皮肤CK19阳性表皮干细胞数为48.2±3.2,明显高于单纯羊膜组的37.7±3.1(P<0.05)和对照组的29.6±2.4(P<0.01);血管内皮生长因子阳性颗粒表达数为64.5±4.5,也明显高于单纯羊膜组的52.6±3.8(P<0.05)和对照组的40.7±3.1(P<0.01)。结论 HAM负载hAMSCs可能是通过促进表皮干细胞和毛细血管再生,促进皮肤损伤修复。 展开更多

关键词 人羊膜 人羊膜间充质干细胞 创伤修复 角蛋白19 血管内皮生长因子

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表皮生长因子影响人羊膜间充质干细胞迁移的机制 被引量：6

5

作者 李彩虹 施萍 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期606-610,共5页

目的研究表皮生长因子(EGF)影响体外培养的人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)迁移的机制。方法将体外培养的hAMSCs分为对照组(未处理)、EGF组、抑制剂AG1478+EGF组、抑制剂LY294002+EGF组和抑制剂U0126+EGF组5组,采用Transwell小室测定各组hAM... 目的研究表皮生长因子(EGF)影响体外培养的人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)迁移的机制。方法将体外培养的hAMSCs分为对照组(未处理)、EGF组、抑制剂AG1478+EGF组、抑制剂LY294002+EGF组和抑制剂U0126+EGF组5组,采用Transwell小室测定各组hAMSCs的迁移能力,W estern blot检测各组磷酸化EGFR(P-EGFR)、磷酸化AKT(P-AKT)和磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)及金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达情况,RNA-Seq技术对EGF组和对照组细胞中差异表达基因进行分析。结果 EGF组细胞的迁移能力明显高于对照组(P=0.0361),抑制剂AG1478+EGF组(P=0.0113)、抑制剂LY294002+EGF组(P=0.0169)和抑制剂U0126+EGF组(P=0.0293)明显低于EGF组。EGF可增加hAMSCs的P-EGFR、P-AKT和P-ERK1/2及MMP-2的表达,但P-AKT和P-ERK表达的增加可被AG1478和LY294002抑制。对EGF组和对照组细胞中差异表达基因的GO功能富集分析和KEGG代谢途径分析结果表明,EGF组细胞中发生转录上调的基因主要参与转录调节、蛋白质修饰、凋亡抑制等生命过程,其中与MAPK信号通路有关的基因为DUSP5、IL1B、DUSP6、NGF和HSPA2。结论 EGF引起的hAMSCs迁移可能是通过PI3K/AKT、ERK信号通路介导的,需要MMP-2的表达,及其参与转录调节、蛋白质修饰和凋亡抑制等基因的协同表达。 展开更多

关键词 人羊膜间充质干细胞 表皮生长因子 磷脂酰肌醇激酶-3 细胞外调节蛋白激酶

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靶向REST基因TALEN质粒的快速构建与活性检测 被引量：1

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作者 张殿宝 赵峰 +4 位作者 张涛 林学文 王瑞 施萍 庞希宁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期883-886,890,共5页

目的针对人REST基因设计并构建特异性类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)质粒,快速获得具有较高突变效率的TALEN。方法根据REST的序列信息设计TALEN靶位,使用单元组装的方法快速构建TALEN质粒,在293T细胞中进行活性检测并计算突变效率... 目的针对人REST基因设计并构建特异性类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)质粒,快速获得具有较高突变效率的TALEN。方法根据REST的序列信息设计TALEN靶位,使用单元组装的方法快速构建TALEN质粒,在293T细胞中进行活性检测并计算突变效率。结果针对REST设计并成功构建5个TALEN质粒,组成6对TALEN并实现基因打靶,其中L1和R3组合的突变效率达到60.9%。结论成功获得了靶向人REST基因的高效TALEN,为进一步研究REST的基因功能及其在相关疾病中的作用奠定基础。 展开更多

关键词 REST 类转录激活因子效应物核酸酶 质粒构建 活性检测

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负向调节因子重编程诱导大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛内分泌细胞分化的研究 被引量：1

7

作者 李宏图 林学文 +1 位作者 李彩虹 庞希宁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-6,共6页

目的重编程诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛内分泌细胞分化并探讨其可能的分化机制。方法原代培养的大鼠骨髓MSCs经分离、培养至第3代后,用负向调节因子Rest/Nrsf、Shh慢病毒干扰载体转染并培养10 d,通过实时定量RTPCR和免疫荧光... 目的重编程诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛内分泌细胞分化并探讨其可能的分化机制。方法原代培养的大鼠骨髓MSCs经分离、培养至第3代后,用负向调节因子Rest/Nrsf、Shh慢病毒干扰载体转染并培养10 d,通过实时定量RTPCR和免疫荧光检测胰岛细胞分化相关基因的表达。结果 MSCs慢病毒转染后,胰岛素、胰高血糖素及生长抑素的表达明显升高,并表达胰岛内分泌细胞分化的相关基因。结论通过转染shRest/Nrsf、shShh慢病毒载体能够诱导大鼠MSCs向胰岛内分泌细胞分化,EGFR、ERK1、MMP以及PI3K等参与这一分化过程。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 负向调节因子 慢病毒载体 胰岛内分泌细胞

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PEI-Fe_3O_4纳米颗粒标记人羊膜上皮细胞 被引量：1

8

作者 张殿宝 李莹 +3 位作者 苏航 王竟 施萍 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期612-615,共4页

目的探索使用PEI-Fe_3O_4纳米颗粒标记人羊膜上皮细胞(h AEC)。方法采用透射电子显微镜和动态光散射表征PEI-Fe_3O_4纳米颗粒。使用纳米颗粒标记原代培养的h AEC,普鲁士蓝染色评价其标记效率,台盼蓝染色法和CCK-8法检测细胞存活率和细... 目的探索使用PEI-Fe_3O_4纳米颗粒标记人羊膜上皮细胞(h AEC)。方法采用透射电子显微镜和动态光散射表征PEI-Fe_3O_4纳米颗粒。使用纳米颗粒标记原代培养的h AEC,普鲁士蓝染色评价其标记效率,台盼蓝染色法和CCK-8法检测细胞存活率和细胞毒性。结果 PEI-Fe_3O_4纳米颗粒呈紧凑的球形,平均粒径为13 nm,水动力学半径为17.56 nm,zeta电位为+34.5 m V。浓度大于20μg/ml的纳米颗粒对h AEC的标记效率达到91%。50(t=16.37,P<0.0001;t=10.39,P<0.0001)、100μg/ml(t=29.89,P<0.0001;t=16.86,P<0.0001)纳米颗粒浓度下的h AEC存活率和细胞活力均明显低于未标记时。结论 PEI-Fe_3O_4纳米颗粒可用于标记h AEC,在其工作浓度下未表现出显著的细胞毒性。 展开更多

关键词 PEI-Fe3O4纳米颗粒 人羊膜上皮细胞 标记

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神经元抑制性沉默元件双链RNA慢病毒载体的构建与鉴定 被引量：1

9

作者 李宏图 刘晓玉 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期760-764,803,共6页

目的构建神经元抑制性沉默元件(RE-1/NRSE)双链RNA的慢病毒载体。方法根据RE-1/NRSE序列合成靶序列的寡核苷酸序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pGC-LV载体连接产生L-smRE-1/NRSE慢病毒载体,采用PCR和测序对阳性克隆进... 目的构建神经元抑制性沉默元件(RE-1/NRSE)双链RNA的慢病毒载体。方法根据RE-1/NRSE序列合成靶序列的寡核苷酸序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pGC-LV载体连接产生L-smRE-1/NRSE慢病毒载体,采用PCR和测序对阳性克隆进行鉴定。用L-smRE-1/NRSE和包装质粒pHelper 1.0、pHelper2.0共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,在倒置荧光显微镜下观察293T细胞中绿色荧光蛋白的表达量,并计算病毒滴度,初步观察其对大鼠间充质干细胞的转染效率。结果PCR和测序证实,构建出了RE-1/NRSE双链RNA的慢病毒载体L-smNRSE/RE-1。包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为4×108TU/ml。慢病毒颗粒能稳定转染大鼠间充质干细胞,当感染复数为80时,感染效率达100%。结论成功构建了RE-1/NRSE dsRNA的慢病毒表达载体。 展开更多

关键词 神经元抑制性沉默元件 双链RNA 慢病毒载体

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NRSE/RE-1序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系

10

作者 张涛 顾文佳 +1 位作者 刘晓玉 庞希宁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期412-415,共4页

目的探索神经限制性沉默元件(NRSE/RE-1)序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系。方法应用序贯诱导法定向诱导鼠胚胎干细胞分化为神经细胞,基因芯片筛选出的11种含NRSE/RE-1序列的神经相关基因,实时定量PCR测定其在分化过程中... 目的探索神经限制性沉默元件(NRSE/RE-1)序列与小鼠胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的关系。方法应用序贯诱导法定向诱导鼠胚胎干细胞分化为神经细胞,基因芯片筛选出的11种含NRSE/RE-1序列的神经相关基因,实时定量PCR测定其在分化过程中的表达。结果诱导分化后的胚胎干细胞表达多种成熟神经元标志,11种含NRSE/RE-1序列基因随诱导分化的进程表达量升高。结论鼠胚胎干细胞可通过序贯诱导分化为神经细胞,NRSE/RE-1序列可能是胚胎干细胞向神经元诱导分化的主要调控位点。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 神经元 细胞分化 神经限制性沉默元件

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小儿散发性脑炎致脑功能障碍70例分析

11

作者 关敏 李秀玲 +2 位作者 庞希宁 谢芳文 刘锡琴 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第3期225-227,共3页

通过70例分析,结果表明,小儿散发性脑炎如果发生脑功能障碍,可留有后遗症或智能低下。其发生率与意识障碍程度和抽搐频度成正比;CT、EEG证明与病变范围大小成正比,与病变部位有关。文内尚对高压氧治疗本病进行了探讨。

关键词 脑炎 脑功能障碍 儿童

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骨髓间充质干细胞移植促进大鼠损伤脊髓的功能恢复 被引量：2

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作者 刁延娜 马兰兰 +2 位作者 孟凡彪 李宏图 庞希宁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期7-9,共3页

目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠脊髓损伤的作用。方法将大鼠MSCs移植到大鼠脊髓损伤处,移植后评估大鼠行为学改变,免疫组织化学染色法观察BrdU标记的MSCs在脊髓损伤处存活情况,辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,观察脊髓损伤处... 目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠脊髓损伤的作用。方法将大鼠MSCs移植到大鼠脊髓损伤处,移植后评估大鼠行为学改变,免疫组织化学染色法观察BrdU标记的MSCs在脊髓损伤处存活情况,辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,观察脊髓损伤处神经通路的重构建,皮层体感诱发电位(CSEP)测定脊髓损伤处神经通路传导功能的恢复。结果术后移植组评分均高于损伤组,移植组大鼠脊髓损伤区远端检测到BrdU阳性细胞,脊髓损伤近侧端检测到HRP阳性细胞,CSEP波形恢复但波幅减低,潜伏时延长。结论MSCs可在损伤区存活并分化为神经元,在损伤局部形成神经元通路,使损伤脊髓的远端和近端建立联系,神经纤维传导功能部分恢复。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 脊髓损伤 移植

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神经元限制性沉默因子与大鼠骨髓间充质干细胞向神经元诱导分化的关系

13

作者 刘斌 李宏图 +3 位作者 张涛 孟凡彪 刘晓玉 庞希宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期702-706,799,共6页

目的分析神经元限制性沉默因子(NRSF)以及NRSF调控的基因在β-巯基乙醇诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元分化过程中表达的变化,探讨NRSF在大鼠MSCs向神经元分化的作用及MSCs向神经元分化的机制。方法采用β-巯基乙醇、无血清的D... 目的分析神经元限制性沉默因子(NRSF)以及NRSF调控的基因在β-巯基乙醇诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元分化过程中表达的变化,探讨NRSF在大鼠MSCs向神经元分化的作用及MSCs向神经元分化的机制。方法采用β-巯基乙醇、无血清的DMEM培养液和二甲基亚砜诱导大鼠MSCs分化成神经元,再通过实时定量PCR分析NRSF以及NRSF调控的基因在诱导前后表达的变化。结果应用β-巯基乙醇、无血清DMEM培养液和二甲基亚砜的诱导方案可以将MSCs诱导分化成神经元样细胞,诱导后的细胞神经元标记物神经元特异性烯醇化酶呈阳性,实时定量PCR检测NRSF基因表达显著下调,NRSF的靶基因神经营养酪氨酸激酶三型受体、突触相关蛋白25、L1细胞黏附分子、神经元钙结合蛋白受体表达有不同程度的上调。结论MSCs的神经元分化与NRSF下调及其调控的神经元分化相关基因表达上调有关。NRSF很可能是MSCs向神经元方向分化的关键基因,抑制NRSF表达可能是促进MSCs向神经元分化的关键步骤。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 神经元限制性沉默因子 分化 神经元

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辽宁省近11年小儿肾病综合征临床流行病学分析 被引量：3

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作者 庞希宁 王淑兰 +7 位作者 白桂珍 董秋玲 张丽君 张积连 姚振刚 卢瑞霞 李代华 鄢小风 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1995年第3期278-280,共3页

对辽宁省１１市１７所医院１９８１年～１９９１年小儿肾病综合征临床流行病学分析表明：其发病率为０．１５％～３．４１％，１９８５年以前平均每年发病率为０．４７％，而１９８６年以后为０．６４％，有增加的趋势，沿海地区如锦州... 对辽宁省１１市１７所医院１９８１年～１９９１年小儿肾病综合征临床流行病学分析表明：其发病率为０．１５％～３．４１％，１９８５年以前平均每年发病率为０．４７％，而１９８６年以后为０．６４％，有增加的趋势，沿海地区如锦州、大连较多，分别为１．６７％，０．７５％，而山区如朝阳、北票、本溪等较低，分别为０．１５％，０．２７％，０．２０％。平原地区如沈阳亦较低，为０．３２％。单纯性肾病无明显季节差异，肾炎性肾病以１月～３月及１．０月～１２月发病最多。其诱发因素以感染最多，为５３．３０％。并发症也以感染最多见，其中呼吸道、皮肤、尿路感染者为７９．４７％。提示肾病综合征的发病可能与地理条件及气候有关。 展开更多

关键词 儿童 肾病综合征 流行病学 辽宁

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肾病综合征患儿血红细胞抗氧化酶活力及LSFP含量的研究 被引量：3

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作者 庞希宁 宋今丹 +3 位作者 王淑兰 胡耀奇 冯晶 刘桂茹 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1995年第2期122-124,共3页

本文对１７例肾病综合征（ＮＳ）患儿和１５例健康对照组儿童血红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力，脂溶性荧光色素（ＬＳＦＰ）含量进行了研究。结果表明，ＮＳ急性期Ｓ... 本文对１７例肾病综合征（ＮＳ）患儿和１５例健康对照组儿童血红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力，脂溶性荧光色素（ＬＳＦＰ）含量进行了研究。结果表明，ＮＳ急性期ＳＯＤ、ＣＡＴ活力降低，ＬＳＦＰ含量增加。恢复期ＳＯＤ较急性期明显提高，但仍低于正常对照组，ＣＡＴ与正常对照组无显著差异，ＬＳＦＰ较急性期明显降低，但仍高于正常对照组。ＧＳＨ－Ｐｘ在急性期及恢复期均无明显改变。说明ＮＳ存在ＳＯＤ，ＣＡＴ、ＬＳＦＰ的改变，但可逐渐恢复。 展开更多

关键词 肾病综合征 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 GSH-PX

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