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RPA-CRISPR/Cas12a结合重力驱动微流控芯片的MTB快检方法的建立
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作者 高畅 庄添驰 +4 位作者 李宁 刘云 顾鹏飞 赵昕怡 季明辉 《生物技术通报》 北大核心 2025年第5期62-69,共8页
【目的】开发一种快速高效的结核分枝杆菌(MTB)检测方法,给基层单位、偏远地区的结核病(Tuberculosis)快速筛查提供技术方案,更好地开展结核病的防治工作。【方法】设计RPA引物、crRNA,并引入重力驱动的微流控芯片,建立RPA-CRISPR/Cas12... 【目的】开发一种快速高效的结核分枝杆菌(MTB)检测方法,给基层单位、偏远地区的结核病(Tuberculosis)快速筛查提供技术方案,更好地开展结核病的防治工作。【方法】设计RPA引物、crRNA,并引入重力驱动的微流控芯片,建立RPA-CRISPR/Cas12a的片上检测方法,进一步分析该方法的灵敏度与特异性,使用疑似结核病患者的样本进行片上检测和痰培养,比较建立的方法与痰培养法的一致性。【结果】建立的RPA-CRISPR/Cas12a片上检测方法可在30 min内实现MTB检测,LOD为1copies/μL。以痰培养鉴定为参考标准,片上检测法的灵敏度为91.11%,特异度为94.34%,阳性预测值为93.19%,阴性预测值为92.59%,准确性为92.86%,Kappa值为0.856。【结论】建立的RPA-CRISPR/Cas12a的片上检测法的灵敏度、特异性高,并且快速、简单、便捷。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 重组酶聚合酶扩增 CRISPR/Cas12a 微流控芯片 快速检测
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