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西尼罗河病毒病竞争ELISA检测方法的初步建立及应用
被引量：
3
1
作者
常娓娓
王淑娟
+3 位作者
吴晓东
刘华雷
赵永刚
王志亮
《中国动物检疫》
CAS
2011年第9期31-34,共4页
本研究用表达的西尼罗河病毒(WNV)囊膜蛋白E结构域III蛋白作为包被抗原,单抗8F4A4作为竞争检测抗体,初步建立了能够对乙型脑炎病毒(JEV)和WNV进行鉴别诊断的竞争ELISA方法。优化的最佳抗原包被浓度为530ng/mL,单抗的最佳稀释倍数为1:80...
本研究用表达的西尼罗河病毒(WNV)囊膜蛋白E结构域III蛋白作为包被抗原,单抗8F4A4作为竞争检测抗体,初步建立了能够对乙型脑炎病毒(JEV)和WNV进行鉴别诊断的竞争ELISA方法。优化的最佳抗原包被浓度为530ng/mL,单抗的最佳稀释倍数为1:8000,待检血清的最佳稀释倍数为1:10。通过对56份阴性样品进行检测确定了该方法的临界值为30%,以此为判定标准对临床220份血清进行检测,结果均为阴性。此方法的建立弥补了商品化试剂盒不能区分JEV和WNV感染的缺陷,为我国西尼罗河病毒病的流行病学调查提供了一种有效的抗体检测方法。
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关键词
西尼罗河病毒
囊膜蛋白
单克隆抗体
竞争ELISA
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职称材料
基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立
被引量：
4
2
作者
孙军峰
刘华雷
+6 位作者
王志亮
赵云玲
郑东霞
张维
刘文华
冯莉莉
常娓娓
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1447-1452,共6页
根据基因ⅤⅡ型新城疫病毒F基因裂解位点特征设计一对引物和TaqMan探针,建立一种敏感、特异、重复性良好的基因ⅤⅡ型毒株荧光定量RT-PCR鉴别检测方法。以体外转录法制备的cRNA标准品为标准阳性模板,构建标准曲线,并进行各项指标的检测...
根据基因ⅤⅡ型新城疫病毒F基因裂解位点特征设计一对引物和TaqMan探针,建立一种敏感、特异、重复性良好的基因ⅤⅡ型毒株荧光定量RT-PCR鉴别检测方法。以体外转录法制备的cRNA标准品为标准阳性模板,构建标准曲线,并进行各项指标的检测。结果表明,建立的方法特异性良好,最低可检测到102拷贝·μL-1的模板RNA,敏感性比普通RT-PCR高100倍。本试验建立了基因ⅤⅡ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法,且该方法能够鉴别检测常规方法不能区分的新城疫病毒基因ⅤⅡ型强毒株,表明本研究建立的方法可用于此种基因型毒株的快速鉴别检测。
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关键词
新城疫病毒
基因Ⅶ型
荧光定量RT-PCR
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职称材料
题名
西尼罗河病毒病竞争ELISA检测方法的初步建立及应用
被引量：
3
1
作者
常娓娓
王淑娟
吴晓东
刘华雷
赵永刚
王志亮
机构
中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心
扬州大学兽医学院
出处
《中国动物检疫》
CAS
2011年第9期31-34,共4页
文摘
本研究用表达的西尼罗河病毒(WNV)囊膜蛋白E结构域III蛋白作为包被抗原,单抗8F4A4作为竞争检测抗体,初步建立了能够对乙型脑炎病毒(JEV)和WNV进行鉴别诊断的竞争ELISA方法。优化的最佳抗原包被浓度为530ng/mL,单抗的最佳稀释倍数为1:8000,待检血清的最佳稀释倍数为1:10。通过对56份阴性样品进行检测确定了该方法的临界值为30%,以此为判定标准对临床220份血清进行检测,结果均为阴性。此方法的建立弥补了商品化试剂盒不能区分JEV和WNV感染的缺陷,为我国西尼罗河病毒病的流行病学调查提供了一种有效的抗体检测方法。
关键词
西尼罗河病毒
囊膜蛋白
单克隆抗体
竞争ELISA
Keywords
West Nile virus （WNV）
Envelope protein
Monlclonal antibody
cELISA
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立
被引量：
4
2
作者
孙军峰
刘华雷
王志亮
赵云玲
郑东霞
张维
刘文华
冯莉莉
常娓娓
机构
中国动物卫生与流行病学中心
青岛农业大学
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1447-1452,共6页
基金
青岛市科技发展计划项目(07-2-3-5-jch)
文摘
根据基因ⅤⅡ型新城疫病毒F基因裂解位点特征设计一对引物和TaqMan探针,建立一种敏感、特异、重复性良好的基因ⅤⅡ型毒株荧光定量RT-PCR鉴别检测方法。以体外转录法制备的cRNA标准品为标准阳性模板,构建标准曲线,并进行各项指标的检测。结果表明,建立的方法特异性良好,最低可检测到102拷贝·μL-1的模板RNA,敏感性比普通RT-PCR高100倍。本试验建立了基因ⅤⅡ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法,且该方法能够鉴别检测常规方法不能区分的新城疫病毒基因ⅤⅡ型强毒株,表明本研究建立的方法可用于此种基因型毒株的快速鉴别检测。
关键词
新城疫病毒
基因Ⅶ型
荧光定量RT-PCR
Keywords
Newcastle disease virus
genotype Ⅶ
real-time fluorescent quantitative RT-PCR
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
西尼罗河病毒病竞争ELISA检测方法的初步建立及应用
常娓娓
王淑娟
吴晓东
刘华雷
赵永刚
王志亮
《中国动物检疫》
CAS
2011
3
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职称材料
2
基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立
孙军峰
刘华雷
王志亮
赵云玲
郑东霞
张维
刘文华
冯莉莉
常娓娓
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
4
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