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RKIP通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路诱导细粒棘球蚴囊液致敏的肥大细胞凋亡
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作者 蒲雪莉 李玉倩 +8 位作者 周静茹 王佳玲 王春生 苏比·泰来提 蔺佳英 巴特苏荣·巴一娜 曹力微 古丽给雅·帕热哈提 叶建荣 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第5期508-514,共7页
目的探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitory protein,RKIP)对细粒棘球蚴囊液致敏的肥大细胞凋亡的影响及其作用机制。方法分离提取培养RKIP基因敲除型(KO)与野生型C57BL/6(WT)小鼠股骨及胫骨骨髓来源肥大细胞(Bone marrow derived ... 目的探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitory protein,RKIP)对细粒棘球蚴囊液致敏的肥大细胞凋亡的影响及其作用机制。方法分离提取培养RKIP基因敲除型(KO)与野生型C57BL/6(WT)小鼠股骨及胫骨骨髓来源肥大细胞(Bone marrow derived mast cells,BMMC),分别设置对照组与致敏组,致敏组使用含10%细粒棘球蚴感染小鼠血清的RPMI1640培养基孵育24 h后细粒棘球蚴囊液激活3 h、6 h,对照组加入同等体积的RPMI1640培养基孵育24 h后加入同等体积PBS,收集细胞与上清。流式细胞术检测BMMC表面CD117及FcεRⅠα表达情况;ELISA检测上清中β-氨基己糖苷酶、IL-4、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;Western Blot检测BMMC致敏前后RKIP蛋白、凋亡相关蛋白及通路蛋白的表达变化。结果流式细胞仪检测结果显示,诱导培养4周的WT与KO BMMC表面CD117与FcεRⅠα双阳性率均在90%以上;ELISA结果显示与WT致敏组相比,KO致敏组细粒棘球蚴囊液可使肥大细胞β-氨基己糖苷酶释放率(F=16.88,P<0.05)及相关细胞因子IL-4(F=16.51,P<0.05)、TNF-α(F=9.78,P<0.05)释放量增加,差异有统计学意义;Western Blot显示致敏后,与WT对照组相比,WT致敏组3 h后RKIP(F=8.20,P<0.05)和Bcl-2(F=101.40,P<0.01)蛋白表达水平降低,p-PI3K(F=8.04,P<0.05)、p-Akt(F=32.52,P<0.01)、p-P65(F=13.29,P<0.05)、cleaved-caspase-3(F=46.34,P<0.01)蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义,与WT致敏组相比,KO致敏组3 h后p-PI3K(F=8.45,P<0.05)、p-Akt(F=8.58,P<0.05)、p-P65(F=11.02,P<0.05)、Bcl-2(F=84.50,P<0.001)蛋白表达水平升高,cleaved-caspase-3(F=15.66,P<0.05)蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义。结论RKIP可能通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路诱导细粒棘球蚴囊液致敏的肥大细胞凋亡,从而减轻肥大细胞参与的细粒棘球蚴过敏反应,有望为预防和治疗细粒棘球蚴病所致过敏反应开拓新的干预路径。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴囊液 肥大细胞 RKIP 细胞凋亡
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