基于OBE理念的动物外科手术学实践教学模式的改革实践与探索

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作者 郭方超 雷昕诺 +3 位作者 赵爱华 王永娟 左伟勇 武彩红 《广东职业技术教育与研究》 2024年第7期126-129,共4页

为培养动物医学专业学生专业实践技能和综合素质能力,本研究探讨了基于成果导向教育(OBE)理念的教学模式在动物外科手术学实践教学中的可行性和效果。提出以学生为中心,以学习成效为目标的教学模式,以达到充分调动学生的积极性、培养扎... 为培养动物医学专业学生专业实践技能和综合素质能力,本研究探讨了基于成果导向教育(OBE)理念的教学模式在动物外科手术学实践教学中的可行性和效果。提出以学生为中心,以学习成效为目标的教学模式,以达到充分调动学生的积极性、培养扎实的实践技能和创新意识的目的。为此,我们对传统的实践教学模式和考核体系进行了改革,明确了成果导向的学习目标,增加了学生探索性实践操作的比重,强化了创新思维的培养。结果显示,相较于传统教学模式,OBE理念教学模式显著提高了学生的课堂参与度和学习成效,学生的实践操作能力、独立解决问题能力和创新思维能力均得到显著提升。结果表明:OBE理念教学模式为动物外科手术学实践教学提供了新的教学思路,在高等职业教育专业技能实践教学中具有良好的推广价值。 展开更多

关键词 OBE理念 动物外科手术学 实践教学

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伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对双歧杆菌增殖的影响 被引量：6

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作者 左伟勇 陈伟华 邹思湘 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期10-13,共4页

大豆种子的贮藏蛋白主要由2种球蛋白组成,伴大豆球蛋白(conglycinin)是其中一种,它由3个不同的亚基组成。文中对伴大豆球蛋白进行了分离纯化,并研究了其体外经过胃蛋白酶水解后的肽对双歧杆菌增殖的影响。结果表明,分离纯化的伴大豆球... 大豆种子的贮藏蛋白主要由2种球蛋白组成,伴大豆球蛋白(conglycinin)是其中一种,它由3个不同的亚基组成。文中对伴大豆球蛋白进行了分离纯化,并研究了其体外经过胃蛋白酶水解后的肽对双歧杆菌增殖的影响。结果表明,分离纯化的伴大豆球蛋白纯度为90.13％,可供生理功能的研究,经胃蛋白酶水解后的肽能够促进双歧杆菌的增殖,表现出一定的生物活性作用。 展开更多

关键词 大豆 伴大豆球蛋白 胃蛋白酶 水解肽 双歧杆菌 增殖作用 生理功能

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伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解产物中促双歧杆菌增殖肽的分离和鉴定 被引量：4

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作者 左伟勇 陈伟华 邹思湘 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期83-85,88,共4页

大豆贮藏蛋白主要包括大豆球蛋白(Glycinin)和伴大豆球蛋白(Conglycinin),本研究采用Sephadex-G15凝胶过滤和薄层层析的方法,对伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解产物中促双歧杆菌增殖肽进行分离,所得活性组分通过毛细管HPLC及质谱进行鉴定,结... 大豆贮藏蛋白主要包括大豆球蛋白(Glycinin)和伴大豆球蛋白(Conglycinin),本研究采用Sephadex-G15凝胶过滤和薄层层析的方法,对伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解产物中促双歧杆菌增殖肽进行分离,所得活性组分通过毛细管HPLC及质谱进行鉴定,结果表明,分离得到促双歧杆菌增殖活性最强的组分是由性质相近的肽混合物组成,通过毛细管HPLC可以得到活性酶解肽的图谱,并通过质谱可知酶解肽主要由6-10个氨基酸残基组成。上述结果提示,伴大豆球蛋白中的生物活性物质是以无活性的形式存在于蛋白质的多肽链中,必须通过适当酶解,在一定条件下才能释放出来,发挥出各种生物学功能。 展开更多

关键词 伴大豆球蛋白 水解肽 分离纯化 鉴定 双歧杆菌

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灌喂大豆蛋白胃蛋白酶酶解物对大鼠免疫功能的影响 被引量：19

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作者 杨小军 左伟勇 +1 位作者 陈伟华 邹思湘 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期348-351,共4页

经碱提酸沉法制备大豆蛋白,胃蛋白酶水解,茚三酮法测定水解液水解度,系统观察了灌喂1mL的5mg/mL的大豆蛋白酶解物对大鼠免疫功能的影响。结果表明:大豆蛋白水解液含氮量为(2.15±0104)mg/mL,水解度为14.49%,平均肽链长度为6.9。灌喂... 经碱提酸沉法制备大豆蛋白,胃蛋白酶水解,茚三酮法测定水解液水解度,系统观察了灌喂1mL的5mg/mL的大豆蛋白酶解物对大鼠免疫功能的影响。结果表明:大豆蛋白水解液含氮量为(2.15±0104)mg/mL,水解度为14.49%,平均肽链长度为6.9。灌喂21d后,发现胸腺、脾脏指数较对照组分别上升了24%(P<0101)和32%(P<0101);灌喂大豆蛋白酶解物能显著促进大鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性;该组比对照组A570上升67%(P<0101);大鼠外周血淋巴细胞转化明显增强,试验组较对照组上升了82.8%。能显著提高大鼠血清抗体的血凝抑制效价(hemagglutination inhibition titer,HI),试验组比对照组HI值上升了33.3%,差异极显著(P<0101);试验组的肠腔sIgA水平较对照组上升了34.3%,差异极显著(P<0101);灌喂大豆蛋白酶解物能极显著提高血液IL22和Leptin水平。试验结果表明灌喂大豆蛋白酶解物能增强大鼠免疫功能,主要是酶解肽的生物活性的作用结果,并非营养调节作用的结果,酶解物对大鼠消化代谢影响不大。 展开更多

关键词 免疫功能 大鼠 胃蛋白酶 外周血淋巴细胞转化 蛋白酶解物 大豆蛋白水解液 腹腔巨噬细胞 Leptin 碱提酸沉法 蛋白酶水解 试验组 系统观察 脾脏指数 吞噬活性 血凝抑制 血清抗体 sIgA IL-2 试验结果 生物活性 调节作用 代谢影响

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大豆黄酮对产蛋鸡摄食行为及有关内分泌的影响 被引量：11

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作者 孟婷 左伟勇 +1 位作者 韩正康 王国杰 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第3期1049-1050,共2页

选用35周龄伊莎产蛋鸡8只，分别安装慢性颈静脉血管插管，手术后经过适应期，待产蛋鸡体况良好、摄食正常，开始实验。实验采用自身对照法，对照期饲喂基础日粮，实验期在喂料前通过颈静脉血管插管注射大豆黄酮。应用摄食行为计算机监... 选用35周龄伊莎产蛋鸡8只，分别安装慢性颈静脉血管插管，手术后经过适应期，待产蛋鸡体况良好、摄食正常，开始实验。实验采用自身对照法，对照期饲喂基础日粮，实验期在喂料前通过颈静脉血管插管注射大豆黄酮。应用摄食行为计算机监测系统（FIDAS系统）记录各个实验期产蛋鸡喂料后4h内的采食行为数据。结果显示，实验期（注射大豆黄酮后）与对照期相比较，产蛋鸡午前（8：00～12：00）与午后（13：00～17：00）4h内摄食量分别增加21．9％与33.9％（P〈0．05）；摄食时间分别增加3，3％与12，3％；摄食餐数分别增加14．3％与49．1％（P〈0．01）：血糖水平分别降低10．3％（P〈0.05）与21，5％（P〈0.01），瘦素水平分别升高14.9％与4．32％，胰岛素水平分别升高14．6％与27．7％（P〈0．01）。提示大豆黄酮能够促进蛋鸡摄食，并影响有关内分泌激素的水平。 展开更多

关键词 产蛋鸡 大豆黄酮 摄食行为 瘦素 胰岛素

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鸡支康口服液的亚慢性毒性试验研究 被引量：8

6

作者 洪伟鸣 左伟勇 +2 位作者 宋亮 黄文强 郁杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期140-143,共4页

试验根据《兽药试验技术规范汇编》进行了鸡支康口服液对小白鼠的亚慢性毒性研究,试验设高、中、低3个剂量组,另设空白对照组,连续给药28 d后剖杀各组小鼠,观察其临床表现,并进行血常规和血液生化指标检测及脏器系数和组织病毒学检查。... 试验根据《兽药试验技术规范汇编》进行了鸡支康口服液对小白鼠的亚慢性毒性研究,试验设高、中、低3个剂量组,另设空白对照组,连续给药28 d后剖杀各组小鼠,观察其临床表现,并进行血常规和血液生化指标检测及脏器系数和组织病毒学检查。统计学分析结果表明,各组间的体重变化和脏器系数均无显著差异(P>0.05);血常规检查结果表明,试验组的红细胞数、血小板数、红细胞压积及淋巴细胞数与空白对照组相比呈下降趋势,但差异不显著(P>0.05),其余各检测指标各试验组与空白对照组相比差异均不显著(P>0.05);血液生化指标结果表明,试验组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶及血糖含量与空白对照组相比呈下降趋势,但差异不显著(P>0.05),其余各检测指标各试验组与空白对照组相比差异均不显著(P>0.05);组织病理学检查结果显示,小鼠的主要内脏器官未见明显异常。试验结果表明,鸡支康口服液对小鼠血常规和血液生化指标影响甚微。提示,其按临床剂量使用无毒性反应,安全可靠。 展开更多

关键词 鸡支康口服液 小鼠 亚慢性毒性试验

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细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4增强传染性法氏囊病病毒VP2质粒DNA的免疫效应分析 被引量：3

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作者 王永娟 朱善元 +2 位作者 李碧春 胡成 左伟勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期824-829,共6页

为评价分子佐剂细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)对IBDV VP2质粒DNA的免疫增强作用,试验采用重组质粒载体表达重组蛋白mLTA-VP2-CTLA-4和mLTA-CTLA-4,家兔毒性试验确定其安全性,后选择10日龄非免疫健康鸡进行随机分组试验,设不同剂量... 为评价分子佐剂细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)对IBDV VP2质粒DNA的免疫增强作用,试验采用重组质粒载体表达重组蛋白mLTA-VP2-CTLA-4和mLTA-CTLA-4,家兔毒性试验确定其安全性,后选择10日龄非免疫健康鸡进行随机分组试验,设不同剂量mLTA-CTLA-4加IBD活疫苗免疫组、不同剂量mLTAVP2-CTLA-4免疫组、IBD活疫苗免疫组及空白对照组,免疫后用ELISA法定期检测鸡血清抗体IgG及小肠黏膜抗体IgA效价;鸡在加强免疫后用IBDV野生毒株攻击,连续观察2周并计算保护率。结果显示,mLTA-VP2-CTLA-4免疫组、mLTA-CTLA-4加活疫苗共同免疫组产生的IgG和IgA抗体水平与活疫苗免疫组无明显差别,mLTA-CTLA-4加活疫苗共同免疫组产生的IgG和IgA抗体水平略高于mLTA-VP2-CTLA-4免疫组,疫苗对鸡的保护率为100%。结果表明,构建的IBDV分子佐剂DNA疫苗载体能表达无毒性的重组蛋白质,并能产生很好的免疫保护率,为进一步研究IBD亚单位疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病 分子佐剂 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 VP2 DNA疫苗

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染料木素对肉鸭屠宰性能及脂肪代谢的影响 被引量：6

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作者 孟婷 左伟勇 +1 位作者 王健 韩正康 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第12期207-209,共3页

本试验旨在探讨日粮中添加染料木素对肉鸭屠宰性能及脂肪代谢的影响。选取1日龄樱桃谷肉鸭300羽,雌雄各半,按照配对试验原则分为3组,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组和Ⅱ组日粮中分别添加36、mg/kg染料木素,每组100羽,雌雄各50只,试验进行... 本试验旨在探讨日粮中添加染料木素对肉鸭屠宰性能及脂肪代谢的影响。选取1日龄樱桃谷肉鸭300羽,雌雄各半,按照配对试验原则分为3组,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组和Ⅱ组日粮中分别添加36、mg/kg染料木素,每组100羽,雌雄各50只,试验进行7周后,从每个处理组抽取20只肉鸭,屠宰用于试验测定(每组10公10母)。结果显示,与相应对照组相比,日粮中添加染料木素对母鸭屠宰性能和血清生化指标无显著影响。日粮中分别添加3、6 mg/kg染料木素均可显著降低雄性肉鸭腹脂率、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与总胆固醇(T-CHO)水平;添加6 mg/kg染料木素还可显著提高雄性肉鸭瘦肉率及血清瘦素水平。本试验结果表明,染料木素可通过生化途径促进雄性樱桃谷肉鸭的脂防代谢,并表现出明显的性别差异。 展开更多

关键词 染料木素 屠宰指标 脂肪代谢 鸭

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大肠埃希菌ETT2毒力岛ECs3703基因和HPI毒力岛irp2基因双重LAMP检测方法的建立 被引量：4

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作者 蔡树东 成大荣 +2 位作者 朱善元 吴双 左伟勇 《动物医学进展》 北大核心 2017年第1期1-5,共5页

根据GenBank中大肠埃希菌ETT2毒力岛保守基因ECs3703和HPI毒力岛的保守基因irp2分别设计一套LAMP引物,在同一体系中进行LAMP扩增,通过对体系Mg2+、dNTP、内引物及反应温度和反应时间等进行优化,建立了在60℃恒温下对大肠埃希菌ETT2和HP... 根据GenBank中大肠埃希菌ETT2毒力岛保守基因ECs3703和HPI毒力岛的保守基因irp2分别设计一套LAMP引物,在同一体系中进行LAMP扩增,通过对体系Mg2+、dNTP、内引物及反应温度和反应时间等进行优化,建立了在60℃恒温下对大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛进行同步检测的LAMP方法,并进行了特异性和灵敏性试验。结果显示,所建立的双重LAMP检测方法同时检测ETT2和HPI毒力岛大肠埃希菌检测限均可达到100fg,比常规PCR灵敏度高100倍。利用该方法对8株非大肠埃希菌进行LAMP扩增,结果均为阴性。用该方法对采集的20份临床样品进行检测,与双重PCR检测结果一致。结果显示,该双重LAMP方法可用于大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛的同步快速检测,可作为临床疫病诊断的有效手段。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 ETT2毒力岛 HPI毒力岛 双重LAMP

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鸭瘟病毒环介导等温扩增检测方法的建立及应用 被引量：5

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作者 马丽丽 吴双 +5 位作者 胡成 左伟勇 洪伟鸣 王永娟 贾宁 朱善元 《动物医学进展》 北大核心 2015年第4期27-31,共5页

为建立一种简便、快速、灵敏度高、特异性好的鸭瘟病毒(DPV)检测方法,根据GenBank中公布的DPV UL6基因组序列,设计了3对特异性引物,建立了LAMP快速检测方法。该方法的灵敏度可达0.1fg,对其他鸭常见病原体检测结果均为阴性,扩增反应只需... 为建立一种简便、快速、灵敏度高、特异性好的鸭瘟病毒(DPV)检测方法,根据GenBank中公布的DPV UL6基因组序列,设计了3对特异性引物,建立了LAMP快速检测方法。该方法的灵敏度可达0.1fg,对其他鸭常见病原体检测结果均为阴性,扩增反应只需在水浴锅中60min内即可完成,可通过肉眼观察颜色变化直接判定结果。结果表明,所建立的LAMP方法简便快捷,省时省力,是适用于现场和基层实验室快速、准确检测DPV的分子生物学方法。 展开更多

关键词 鸭瘟病毒 环介导等温扩增技术 检测

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伴大豆球蛋白的酶解研究 被引量：3

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作者 陈文芳 左伟勇 +2 位作者 李倬 苏治国 宋昌军 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第7期2835-2837,共3页

[目的]筛选水解伴大豆球蛋白效率高的蛋白酶。[方法]采用几种常用的蛋白酶水解伴大豆球蛋白,以水解度为指标,筛选最适水解伴大豆球蛋白的蛋白酶,并对水解工艺进行初步优化研究。[结果]在相同水解条件下,复合风味蛋白酶对伴大豆球蛋白的... [目的]筛选水解伴大豆球蛋白效率高的蛋白酶。[方法]采用几种常用的蛋白酶水解伴大豆球蛋白,以水解度为指标,筛选最适水解伴大豆球蛋白的蛋白酶,并对水解工艺进行初步优化研究。[结果]在相同水解条件下,复合风味蛋白酶对伴大豆球蛋白的水解能力相对较强,水解率达到22%,因而选用其作为酶解伴大豆球蛋白的工具酶。通过单因素试验和正交试验确定复合风味蛋白酶水解伴大豆球蛋白的最佳条件:pH值为7,温度为50℃,底物浓度为14%,酶与底物浓度比为6%,酶解时间为8 h。[结论]该研究为伴大豆球蛋白的开发应用提供了理论和试验依据。 展开更多

关键词 伴大豆球蛋白 蛋白酶 酶解 水解度

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鸭源新城疫病毒F基因在昆虫细胞中的表达和鉴定 被引量：2

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作者 王安平 朱善元 +3 位作者 王永娟 吴双 左伟勇 洪伟鸣 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第11期2862-2866,共5页

为在昆虫细胞中表达鸭源新城疫病毒(NDV)F蛋白,本试验首先根据鸭源NDV F基因序列设计引物,PCR扩增出F基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,获得重组转座载体pFastBac-F,将其转化到大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,经抗性和蓝白斑筛选... 为在昆虫细胞中表达鸭源新城疫病毒(NDV)F蛋白,本试验首先根据鸭源NDV F基因序列设计引物,PCR扩增出F基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,获得重组转座载体pFastBac-F,将其转化到大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-F,在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-F。Western blotting、间接免疫荧光试验结果均显示表达的重组蛋白能与鸭抗NDV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。结果表明鸭源NDV F蛋白在昆虫细胞中获得了成功表达,为鸭新城疫的预防控制奠定了基础。 展开更多

关键词 鸭源新城疫病毒 F基因 昆虫细胞 表达

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慢病毒介导siRNA抑制1型鸭肝炎病毒复制 被引量：1

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作者 王永娟 董亚青 +4 位作者 朱善元 王安平 洪伟鸣 吴双 左伟勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期522-529,共8页

为筛选能抑制DHAV-1复制的siRNA,探索RNAi技术在鸭病毒性肝炎防治中的应用,采用PCR法扩增DHAV-1 RdRp基因,并构建pEGFP-RdRp融合表达EGFP-RdRp蛋白;根据RdRp的序列测定结果,设计3条RdRp特异siRNA,并合成相应shRNA分别插入pmiRZipΔ中构... 为筛选能抑制DHAV-1复制的siRNA,探索RNAi技术在鸭病毒性肝炎防治中的应用,采用PCR法扩增DHAV-1 RdRp基因,并构建pEGFP-RdRp融合表达EGFP-RdRp蛋白;根据RdRp的序列测定结果,设计3条RdRp特异siRNA,并合成相应shRNA分别插入pmiRZipΔ中构建pRdRp-shRNA;共转染pRdRp-shRNA和pEGFP-RdRp于HEK-293T细胞,通过荧光显微镜法、流式细胞术、相对荧光定量PCR法筛选抑制效率较高的siRNA;将高效siRNA用于病毒载体pmiRZip介导的慢病毒制备;通过计算重组慢病毒转导、DHAV-1感染的鸭胚胎成纤维细胞中病毒TCID50和RdRp基因表达量确定siRNA对病毒及病毒基因的抑制作用。结果显示,3个siRNA均能抑制RdRp基因的表达,包含GDD模体的shRNA2的抑制率最高,对应重组病毒能使DHAV-1的TCID50下降6.2lg,RdRp基因转录量下降89.6%,抑制时间至少达120h,为鸭病毒性肝炎临床防治提供了新思路。 展开更多

关键词 鸭病毒性肝炎 GDD模体 RDRP RNA干扰 siRNA

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华东地区猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查研究 被引量：2

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作者 洪伟鸣 左伟勇 +4 位作者 宋亮 吉光杰 张晔 杨佳文 陈海峰 《安徽农业科学》 CAS 2020年第14期92-93,96,共3页

为了解华东地区猪繁殖与呼吸综合征的感染状况,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)/聚合酶链反应(PCR)方法对2017—2018年在华东地区各大中小规模猪场采集的210份临床样品进行病原学检测(肺、脾、淋巴结等),并对分离的猪繁殖与呼吸综合征... 为了解华东地区猪繁殖与呼吸综合征的感染状况,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)/聚合酶链反应(PCR)方法对2017—2018年在华东地区各大中小规模猪场采集的210份临床样品进行病原学检测(肺、脾、淋巴结等),并对分离的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)进行测序,由于2017—2018年江苏、安徽和福建一些中小养殖场发生小规模的流产死胎,因此也对其他一些相关常见病毒[如猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)]进行了检测,以确定导致流产死胎的主要原因以及猪繁殖与呼吸综合征的流行情况和流行毒株。结果表明:210份样品中,PRRSV阳性样品78份,阳性率为37.1%;PCV2阳性样品189份,阳性率90.0%;PRV阳性样品5份,阳性率2.4%;CSFV阳性样品0份,阳性率0。在这些阳性样品中,福建、浙江、上海、江苏、安徽、江西和山东等地区抗原阳性率有所差别,但都以PRRSV和PCV2为主。通过此次调查了解了华东地区猪繁殖与呼吸综合征的基本流行情况,为今后猪繁殖与呼吸综合征的防控提供了参考。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 流行病学 阳性率

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一种抗猪流行性腹泻的中药复方制剂的亚慢性毒性试验 被引量：1

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作者 洪伟鸣 徐懿 +3 位作者 宋亮 陈海峰 吉光杰 左伟勇 《安徽农业科学》 CAS 2018年第31期74-76,共3页

[目的]为了观察一种抗猪流行性腹泻病的中药复方制剂的亚慢性毒性。[方法]根据《兽药试验技术规范汇编》中的亚慢性毒性试验技术要求;选用小白鼠进行了亚慢性毒性研究。[结果]试验组与空白对照组实验数据相比差异不显著(P>0.05),表... [目的]为了观察一种抗猪流行性腹泻病的中药复方制剂的亚慢性毒性。[方法]根据《兽药试验技术规范汇编》中的亚慢性毒性试验技术要求;选用小白鼠进行了亚慢性毒性研究。[结果]试验组与空白对照组实验数据相比差异不显著(P>0.05),表明该复方制剂对小鼠血常规检查和血液生化指标检测没有造成任何不良影响。[结论]临床使用该复方制剂进行治疗安全可靠。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻 中药复方制剂 小鼠 亚慢性毒性

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T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库的构建

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作者 洪伟鸣 李睿婷 +4 位作者 郭子杰 徐海 左伟勇 张亮 宋亮 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第12期2640-2647,共8页

为筛选遗传背景清晰、裂解性能优良、宿主识别谱广泛的噬菌体用于抗菌产品开发,满足畜禽减抗、无抗养殖需求,通过易错PCR技术定向改变T7噬菌体尾丝蛋白羧基末端基因序列,并构建T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库,为筛选识别不同宿主的T7噬... 为筛选遗传背景清晰、裂解性能优良、宿主识别谱广泛的噬菌体用于抗菌产品开发,满足畜禽减抗、无抗养殖需求,通过易错PCR技术定向改变T7噬菌体尾丝蛋白羧基末端基因序列,并构建T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库,为筛选识别不同宿主的T7噬菌体奠定基础。提取T7噬菌体基因组,用SfiⅠ进行单酶切,回收SfiⅠ位点左侧基因组。常规PCR扩增尾丝蛋白羧基末端基因序列(TF-ct,约350 bp)以及gene17至T7基因组右侧末端基因序列(约4000 bp)。以回收的TF-ct片段为模板,进行易错PCR扩增,将随机突变的TF-ct基因片段连接T载体,构建质粒文库。从质粒文库中用SfiⅠ/SphⅠ双酶切出TF-ct片段,并与SfiⅠ位点左侧基因组片段、gp17右侧基因组片段进行连接,利用包装蛋白拯救出T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库。结果易错PCR成功扩增TF-ct基因片段,并连接T载体构建质粒文库;同时随机突变的基因正确插入T7噬菌体基因组相应位置,成功拯救出尾丝蛋白定向进化T7噬菌体文库。从噬菌体文库中随机挑选15个克隆进行序列分析,目的基因的突变率在1.23%~2.16%;尾丝蛋白loop区域的氨基酸突变改变了T7噬菌体吸附宿主的能力。本研究成功构建T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库,验证了loop区域在T7噬菌体识别宿主过程的作用,为后续筛选有益噬菌体开发抗菌产品提供支撑。 展开更多

关键词 T7噬菌体 尾丝蛋白 随机进化 宿主识别

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猪α干扰素表达蛋白ab的抗病毒效果研究

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作者 陆辉 朱善元 +2 位作者 左伟勇 洪伟鸣 吴双 《安徽农业科学》 CAS 2012年第3期1509-1510,1522,共3页

[目的]探索猪α干扰素表达蛋白ab的抗病毒效果。[方法]通过测定猪α干扰素(PoIFN-α)表达的融合蛋白ab对接种水泡性口炎病毒(VSV)的牛肾细胞(MDBK)保护作用的效价,来研究其抗病毒效果。通过中和试验,测定保护50%细胞不产生病变所需PoIFN... [目的]探索猪α干扰素表达蛋白ab的抗病毒效果。[方法]通过测定猪α干扰素(PoIFN-α)表达的融合蛋白ab对接种水泡性口炎病毒(VSV)的牛肾细胞(MDBK)保护作用的效价,来研究其抗病毒效果。通过中和试验,测定保护50%细胞不产生病变所需PoIFN-α表达的融合蛋白ab的稀释度。[结果]PoIFN-α表达的融合蛋白ab具有显著的抗病毒作用,稀释度1∶4.9的2.0μg/ml ab蛋白溶液即可保护50%细胞不产生细胞病变。[结论]猪重组α干扰素具有高活性、纯度高、无毒副作用、无药物残留等特点,其研制与开发对猪生产实践和疾病防治具有重要意义。 展开更多

关键词 PoIFN-α 水泡性口炎病毒 牛肾细胞 融合蛋白ab 中和试验 效价

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江苏省部分地区黄羽肉鸡大肠杆菌的分离鉴定 被引量：1

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作者 周明夏 钱捷 +1 位作者 顾长青 左伟勇 《现代畜牧科技》 2021年第4期9-11,共3页

对江苏南通、泰州及常州地区黄羽肉鸡大肠杆菌临床病例进行分离、血清型鉴定。不同地区的优势血清型分离株致病性结果表明,所收集的分离株均有致病性,其中85%以上的分离株属高、中致病株。本研究旨在了解江苏部分地区黄羽肉鸡大肠杆菌... 对江苏南通、泰州及常州地区黄羽肉鸡大肠杆菌临床病例进行分离、血清型鉴定。不同地区的优势血清型分离株致病性结果表明,所收集的分离株均有致病性,其中85%以上的分离株属高、中致病株。本研究旨在了解江苏部分地区黄羽肉鸡大肠杆菌病相对应的流行病学信息,这样就可以提供相应的数据,服务大肠杆菌病的预防和治疗。 展开更多

关键词 黄羽肉鸡 大肠杆菌 血清型

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N-氨甲酰谷氨酸和精氨酸对京海黄鸡肉仔鸡生长性能和血液指标的影响 被引量：15

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作者 汤智群 周佳栋 +3 位作者 洪伟鸣 曹飞 左伟勇 朱善元 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第5期1130-1136,共7页

本试验旨在探讨N-氨甲酰谷氨酸(N-carbamylglutamate,NCG)和精氨酸(Arg)对京海黄鸡肉仔鸡生长性能、血清生化参数及游离氨基酸含量的影响。选用1日龄体重相近的京海黄鸡肉仔鸡600只,随机分为5组,每组6个重复,每个重复20只。对照组饲喂... 本试验旨在探讨N-氨甲酰谷氨酸(N-carbamylglutamate,NCG)和精氨酸(Arg)对京海黄鸡肉仔鸡生长性能、血清生化参数及游离氨基酸含量的影响。选用1日龄体重相近的京海黄鸡肉仔鸡600只,随机分为5组,每组6个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲喂在基础日粮中分别添加0.05%、0.10%、0.15%NCG及0.10%Arg的试验日粮。试验期28d。结果表明,与对照组相比,添加0.05%、0.10%、0.15%NCG及0.10%Arg组平均日增重(ADG)升高,添加0.10%NCG组料重比(F/G)显著降低(P<0.05);添加0.10%NCG组血清中血氨(AMM)、尿酸(UA)和低密度脂蛋白(LDL)含量相对于其他各组显著降低(P<0.05),添加0.15%NCG组血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)和碱性磷酸酶(ALP)含量显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,添加0.10%、0.15%NCG组和添加0.10%Arg组血清中Arg含量显著升高(P<0.05)。综上所述,日粮中添加NCG有助于提高京海黄鸡肉仔鸡血清中Arg和脯氨酸(Pro)的含量,改善血液指标,提高肉仔鸡的生长性能,其中NCG添加水平为0.10%时效果较好。 展开更多

关键词 N-氨甲酰谷氨酸 精氨酸 京海黄鸡 生长性能 血液指标 氨基酸

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羊奶冻干粉中恩诺沙星基体标准物质的研制 被引量：2

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作者 刘天和 武彩红 +3 位作者 左伟勇 杜汶伸 曹习超 魏宁 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2022年第9期24-28,共5页

为了给羊奶中恩诺沙星的残留检测提供实物基体标准物质,并满足在恩诺沙星残留检测过程中质量控制和方法学验证的需求,需要研制一批羊奶冻干粉中恩诺沙星基体标准物质。选取3只健康的泌乳期奶山羊,肌肉注射恩诺沙星后收集羊奶,利用冷冻... 为了给羊奶中恩诺沙星的残留检测提供实物基体标准物质,并满足在恩诺沙星残留检测过程中质量控制和方法学验证的需求,需要研制一批羊奶冻干粉中恩诺沙星基体标准物质。选取3只健康的泌乳期奶山羊,肌肉注射恩诺沙星后收集羊奶,利用冷冻干燥技术制得一批羊奶冻干粉恩诺沙星基体标准物质。对制备好的羊奶冻干粉恩诺沙星基体标准物质进行均匀性、稳定性评价、定值、不确定度评估。在均匀性评估中,获得的F值1.92<F_(0.05)(14,30),在稳定性评估中,分别进行了短期稳定性实验(4,-20,25℃,2周)和长期稳定性实验(-20、-80℃,12个月).数据表明,羊奶冻干粉恩诺沙星基体标准物质的均匀性、稳定性良好,8家实验室联合定值,制备的标准物质最终定值结果为101.08μg/kg,总不确定度为2.7μg/kg. 展开更多

关键词 标准物质 冷冻干燥 羊奶 恩诺沙星

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