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p5cr基因在金龟子绿僵菌合成苦马豆素中相关性分析
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作者 孙品之 屈盈盈 +5 位作者 张沁 杨丽雯 李彦歌 张怡清清 张雨 路浩 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4718-4729,共12页
本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术研究p5cr(吡咯啉-5-羧酸还原酶)在金龟子绿僵菌合成苦马豆素中的作用,为苦马豆素的生物合成和工业化生产提供理论依据。试验以金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)为研究对象,使用qRT-PCR方法... 本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术研究p5cr(吡咯啉-5-羧酸还原酶)在金龟子绿僵菌合成苦马豆素中的作用,为苦马豆素的生物合成和工业化生产提供理论依据。试验以金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)为研究对象,使用qRT-PCR方法检测苦马豆素合成通路基因p5cr、sdh、pks和p450的转录水平,并对发酵培养1~7 d的金龟子绿僵菌的苦马豆素产量和相关基因表达量进行相关性分析,筛选出p5cr基因作为目标基因,采用CRISPR/Cas9基因编辑技术对催化酶基因p5cr进行敲除和过表达,验证p5cr基因与金龟子绿僵菌合成苦马豆素的相关性。结果显示,苦马豆素的产量与pks基因表达量之间为强相关性,而与p5cr、sdh和p450基因表达量之间均为极强相关性;敲除和过表达金龟子绿僵菌p5cr基因会导致苦马豆素产量显著降低(P<0.01)和升高(P<0.001)。上述研究结果表明,p5cr基因与金龟子绿僵菌的苦马豆素合成具有极强相关性,并且该基因在金龟子绿僵菌合成苦马豆素通路中起重要调节作用,为后续深入研究p5cr基因的功能及其调控作用奠定基础。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 p5cr基因 苦马豆素 疯草 CRISPR/Cas9基因编辑技术
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