粪产碱菌与水稻根的联合过程 被引量：4

1

作者 林敏 方宣钧 尤崇杓 《核农学报》 CAS CSCD 1993年第2期98-104,共7页

应用^(15)N同位素标记菌体和Tn5转座子诱变的突变株研究固氮粪产碱菌对宿主水稻的联合进程,结果表明,粘附作用是结合过程的第一步,接种3h后粘附在根表的菌体数量达最大值,约占接种量的3.7％。粘附的菌体易脱离根表,表明粘附作用是细菌... 应用^(15)N同位素标记菌体和Tn5转座子诱变的突变株研究固氮粪产碱菌对宿主水稻的联合进程,结果表明,粘附作用是结合过程的第一步,接种3h后粘附在根表的菌体数量达最大值,约占接种量的3.7％。粘附的菌体易脱离根表,表明粘附作用是细菌与宿主植物间的弱的相互作用。在根表定位是结合过程的第二步。接种15h后,定位菌体数量达最大值,约占接种量的21％。经振荡处理不能使定位菌体脱离根表。定殖是结合过程的第三步,接种20h后定殖菌体紧密结合于根表,剧烈振荡亦不易使其脱离根表。定殖后菌体开始出现果胶酶活性。采用趋化(Che)和胞外多糖(Exo)突变株研究表明,趋化性和胞外多糖的合成是影响细菌在根表结合的重要因素。粪产碱菌在水稻根表没有专一的粘附部位,但粪产碱菌的定位和定殖主要发生在主根根表,尤其是主、侧根交接处。 展开更多

关键词 粪产碱菌 水稻 根系 共生固氮

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固氮粪产碱菌（Alcaligenesfaecalis）胞外多糖的理化特性分析 被引量：2

2

作者 方宣钧 林敏 尤崇杓 《核农学报》 CAS CSCD 1996年第3期181-185,共5页

ＥＰＳ结构分析表明，ＥＰＳ突变株及工程菌株的糖骨架结构与野生型菌株相比有差异，尤其是ｎｔｒＣｎｉｆＡ基因结合子Ａ１５３２的糖骨架结构明显不同于其它菌株，各个菌株之间，其侧链基团均稍有改变。ＥＴＩＲ证实，各个菌株ＥＰ... ＥＰＳ结构分析表明，ＥＰＳ突变株及工程菌株的糖骨架结构与野生型菌株相比有差异，尤其是ｎｔｒＣｎｉｆＡ基因结合子Ａ１５３２的糖骨架结构明显不同于其它菌株，各个菌株之间，其侧链基团均稍有改变。ＥＴＩＲ证实，各个菌株ＥＰＳ中蛋白构象存在差异，ＥＰＳ中均有丰富的β折叠构象。ＥＰＳ丰富型突变株中无规卷曲构象所占比例较大，而野生型菌株中ＥＰＳ则没有无规卷曲构象。 展开更多

关键词 粪产碱菌 胞外多糖 糖骨架结构 蛋白构象

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固氮粪产碱菌（Alcaligenes faecalis）胞外多糖的分离纯化及成分分析 被引量：2

3

作者 方宣钧 林敏 尤崇杓 《核农学报》 CAS CSCD 1995年第4期247-251,共5页

固氨粪产碱菌野生型Ａ１５０１菌株及其胞外多糖（ＥＰＳ）突变株Ｅｘｏ＋＋（Ａ１５３２）和ＥｘＯ－（Ａ１５３１），以及ｎｉｆＡ和ｎｔｒＣ－ｎｉｆＡ转化子（Ａ１５１３和Ａ１５２３）的ＥＰＳ，由高分子量（２５０ｋＤ左右）组分... 固氨粪产碱菌野生型Ａ１５０１菌株及其胞外多糖（ＥＰＳ）突变株Ｅｘｏ＋＋（Ａ１５３２）和ＥｘＯ－（Ａ１５３１），以及ｎｉｆＡ和ｎｔｒＣ－ｎｉｆＡ转化子（Ａ１５１３和Ａ１５２３）的ＥＰＳ，由高分子量（２５０ｋＤ左右）组分（ＥＰＳＨ）和低分子量小于４０ｋＤ组分（ＥＰＳＬ）组成。两个组分中均含有葡萄糖、半乳糖、果糖和戊糖，其主要成分葡萄糖和半乳糖的分子摩尔比：Ａ１５０１－ＥＰＳＨ为２：１、ＥＰＳＬ为３：１；Ａ１５３１－ＥＰＳＨ为２：１、ＥＰＳＬ为１：１；Ａ１５３２－ＥＰＳＨ为８：１、ＥＰＳＬ为５：１；Ａ１５１３－ＥＰＳＨ和ＥＰＳＬ均为４：１；Ａ１５２３－ＥＰＳＨ为４：１、ＥＰＳＬ为８：１。高分子量ＥＰＳ中还含有多肤，其氨基酸组分在各突变株和转化子之间差异明显，而ＥＰＳＬ中仅含有痕量多肽。 展开更多

关键词 粪产碱菌 胞外多糖 分离 成分分析

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固氮粪产碱菌谷氨酰胺合成酶的分离纯化及其特性 被引量：1

4

作者 尤崇杓 张良才 宋未 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第2期223-229,共7页

联合固氮细菌粪产碱菌Ａ１５０１菌体经超声破碎后，无细胞粗提液以ＰＥＧ－６０００分级沉淀，丙酮沉淀，再经蓝球脂糖亲和层析分离、纯化。获得的纯谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和４－３０％梯度ＰＡＧＥ上均呈均一的一... 联合固氮细菌粪产碱菌Ａ１５０１菌体经超声破碎后，无细胞粗提液以ＰＥＧ－６０００分级沉淀，丙酮沉淀，再经蓝球脂糖亲和层析分离、纯化。获得的纯谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和４－３０％梯度ＰＡＧＥ上均呈均一的一条带。ＧＳ亚基及整酶分子量分别为５５ＫＤ和６４５ｋＤ，亚基由４５６个氨基酸残基组成。ＧＳ的Ｋｍ值。在以Ｇｌｕ为源的介质中培养时分别为２０ｍｍｏｌ／Ｌ（Ｇｌｕ）。 展开更多

关键词 谷氨酰胺 合成酶 粪产碱菌 固氮菌

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联合固氮研究的现状和展望 被引量：5

5

作者 尤崇杓 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1991年第5期28-29,共2页

生物固氮是一些微生物如自生、共生、光合固氮细菌,蓝藻及弗兰克氏放线菌等,通过其体内固氮酶的活动,将空气中分子态氮固定下来,转变成氨态氮。联合固氮是自生和共生固氮体系的中间类型,固氮细菌与相应联合的植物之间有较为密切的相互关... 生物固氮是一些微生物如自生、共生、光合固氮细菌,蓝藻及弗兰克氏放线菌等,通过其体内固氮酶的活动,将空气中分子态氮固定下来,转变成氨态氮。联合固氮是自生和共生固氮体系的中间类型,固氮细菌与相应联合的植物之间有较为密切的相互关系,但又不象形成根瘤那样具有共生结构。 展开更多

关键词 联合固氮 固氮体系 固氮菌肥料

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固氮粪产碱菌谷氨酰胺合成酶的构象变化及调节作用

6

作者 宋未 张良才 尤崇杓 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第2期230-235,共6页

应用园二色谱测定了粪产碱菌谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）各构象，结果表明在Ｇｌｕ培养下ａ螺旋为２８％，β折叠为２２％，无规则卷曲占５０％；而在ＮＨ４＾＋培养下，三者相应为２０％，２０％，６０％。荧光光谱及付立叶红外光谱也证明... 应用园二色谱测定了粪产碱菌谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）各构象，结果表明在Ｇｌｕ培养下ａ螺旋为２８％，β折叠为２２％，无规则卷曲占５０％；而在ＮＨ４＾＋培养下，三者相应为２０％，２０％，６０％。荧光光谱及付立叶红外光谱也证明，两种培养条件下ＧＳ的构象存在着差异。不同氮源对粪产碱菌ＧＳ的形成有显著的影响。高浓度ＮＨ４＾＋培养下ＧＳ合成受到阻遇，而Ｇｌｕ或低浓度ＮＨ４＾＋则对ＧＳ合成无明显的影响。 展开更多

关键词 谷氨酰胺 合成酶 粪产碱菌 构象

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菜粉蝶颗粒体病毒包涵体蛋白的特性 被引量：4

7

作者 苏金 付仓生 尤崇杓 《核农学报》 CAS CSCD 1990年第3期151-156,共6页

菜粉蝶颗粒体病毒京农801株(PrGV-JN801),经蔗糖梯度离心纯化、碳酸钠溶解后,再经Sepharose 2B柱层析分离纯化,纯化的PrGV-JN801包涵体蛋白,在SDS-PAGE上呈1条带。该蛋白含有18种氨基酸,其中天门冬氨酸、谷氨酸和脯氨酸含量较高,酸性氨... 菜粉蝶颗粒体病毒京农801株(PrGV-JN801),经蔗糖梯度离心纯化、碳酸钠溶解后,再经Sepharose 2B柱层析分离纯化,纯化的PrGV-JN801包涵体蛋白,在SDS-PAGE上呈1条带。该蛋白含有18种氨基酸,其中天门冬氨酸、谷氨酸和脯氨酸含量较高,酸性氨基酸含量为碱性氨基酸含量的2倍。氨基酸组分值可作为该病毒标准制剂的参考依据。PrGV-JN801包涵体蛋白的分子量为28000道尔顿,紫外吸收特性A_(max)/A_(min)=1.53。其荧光光谱,在pH7时,激发最大值在275nm,其次在235nm,最小值为245nm,发射最大值为304nm;在pH11时,激发光谱为285nm,发射光谱为351nm。 展开更多

关键词 菜粉蝶 颗粒体病毒 包涵体蛋白

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施用联合固氮菌对水稻吸收氮量的影响及增产效果 被引量：1

8

作者 张福星 尤崇杓 +2 位作者 林敏 卢婉芳 刘永正 《浙江农业科学》 北大核心 1993年第6期286-288,共3页

联合固氮菌耐氨菌系是中国农科院原子能所生物技术室采用遗传工程选育成功的新型菌株粪产碱菌 A15/kcp5、催娩克菌NG1390和阴沟肠杆菌 E2613的混合菌。自1988年以来,嘉兴市农科所与中国农科院原子能所协作,在浙北水网平原青紫泥田与黄... 联合固氮菌耐氨菌系是中国农科院原子能所生物技术室采用遗传工程选育成功的新型菌株粪产碱菌 A15/kcp5、催娩克菌NG1390和阴沟肠杆菌 E2613的混合菌。自1988年以来,嘉兴市农科所与中国农科院原子能所协作,在浙北水网平原青紫泥田与黄斑田进行应用试验;1990年大田示范100亩,1991年应用面积扩大到1000亩,1992年早、晚稻累计面积超万亩。 展开更多

关键词 水稻 氮 吸收 固氮细菌 产量

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水稻联合固氮菌质粒的鉴定及固氮(nif)基因定位 被引量：1

9

作者 王惠贤 苑红丽 尤崇杓 《核农学报》 CAS CSCD 1989年第4期213-220,共8页

应用改进的Casse法提取质粒,鉴定了供试菌株的质粒存在情况:高NH_4^+和N_2培养的Alcaligenes faecalis A_15,Enterobacter cloacae E26,E.cloacaeEnSs和klebsiella planticola DWUL2分别携有1—2个大质粒,分子量在30—200Md之间;K.planf... 应用改进的Casse法提取质粒,鉴定了供试菌株的质粒存在情况:高NH_4^+和N_2培养的Alcaligenes faecalis A_15,Enterobacter cloacae E26,E.cloacaeEnSs和klebsiella planticola DWUL2分别携有1—2个大质粒,分子量在30—200Md之间;K.planficola和Pseudomonas saccharophila含有小质粒;K.oxytocaNG13不携质粒。供试菌株中DNA与nif探针R1 nif DH和Ec nif B-Y均具有同源性。A.faecalis A15,E.cloacae E26和K.oxytoca NG13的nif基因位于染色体上,而E.cloacae EnSs的nif基因则位于一个较大质粒上。 展开更多

关键词 水稻 联合 固氮菌 质粒 nif基因

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根瘤菌-豆科植物共生固氮的分子生物学 被引量：1

10

作者 R.C.Van den Bos T.M.P.Schetgens +2 位作者 尤崇杓 张大达 宋未 《核农学报》 CAS 1986年第4期1-8,共8页

本综述着重讨论根瘤菌及其豆科植物宿主在共生固氮作用中的几个重要问题。根瘤菌和豆科植物在根瘤发育过程中的相互作用。根瘤菌在根瘤的植物细胞中分化成类菌体,使空气中的 N_2还原成 NH_4^+用作宿主植物的营养来源。文中还介绍了几种... 本综述着重讨论根瘤菌及其豆科植物宿主在共生固氮作用中的几个重要问题。根瘤菌和豆科植物在根瘤发育过程中的相互作用。根瘤菌在根瘤的植物细胞中分化成类菌体,使空气中的 N_2还原成 NH_4^+用作宿主植物的营养来源。文中还介绍了几种适用于根瘤菌基因操作以进行共生固氮研究的分子遗传学技术。 展开更多

关键词 根瘤菌属 植物细胞 启动区 类菌体 豆科植物 共生固氮 生物固氮 分子生物学

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光合固氮细菌Rhodobacter capsulata对土壤肥力和植物生长的影响 被引量：1

11

作者 李继平 尤崇杓 《核农学报》 CAS CSCD 1989年第3期156-161,共6页

Rhodobacter capsulata(ATCC 23702)菌体进入土壤后,土壤pH值下降,菌体释放出的NH_4^+-N在土壤中不积累,迅速转变成NO_3^--N形式,后者在土壤中的累积量与加入的菌体量呈正比,土壤有机氮含量略有升高。在每公斤土壤中加入0.5克菌体时,土... Rhodobacter capsulata(ATCC 23702)菌体进入土壤后,土壤pH值下降,菌体释放出的NH_4^+-N在土壤中不积累,迅速转变成NO_3^--N形式,后者在土壤中的累积量与加入的菌体量呈正比,土壤有机氮含量略有升高。在每公斤土壤中加入0.5克菌体时,土壤的呼吸作用在5周后达到平衡状态。玉米幼株的盆栽试验结果表明,R.capsulata菌液不仅在植株干重上,而且在植物的含氮量上,都比其它处理提高显著。R.capsulata菌体有可能作为植物生长的附加氮肥。 展开更多

关键词 土壤肥力 植物生长 固氮细菌 光合

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苏云金杆菌天门变种晶体蛋白基因的克隆和表达

12

作者 陈新国 张大达 +1 位作者 王惠贤 尤崇杓 《核农学报》 CAS CSCD 1991年第4期233-238,共6页

用改进的Birnboim法检测了苏云金杆菌9个变种的质粒组成,其中我国分离到的天门变种有12条质粒带,用Southern杂交法证明,天门变种的δ-内毒素基因位于1个约60MD的质粒上。该质粒经BglⅡ酶切后与Bam HI酶切的pBR322载体连接,转化大肠杆菌H... 用改进的Birnboim法检测了苏云金杆菌9个变种的质粒组成,其中我国分离到的天门变种有12条质粒带,用Southern杂交法证明,天门变种的δ-内毒素基因位于1个约60MD的质粒上。该质粒经BglⅡ酶切后与Bam HI酶切的pBR322载体连接,转化大肠杆菌HB101。通过菌落原位放射免疫反应和Southern杂交方法,筛选带有δ-内毒素基因并能在大肠杆菌中表达的转化体。对玉米螟幼虫进行生物测定表明,阳性克隆pTCC65及pTCC18有较强的抑制幼虫生长的作用。 展开更多

关键词 苏云金杆菌 天门变种 蛋白基因

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几种水稻联合固氮菌吸氢酶(hup)基因的鉴定及分析

13

作者 苑红丽 王惠贤 尤崇杓 《核农学报》 CAS CSCD 1990年第1期19-24,共6页

供试菌株Alcaligenes faecalis A15,Enterobacter cloacae EnSs.E·cl-oacae E26,Klebsiella planticola DWUL2.K·oxytoca NG13和Pseudomonassacharophila均能还原2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC),说明它们含有吸氢酶。以Rhizobiu... 供试菌株Alcaligenes faecalis A15,Enterobacter cloacae EnSs.E·cl-oacae E26,Klebsiella planticola DWUL2.K·oxytoca NG13和Pseudomonassacharophila均能还原2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC),说明它们含有吸氢酶。以Rhizobium japonicum的hup基因为探针进行杂交的结果表明。除E·oloacae E26和K·oxytoca NG13外,其它菌株的DNA与hup探针具有同源性。A·faecalis A15 hup基因位于染色体上‘E·cloacae EnSs则位于较大的一个质粒上。A·faecalis A15和E·Cloacae EnSs的nif基因与hup基因位于同一复制子上。hup基因不具必然的保守性,因此异源hup基因探针不一定都适宜于探测hup基因。 展开更多

关键词 水稻 联合固氮菌 吸氢酶 基因 固氮

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固氮细菌导人水稻原生质体及其植株再生

14

作者 宋未 颜秋生 +3 位作者 王耀东 张雪琴 张雪涛 尤崇杓 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1991年第9期6-10,共5页

关键词 水稻 植株再生 固氮细菌 原生质体

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