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题名仿刺参体腔液中酚氧化酶活性的分析
被引量：11
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作者
王轶南
穆晓虎
封妮莎
宋坚
常亚青
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机构
大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室
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出处
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期319-322,共4页
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基金
国家“863”计划项目(2012AA100812)
国家星火计划项目(2012GA651002)
+1 种基金
国家海洋局海洋公益项目(201105007)
辽宁省教育厅科学技术研究项目(L2012263)
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文摘
在(22±1)℃下抽取体质量为95.0～105.0 g的仿刺参Apostichopus japonicas体腔液,制备体腔液及体腔细胞溶解上清液(CLS),分别测定其酚氧化酶(PO)活性,检测分析不同刺激物(CaCl2、MgCl2、LPS、SDS、Trypsin和甲醇)对酚氧化酶原(proPO)系统的激活效果,并比较了不同规格仿刺参体腔液的酚氧化酶活性。结果表明:仿刺参体腔液中的PO活性个体差异较大,平均为(146.90±55.60)U,体腔液与不同激活剂作用后PO活性均无明显变化;CLS中的PO活性为31.82 U,其在100 mmol/L MgCl2作用后PO活性大幅度提高,proPO比活为43.9 U,CLS与LPS、CaCl2和甲醇作用后PO活性无明显增加,与SDS和Trypsin作用后PO活性表现出一定的抑制。研究表明,仿刺参体腔液中的PO主要存在于体腔液中,CLS中的PO活性较低,proPO主要存在于体腔细胞中,可被Mg2+大幅度激活。52.4～68.5、20.7～24.4、4.9～5.6 g 3种规格的仿刺参体腔液中的PO活性分别为(42.18±7.62)、(34.10±9.28)、(33.29±7.42)U,表明不同规格仿刺参体腔液中的PO活性存在一定差异,总体呈现随规格的增大PO活性增强的趋势,其中100 g左右的仿刺参与3个较小规格的仿刺参体腔液中的PO活性存在显著性差异(P<0.05)。
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关键词
仿刺参
体腔液
酚氧化酶
酚氧化酶原
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Keywords
Apostichopus japonicus
coelomic fluid
polyphend oxidase （PO）
proPO
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分类号
S968.9
[农业科学—水产养殖]
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题名虾夷马粪海胆致病菌强壮弧菌的PCR检测方法
被引量：3
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作者
常亚青
封妮莎
王轶南
丁君
刘志敏
穆小虎
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机构
大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室
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出处
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期289-293,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目(30972269)
辽宁省"百千万人才工程"资助项目(2008921059)
国家海洋局海洋公益项目(201105007)
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文摘
强壮弧菌Vibrio fortis是虾夷马粪海胆Strongylocentrotus intermedius的一种致病菌。为建立强壮弧菌的PCR检测方法,根据强壮弧菌gyrB基因的高度变异区序列设计引物,筛选出特异性强的3对引物VF-6、VF-7及VF-8,分别对强壮弧菌S0907及20株参比菌株进行PCR扩增,结果显示,3对引物均对强壮弧菌扩增出与预期大小一致的目的基因片段且参考菌株无扩增条带。以不同稀释度的菌悬液制备的DNA模板进行PCR扩增,结果显示,3对引物VF-6、VF-7及VF-8可检测的最低细菌浓度分别为4.1×104、4.1×103、4.1×102 cfu/mL;对不同稀释度的细菌DNA模板进行PCR扩增,结果显示,3对引物VF-6、VF-7及VF-8可检测的最低DNA含量分别为1.4、0.14、0.014 pg/μL。试验结果表明:3对引物的特异性均较好,但灵敏度存在差异,其中以VF-8为引物的PCR检测方法最佳;使用以VF-8为引物的PCR检测方法对实验室养殖海胆及其生境样品进行初步检测,健康海胆、养殖海水及投喂的海带均为阴性,而自然海域海水中带有一定量的强壮弧菌。
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关键词
虾夷马粪海胆
强壮弧菌
PCR检测
gyrB基因
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Keywords
Strongylocentrotus intermedius； Vibrio fortis； PCR detection； gyrB gene
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分类号
S947.9
[农业科学—水产养殖]
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