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宠物训导行业的现状与前景研究
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作者 王蕾 路宏毅 +4 位作者 尹利利 李佳欣 蒋彬夫 宋登阔 刘永相 《畜牧兽医科技信息》 2025年第4期247-249,共3页
随着人民生活水平的提高、宠物数量增长以及宠物经济不断发展壮大,新兴的宠物服务行业如雨后春笋,产生了宠物美容、寄养以及训导等服务产业。本文在充分考虑当前时代背景的前提下,对宠物训导这一新兴行业的现状与前景研究进行阐述。
关键词 服务行业 宠物 宠物训导
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镰形扇头蜱防御素的原核表达及其抑菌活性的分析 被引量:1
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作者 崔濮凡 张永英 +5 位作者 宋登阔 石玉祥 钟翠红 权陶芬 李书德 王方方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1086-1091,1106,共7页
为分析镰形扇头蜱防御素RhD的生物学功能和抑菌活性,本研究利用在线网站预测RhD的分子生物学特性,采用MegAlign软件分析GenBank中不同物种防御素氨基酸序列之间的相似性,利用MEGA 7构建不同物种防御素氨基酸序列的系统进化树。结果显示,... 为分析镰形扇头蜱防御素RhD的生物学功能和抑菌活性,本研究利用在线网站预测RhD的分子生物学特性,采用MegAlign软件分析GenBank中不同物种防御素氨基酸序列之间的相似性,利用MEGA 7构建不同物种防御素氨基酸序列的系统进化树。结果显示,RhD基因开放阅读框为225 bp,编码75个氨基酸,具有Knot1结构域、信号肽,为疏水蛋白。RhD的二级及三级结构均为α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲等结构,且与变异革蜱防御素(Q86QI5.1.A)三级结构相似性最高。不同物种防御素氨基酸序列的相似性结果显示,RhD与血红扇头蜱防御素的相似性最高为93.2%,变异度最低为7.1%;与长角血蜱防御素的相似性为82.4%,变异度为20.1%,与其余物种防御素相似性较低,且变异度较高;不同物种防御素氨基酸序列的系统进化树结果显示,RhD与血红扇头蜱防御素、长角血蜱防御素位于同一进化分支,与黑腹果蝇、埃及伊蚊、家蚕等防御素同属一大分支。采用PCR从镰形扇头蜱唾液腺中扩增已切除信号肽编码基因的RhD基因,克隆至表达载体pET-30a中构建重组质粒pET30a-RhD,并经PCR和测序鉴定正确后,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后利用镍离子亲和层析柱纯化重组RhD蛋白(rRhD),采用SDS-PAGE检测r RhD的表达及纯化效果,使用BCA蛋白定量试剂盒测定纯化后rRhD浓度,采用western blot鉴定rRhD的反应原性。SDS-PAGE结果显示,在15 ku处出现目的蛋白条带,且其主要以可溶性形式表达,纯化后rRhD浓度约为110μmol/L。Western blot显示在15 ku处出现特异性条带,与His标签单克隆抗体(MAb)的反应原性较强。分别利用牛津杯法和微量二倍稀释法检测RhD(110μmol/L~1.72μmol/L)对常见3种细菌的抑菌活性。结果显示,rRhD对大肠杆菌和沙门菌的平均抑菌圈直径基本一致,但均极显著低于阳性对照组(硫酸卡那霉素)(P<0.01),对金黄色葡萄球菌的平均抑菌圈直径显著低于阳性对照组(P<0.05),但对3种菌的平均抑菌圈直径均极显著高于阴性对照组(P<0.01);r RhD对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为13.75μmol/L、27.5μmol/L和55μmol/L,最小杀菌浓度分别为27.5μmol/L、27.5μmol/L和110μmol/L。本研究首次经原核系统表达了分泌型的rRhD,并证实其具有一定的抑菌活性,可成为治疗细菌感染的候选制剂,为RhD功能和应用的研究奠定实验基础。 展开更多
关键词 镰形扇头蜱 防御素 抑菌活性
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