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牛结核杆菌DNA疫苗的纯化工艺研究及质量鉴定被引量：2: 1; 作者宋振忠黄炯 +5 位作者徐雪萍徐志光张云峰蔡宏许礼义呼西旦《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第4期186-190,共5页; 为获得纯度较高,能进行动物免疫试验的DNA疫苗,在高密度发酵工程菌的基础上,通过传统的碱裂解,获得粗提的质粒;用氯化钙去除裂解液中的大部分RNA,并用Sartobran P囊式过滤器获得了澄清的溶液。用聚乙二醇法沉淀超螺旋质粒DNA,去除大部... 展开更多; 关键词 DNA疫苗纯化聚乙二醇阴离子交换质量鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛分支杆菌DNA疫苗工程菌的高密度培养研究被引量：1: 2; 作者宋振忠徐志光 +7 位作者黄炯薛英王延许礼义张读朴鲁立柱蔡宏呼西旦《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第5期9-13,共5页; 对牛分支杆菌三价DNA疫苗工程菌进行了高密度培养的探索。通过摇瓶培养试验对3种培养基进行了筛选,选择出具有高密度培养潜力的半合成培养基作为中试规模的发酵罐培养基;经对培养温度、溶氧、pH、转速、补料方式等各种条件优化,培养的... 展开更多; 关键词牛分支杆菌三价DNA疫苗半合成培养基发酵工艺; 在线阅读下载PDF 职称材料

一株牛分枝杆菌的分离与鉴定被引量：1: 3; 作者许礼义呼西旦 +3 位作者徐志光宋振忠杨启元黄炯《草食家畜》 2010年第3期10-14,共5页; 采集一头检疫阳性的结核牛病变的淋巴组织进行细菌分离。分离物(Z-N)染色为阳性。提取细菌DNA,用PCR检测结核分枝杆菌特异性插入片段IS1081,确定该细菌为结核分枝杆菌。将PCR扩增出的特异性片段克隆到PMD-18T载体上。重组质粒经酶切和PC... 展开更多; 关键词牛结核分枝杆菌BCG 分离培养 PCR鉴定基因分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立被引量：1: 4; 作者许礼义徐志光 +5 位作者宋振忠徐敏古努尔李爱巧黄炯呼西旦《草食家畜》 2010年第2期69-72,共4页; 利用分子克隆技术,提取结核分支杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6基因,然后对其进行克隆表达,获得高效表达的ESAT-6蛋白,Western blot证实ESAT-6蛋白可与结核牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的ESAT-6重组蛋白作为诊断抗原建立的间接EL... 展开更多; 关键词牛结核 ESAT-6蛋白间接ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的原核表达和纯化: 5; 作者徐志光许礼义 +2 位作者呼西旦宋振忠徐敏《草食家畜》 2010年第1期67-70,共4页; 构建牛结核分枝杆菌ESAT-6基因的原核表达载体,诱导表达、纯化并初步鉴定该蛋白。方法:以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-22b(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3... 展开更多; 关键词牛分枝杆菌 ESAT-6 表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

农村土地整理的效益分析——以河北省孟村回族自治县为例被引量：9: 6; 作者陈敏冯忠江宋振忠《资源．产业》 2005年第2期50-52,共3页; 土地整理项目效益分析是土地整理研究中的重要问题。土地整理活动以谋求土地整理的综合效益最大化为目的,也就是土地整理后的社会效益、环境效益和经济效益的自然融合。本文以河北省孟村回族自治县为例,分析了农村土地整理项目中的效益。; 关键词农村土地整理效益分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

浅议初中英语听力训练教学: 7; 作者宋振忠《成才之路》 2010年第21期67-67,共1页; 英语教学工作必须认真遵循《英语教学大纲》的规定,把培养学生的听力作为重点来做。听力是理解和吸收口头信息的交际能力,是说的能力的基础,它需要边听,边联想,边判断,从而在有限时间内听懂英语的有声信息。然而,实践证明在英语学习... 展开更多; 关键词英语听力训练教学《英语教学大纲》初中英语学习过程交际能力教学工作听力技能; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛结核杆菌DNA疫苗的纯化工艺研究及质量鉴定被引量：2: 1; 作者宋振忠黄炯徐雪萍徐志光张云峰蔡宏许礼义呼西旦; 机构新疆畜牧科学院兽医研究所新疆农垦科学院畜牧兽医研究所北京大学生命科学学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第4期186-190,共5页; 基金新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目(200811111); 文摘为获得纯度较高,能进行动物免疫试验的DNA疫苗,在高密度发酵工程菌的基础上,通过传统的碱裂解,获得粗提的质粒;用氯化钙去除裂解液中的大部分RNA,并用Sartobran P囊式过滤器获得了澄清的溶液。用聚乙二醇法沉淀超螺旋质粒DNA,去除大部分菌体蛋白和宿主DNA。最后用source 30Q阴离子交换色谱填料去除几乎全部的内毒素并浓缩了质粒。本试验纯化的DNA疫苗经质量检验达到了转染动物的要求。该工艺实现了一步色谱纯化DNA疫苗的目的,具有工艺简单、快速的优点。; 关键词 DNA疫苗纯化聚乙二醇阴离子交换质量鉴定; Keywords DNA vaccine purification PEG 8000 AIEX quality evaluation; 分类号 Q81 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛分支杆菌DNA疫苗工程菌的高密度培养研究被引量：1: 2; 作者宋振忠徐志光黄炯薛英王延许礼义张读朴鲁立柱蔡宏呼西旦; 机构新疆畜牧科学院兽医研究所新疆农业大学动物医学学院新疆天康畜牧生物技术股份有限公司北京大学生命科学学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第5期9-13,共5页; 基金新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目(200811111); 文摘对牛分支杆菌三价DNA疫苗工程菌进行了高密度培养的探索。通过摇瓶培养试验对3种培养基进行了筛选,选择出具有高密度培养潜力的半合成培养基作为中试规模的发酵罐培养基;经对培养温度、溶氧、pH、转速、补料方式等各种条件优化,培养的工程菌密度OD600达到22.92,细菌湿重达到27.173 g/L,质粒产量为1.44 mg/g湿菌。试验还对培养物质粒的稳定性进行了证实。; 关键词牛分支杆菌三价DNA疫苗半合成培养基发酵工艺; Keywords Mycobacterium bovis trivalence DNA vaccine semi-synthetic medium fermentation technology; 分类号 S858.23 [农业科学—临床兽医学] S852.618 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株牛分枝杆菌的分离与鉴定被引量：1: 3; 作者许礼义呼西旦徐志光宋振忠杨启元黄炯; 机构新疆畜牧科学院兽医研究所新疆农业大学新疆乌鲁木齐市动物疾病控制中心; 出处《草食家畜》 2010年第3期10-14,共5页; 基金国家公益性行业专项"边境地区动物疫病防控技术研究"子项目"牛结核病流行病学调查"; 文摘采集一头检疫阳性的结核牛病变的淋巴组织进行细菌分离。分离物(Z-N)染色为阳性。提取细菌DNA,用PCR检测结核分枝杆菌特异性插入片段IS1081,确定该细菌为结核分枝杆菌。将PCR扩增出的特异性片段克隆到PMD-18T载体上。重组质粒经酶切和PCR鉴定均为阳性,测序结果与牛分枝杆菌标准菌株的同源性为100%。对其用Richard C.Huard等公布的PCR分型方法设计引物进行基因分型,确定该菌株为牛分枝杆菌BCG(M.bovis BCG)。; 关键词牛结核分枝杆菌BCG 分离培养 PCR鉴定基因分析; Keywords skin test isolation and cultivation identification of PCR typing gene; 分类号 S855.12 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立被引量：1: 4; 作者许礼义徐志光宋振忠徐敏古努尔李爱巧黄炯呼西旦; 机构新疆畜牧科学院兽医研究所新疆农业大学新疆乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心; 出处《草食家畜》 2010年第2期69-72,共4页; 基金新疆少数民族科技人才特殊培养计划科研项目"基于基因重组蛋白的牛结核病ELISA诊断方法的研究"; 文摘利用分子克隆技术,提取结核分支杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6基因,然后对其进行克隆表达,获得高效表达的ESAT-6蛋白,Western blot证实ESAT-6蛋白可与结核牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的ESAT-6重组蛋白作为诊断抗原建立的间接ELISA特异性为94%、敏感性为63.35%。交叉反应试验表明,该抗原只与牛副结核病阳性血清有交叉反应,而不与其他5种常见的牛病阳性血清发生交叉反应。用间接ELISA方法对285份PPD阳性牛血清、对74份PPD阴性牛血清、79份牛γ-干扰素(IFN-γ)检测阳性血清进行检测,其负荷率分别为62.1%、98.64%、83.54%。实验结果表明建立的间接ELISA方法可以用于牛结核病感染和免疫抗体检测,且具有很好的开发和应用前景。; 关键词牛结核 ESAT-6蛋白间接ELISA; Keywords bovine tuberculosis ESAT-6 protein indirect ELISA; 分类号 S855.2 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的原核表达和纯化: 5; 作者徐志光许礼义呼西旦宋振忠徐敏; 机构新疆畜牧科学院兽医研究所新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心; 出处《草食家畜》 2010年第1期67-70,共4页; 基金新疆少数民族科技人才特殊培养计划科研项目资助; 文摘构建牛结核分枝杆菌ESAT-6基因的原核表达载体,诱导表达、纯化并初步鉴定该蛋白。方法:以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-22b(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)polys菌体,经IPTG诱导表达蛋白;利用Western-blot鉴定重组蛋白后,纯化目的蛋白。结果:所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致。经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定均发现在6kDa处有特异性蛋白条带。纯化的蛋白的大小与蛋白质分子量标准比较一致。结论:成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白。; 关键词牛分枝杆菌 ESAT-6 表达纯化; Keywords Mycobacterium bovis ESAT-6 Construction of vector expression purification; 分类号 S852.618 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名农村土地整理的效益分析——以河北省孟村回族自治县为例被引量：9: 6; 作者陈敏冯忠江宋振忠; 机构河北师范大学资源与环境科学学院; 出处《资源．产业》 2005年第2期50-52,共3页; 文摘土地整理项目效益分析是土地整理研究中的重要问题。土地整理活动以谋求土地整理的综合效益最大化为目的,也就是土地整理后的社会效益、环境效益和经济效益的自然融合。本文以河北省孟村回族自治县为例,分析了农村土地整理项目中的效益。; 关键词农村土地整理效益分析; Keywords rural area land consolidation and rehabilitation benefits analysis; 分类号 F323.24 [经济管理—产业经济]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名浅议初中英语听力训练教学: 7; 作者宋振忠; 机构瓦房店市第一中学; 出处《成才之路》 2010年第21期67-67,共1页; 文摘英语教学工作必须认真遵循《英语教学大纲》的规定,把培养学生的听力作为重点来做。听力是理解和吸收口头信息的交际能力,是说的能力的基础,它需要边听,边联想,边判断,从而在有限时间内听懂英语的有声信息。然而,实践证明在英语学习过程中,听力技能是很难掌握的。; 关键词英语听力训练教学《英语教学大纲》初中英语学习过程交际能力教学工作听力技能; 分类号 H319.9 [语言文字—英语]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	牛结核杆菌DNA疫苗的纯化工艺研究及质量鉴定	宋振忠黄炯徐雪萍徐志光张云峰蔡宏许礼义呼西旦	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	牛分支杆菌DNA疫苗工程菌的高密度培养研究	宋振忠徐志光黄炯薛英王延许礼义张读朴鲁立柱蔡宏呼西旦	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	一株牛分枝杆菌的分离与鉴定	许礼义呼西旦徐志光宋振忠杨启元黄炯	《草食家畜》	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立	许礼义徐志光宋振忠徐敏古努尔李爱巧黄炯呼西旦	《草食家畜》	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	牛结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的原核表达和纯化	徐志光许礼义呼西旦宋振忠徐敏	《草食家畜》	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	农村土地整理的效益分析——以河北省孟村回族自治县为例	陈敏冯忠江宋振忠	《资源．产业》	2005	9	在线阅读下载PDF 职称材料
7	浅议初中英语听力训练教学	宋振忠	《成才之路》	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料