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肿瘤放射性受体显像剂奥曲肽的固相合成 被引量:1
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作者 宋娜玲 赵启仁 +3 位作者 党永红 刘国藩 刘洁 褚丽萍 《同位素》 CAS 2004年第1期15-20,共6页
采用苏氨酸转变为苏氨酸乙酯,再用LiAlH4还原该乙酯合成了苏氨醇,用自动多肽合成仪和Fmoc(9-芴甲基羰基)保护的氨基酸合成了7肽—树脂;再用三氟醋酸铊(Tl(Tfa)3)在7肽—树脂上形成7肽的二硫键;用苏氨醇氨解法裂解肽—树脂并在7肽链上接... 采用苏氨酸转变为苏氨酸乙酯,再用LiAlH4还原该乙酯合成了苏氨醇,用自动多肽合成仪和Fmoc(9-芴甲基羰基)保护的氨基酸合成了7肽—树脂;再用三氟醋酸铊(Tl(Tfa)3)在7肽—树脂上形成7肽的二硫键;用苏氨醇氨解法裂解肽—树脂并在7肽链上接上苏氨醇形成八肽;然后用三氟乙酸脱去氨基酸侧链保护基团,用高效液相色谱法纯化八肽,得到了奥曲肽(OCT)。 展开更多
关键词 肿瘤放射性受体显像剂 奥曲肽 固相合成 苏氨醇 高效液相色谱法 OCT 生长抑素
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人心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量:6
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作者 郝建秀 张春明 +4 位作者 王沂 宋娜玲 贺欣 刘鉴峰 王德芝 《生物医学工程与临床》 CAS 2010年第6期546-549,共4页
目的建立一种简便实用胶体金免疫层析检测方法,用于人心肌肌钙蛋白I(cTnI)的快速检测。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,以鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,以兔源抗cTnI多克隆抗体固定于硝酸纤维素膜作为捕获抗体,采用免疫层... 目的建立一种简便实用胶体金免疫层析检测方法,用于人心肌肌钙蛋白I(cTnI)的快速检测。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,以鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,以兔源抗cTnI多克隆抗体固定于硝酸纤维素膜作为捕获抗体,采用免疫层析技术制备快速检测cTnI胶体金免疫层析检测试纸条,并与国外生产的胶体金试剂盒作对比。结果该试纸条检测范围质量浓度为5 ng/mL~1μg/mL;灵敏度质量浓度为5 ng/mL;特异性:与肌红蛋白、肌酸磷酸激酶同工酶、cTnT、cTnC无交叉反应;与国外胶体金试纸条检测结果比较阳性符合率为96.4%,阴性符合率为100.0%。结论成功建立cTnI胶体金免疫层析检测方法,该方法灵敏度高,特异性强,检测速度快,适于急性心肌梗死的早期诊断及科研工作需要。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 胶体金 免疫层析技术 实验室检查 急性心肌梗死
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肿瘤抑素T_7肽及其衍生物T_7-NGR载体构建及表达 被引量:9
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作者 贺欣 赵启仁 +1 位作者 宋娜玲 颜廷东 《生物医学工程与临床》 CAS 2008年第3期240-244,共5页
目的为了提高作用靶向性,将导向肽NGR与肿瘤抑素T_7肽的C端连接,获得T_7肽及其衍生物T_7-NGR的载体。方法通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素T_7肽及T_7-NGR的克隆载体pMD-T_7和pMD-T_7N,经酶切和测序鉴定后,将2种载体分别双... 目的为了提高作用靶向性,将导向肽NGR与肿瘤抑素T_7肽的C端连接,获得T_7肽及其衍生物T_7-NGR的载体。方法通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素T_7肽及T_7-NGR的克隆载体pMD-T_7和pMD-T_7N,经酶切和测序鉴定后,将2种载体分别双酶切,经低熔点琼脂糖凝胶电泳分离后,切下目的片段与酶切回收的质粒载体pET28a在低熔点琼脂糖中直接进行连接反应。阳性克隆经酶切和测序鉴定,转化感受态E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。结果酶切和测序鉴定结果正确,分别成功构建表达载体pET-T_7和pET-T_7N,经IPTG诱导,完成了表达条件的优化。Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,当IPTG浓度为1mmol/L时,25℃诱导8h,分别获得了T_7肽和T_7-NGR的表达产物。结论已经成功构建T_7肽和T_7-NGR的表达载体,获得了表达产物,为下一步的小肽活性实验奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤抑素T7肽 T7-NGR 导向肽 基因克隆表达
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抗人纤维蛋白噬菌体单链抗体库的构建和鉴定 被引量:1
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作者 王沂 张春明 +7 位作者 王洋 郝建秀 宋娜玲 刘金剑 贺欣 刘鉴峰 闫玉军 王德芝 《生物医学工程与临床》 CAS 2012年第3期287-291,共5页
目的应用噬菌体展示技术构建抗人纤维蛋白单链抗体(scFv)文库,筛选高亲和力抗人纤维蛋白scFv并进行鉴定。方法利用人纤维蛋白免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸聚合酶链反应(PCR)将VH和VL基因拼接成scFv基因,SfiⅠ/NotⅠ双酶... 目的应用噬菌体展示技术构建抗人纤维蛋白单链抗体(scFv)文库,筛选高亲和力抗人纤维蛋白scFv并进行鉴定。方法利用人纤维蛋白免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸聚合酶链反应(PCR)将VH和VL基因拼接成scFv基因,SfiⅠ/NotⅠ双酶切克隆入pCANTAB 5E噬菌粒载体,转化E.coli TG1构建成库,采用人纤维蛋白原对抗体库进行负筛选,人纤维蛋白进行正筛选,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测阳性克隆的抗原特异性并进行测序分析。结果构建了库容为8.7×106的抗人纤维蛋白scFv库,ELISA测定显示scFv具有较高的抗原特异性;抗人纤维蛋白scFv基因序列长732 bp,编码244个氨基酸,VH和VL基因均有明确的3个互补决定区和4个骨架区。结论成功构建了抗人纤维蛋白scFv文库,并筛选到高亲和力的抗人纤维蛋白scFv,为新型血栓显像剂的开发奠定了实验基础。 展开更多
关键词 纤维蛋白 噬菌体抗体库 单链抗体
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