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禽腺病毒12个血清型代表毒株的分子生物学鉴定研究
被引量：
4
1
作者
侯力丹
宋佳诚
+6 位作者
刘丹
毛娅卿
杨亚希
黄小洁
吴应凯
王嘉
李俊平
《中国兽药杂志》
2021年第8期12-21,共10页
为建立和完善禽腺病毒(FAdV)标准毒株库,针对FAdV不同种的纤突(Fiber)和六邻体(Hexon)序列设计引物,对中国兽医药品监察所保藏的FAdV 12个血清型代表毒株进行PCR扩增和遗传进化分析,完成了对毒株的分型鉴定,再结合同种不同血清型病毒He...
为建立和完善禽腺病毒(FAdV)标准毒株库,针对FAdV不同种的纤突(Fiber)和六邻体(Hexon)序列设计引物,对中国兽医药品监察所保藏的FAdV 12个血清型代表毒株进行PCR扩增和遗传进化分析,完成了对毒株的分型鉴定,再结合同种不同血清型病毒Hexon序列上酶切位点的特征,用酶切法验证了毒株不存在同种中不同血清型之间的交叉污染。试验结合遗传进化分析和酶切法对FAdV 12个血清型毒株进行了系统分型鉴定,明确其遗传背景、血清型信息及纯净性,建立了系统完整的FAdV代表毒株毒种库,为FAdV鉴定及相关生物制品的研发和评价奠定了物质基础。
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关键词
禽腺病毒
代表毒株
分子生物学
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职称材料
鸡腺病毒12个血清型代表毒株Penton蛋白基因分析
被引量：
2
2
作者
宋佳诚
侯力丹
+2 位作者
吴应凯
杨亚茜
李俊平
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020年第11期3417-3426,共10页
为了解鸡腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)Penton基因的遗传进化规律,试验根据GenBank中已公布的各基因型序列设计特异性引物,通过PCR技术分别扩增12个血清型毒株的Penton基因,连接至pEASY-Blunt Simple Cloning Vector上进行序列测定,并...
为了解鸡腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)Penton基因的遗传进化规律,试验根据GenBank中已公布的各基因型序列设计特异性引物,通过PCR技术分别扩增12个血清型毒株的Penton基因,连接至pEASY-Blunt Simple Cloning Vector上进行序列测定,并将12个血清型毒株Penton蛋白的核苷酸序列与NCBI上已公布的标准毒株的核苷酸序列使用ClustalW法进行分析比对,绘制遗传进化树。结果显示,12种血清型Penton蛋白核苷酸序列与各血清型标准毒株同源性均在99.2%以上,其中FAdV-1、FAdV-2、FAdV-3、FAdV-4、FAdV-6、FAdV-7、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-10、FAdV-11与对应标准株同源性高达100%,这进一步证实了实验室保存毒株与世界相应标准毒株的一致性。Penton蛋白虽然保守性较高,但不同种之间仍存在明显差异。FAdV-A1与其他种毒株同源性为70.6%~73.3%;FAdV-B5与其他种毒株同源性为70.6%~77.9%;FAdV-C同种不同血清型之间核苷酸同源性为99.6%,FAdV-C4与其他种之间同源性71.2%~73.4%;FAdV-D同种不同血清型之间核苷酸同源性为95.6%~98.7%,与其他种之间最高为85.3%;FAdV-E同种不同血清型之间核苷酸同源性为98.2%~99.4%,不同种间最高为85.3%。即相同种毒株之间差异较小,不同种毒株之间差异较大。依据Penton蛋白的核苷酸序列同样可以将FAdV分为A、B、C、D、E 5个种。本研究通过成功克隆FAdV 12种血清型Penton基因,并进行遗传进化分析,为今后对FAdV诊断、监测及毒株鉴定提供了参考。
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关键词
鸡腺病毒(FAdV)
Penton蛋白
序列分析
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职称材料
重组动物疱疹病毒活载体疫苗的构建与应用研究进展
被引量：
8
3
作者
杨明珠
陈晓春
+2 位作者
宋佳诚
侯亚欣
李俊平
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022年第1期338-351,共14页
重组病毒活载体疫苗是通过基因工程方法构建的活载体疫苗,规避了传统疫苗的一些缺点,具有极大的优势和应用前景。目前被广泛用作重组病毒载体的动物疱疹病毒有火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies viru...
重组病毒活载体疫苗是通过基因工程方法构建的活载体疫苗,规避了传统疫苗的一些缺点,具有极大的优势和应用前景。目前被广泛用作重组病毒载体的动物疱疹病毒有火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、鸭瘟病毒(Duck enteritis virus,DEV)、鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)等。对疱疹病毒基因组序列进行分析显示,其基因组大,复制非必需区域多,容纳外源基因的能力强。同时疱疹病毒具有宿主范围广泛、免疫持续期长、安全性较好及相关基因操作技术成熟等优点。笔者总结了当前构建重组动物疱疹病毒的主要方法,包括传统同源重组技术、细菌人工染色体(BAC)技术、Fosmid文库及CRISPR/Cas9基因编辑技术,简述了各个方法的基本原理及技术特点,比较了各个方法的优缺点,并分析了各个方法的最适运用条件,从而更准确地为研究工作提供理论及技术参考;对外源基因的表达方式进行分析,论证了不同启动子对外源基因表达的调控作用不同,同时对不同疱疹病毒的常用插入位点进行了研究成果的列举总结,并对当前重组病毒HVT、PRV、DEV及ILTV活载体疫苗的研究进展进行总结,对相关生物制品的注册应用信息进行了归纳,介绍了高选择率外源基因及高成功率插入位点,从而为相关生物制品的研制提供理论参考。
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关键词
重组动物疱疹病毒
活载体疫苗
火鸡疱疹病毒(HVT)
伪狂犬病病毒(PRV)
鸭瘟病毒(DEV)
传染性喉气管炎病毒(ILTV)
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职称材料
题名
禽腺病毒12个血清型代表毒株的分子生物学鉴定研究
被引量：
4
1
作者
侯力丹
宋佳诚
刘丹
毛娅卿
杨亚希
黄小洁
吴应凯
王嘉
李俊平
机构
中国兽医药品监察所
中国农业大学动物医学院
国家兽用药品工程技术研究中心
出处
《中国兽药杂志》
2021年第8期12-21,共10页
基金
国家重点研发计划“畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发”重点专项(2016YFD0500800,2016YFD0500809)。
文摘
为建立和完善禽腺病毒(FAdV)标准毒株库,针对FAdV不同种的纤突(Fiber)和六邻体(Hexon)序列设计引物,对中国兽医药品监察所保藏的FAdV 12个血清型代表毒株进行PCR扩增和遗传进化分析,完成了对毒株的分型鉴定,再结合同种不同血清型病毒Hexon序列上酶切位点的特征,用酶切法验证了毒株不存在同种中不同血清型之间的交叉污染。试验结合遗传进化分析和酶切法对FAdV 12个血清型毒株进行了系统分型鉴定,明确其遗传背景、血清型信息及纯净性,建立了系统完整的FAdV代表毒株毒种库,为FAdV鉴定及相关生物制品的研发和评价奠定了物质基础。
关键词
禽腺病毒
代表毒株
分子生物学
Keywords
fowl adenovirus
representative strain
molecular biology
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
鸡腺病毒12个血清型代表毒株Penton蛋白基因分析
被引量：
2
2
作者
宋佳诚
侯力丹
吴应凯
杨亚茜
李俊平
机构
中国兽医药品监察所
国家兽用药品工程技术研究中心
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020年第11期3417-3426,共10页
基金
国家重点研发计划“畜禽重大疫病防控与高效安全养殖综合技术研发”重点专项(2016YFD0500800、2016YFD0500809)。
文摘
为了解鸡腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)Penton基因的遗传进化规律,试验根据GenBank中已公布的各基因型序列设计特异性引物,通过PCR技术分别扩增12个血清型毒株的Penton基因,连接至pEASY-Blunt Simple Cloning Vector上进行序列测定,并将12个血清型毒株Penton蛋白的核苷酸序列与NCBI上已公布的标准毒株的核苷酸序列使用ClustalW法进行分析比对,绘制遗传进化树。结果显示,12种血清型Penton蛋白核苷酸序列与各血清型标准毒株同源性均在99.2%以上,其中FAdV-1、FAdV-2、FAdV-3、FAdV-4、FAdV-6、FAdV-7、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-10、FAdV-11与对应标准株同源性高达100%,这进一步证实了实验室保存毒株与世界相应标准毒株的一致性。Penton蛋白虽然保守性较高,但不同种之间仍存在明显差异。FAdV-A1与其他种毒株同源性为70.6%~73.3%;FAdV-B5与其他种毒株同源性为70.6%~77.9%;FAdV-C同种不同血清型之间核苷酸同源性为99.6%,FAdV-C4与其他种之间同源性71.2%~73.4%;FAdV-D同种不同血清型之间核苷酸同源性为95.6%~98.7%,与其他种之间最高为85.3%;FAdV-E同种不同血清型之间核苷酸同源性为98.2%~99.4%,不同种间最高为85.3%。即相同种毒株之间差异较小,不同种毒株之间差异较大。依据Penton蛋白的核苷酸序列同样可以将FAdV分为A、B、C、D、E 5个种。本研究通过成功克隆FAdV 12种血清型Penton基因,并进行遗传进化分析,为今后对FAdV诊断、监测及毒株鉴定提供了参考。
关键词
鸡腺病毒(FAdV)
Penton蛋白
序列分析
Keywords
fowl adenovirus(FAdV)
Penton protein
sequence analysis
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
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职称材料
题名
重组动物疱疹病毒活载体疫苗的构建与应用研究进展
被引量：
8
3
作者
杨明珠
陈晓春
宋佳诚
侯亚欣
李俊平
机构
中国兽医药品监察所
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022年第1期338-351,共14页
基金
中国兽医药品监察所“兽药行业公益性重点专项”(GY202017)。
文摘
重组病毒活载体疫苗是通过基因工程方法构建的活载体疫苗,规避了传统疫苗的一些缺点,具有极大的优势和应用前景。目前被广泛用作重组病毒载体的动物疱疹病毒有火鸡疱疹病毒(Herpesvirus of turkey,HVT)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、鸭瘟病毒(Duck enteritis virus,DEV)、鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)等。对疱疹病毒基因组序列进行分析显示,其基因组大,复制非必需区域多,容纳外源基因的能力强。同时疱疹病毒具有宿主范围广泛、免疫持续期长、安全性较好及相关基因操作技术成熟等优点。笔者总结了当前构建重组动物疱疹病毒的主要方法,包括传统同源重组技术、细菌人工染色体(BAC)技术、Fosmid文库及CRISPR/Cas9基因编辑技术,简述了各个方法的基本原理及技术特点,比较了各个方法的优缺点,并分析了各个方法的最适运用条件,从而更准确地为研究工作提供理论及技术参考;对外源基因的表达方式进行分析,论证了不同启动子对外源基因表达的调控作用不同,同时对不同疱疹病毒的常用插入位点进行了研究成果的列举总结,并对当前重组病毒HVT、PRV、DEV及ILTV活载体疫苗的研究进展进行总结,对相关生物制品的注册应用信息进行了归纳,介绍了高选择率外源基因及高成功率插入位点,从而为相关生物制品的研制提供理论参考。
关键词
重组动物疱疹病毒
活载体疫苗
火鸡疱疹病毒(HVT)
伪狂犬病病毒(PRV)
鸭瘟病毒(DEV)
传染性喉气管炎病毒(ILTV)
Keywords
recombinant animal Herpesvirus
live vector vaccine
Herpesvirus of turkey(HVT)
Pseudorabies virus(PRV)
Duck enteritis virus(DEV)
Infectious laryngotracheitis virus(ILTV)
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
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发文年
被引量
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1
禽腺病毒12个血清型代表毒株的分子生物学鉴定研究
侯力丹
宋佳诚
刘丹
毛娅卿
杨亚希
黄小洁
吴应凯
王嘉
李俊平
《中国兽药杂志》
2021
4
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职称材料
2
鸡腺病毒12个血清型代表毒株Penton蛋白基因分析
宋佳诚
侯力丹
吴应凯
杨亚茜
李俊平
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020
2
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职称材料
3
重组动物疱疹病毒活载体疫苗的构建与应用研究进展
杨明珠
陈晓春
宋佳诚
侯亚欣
李俊平
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2022
8
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