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小鼠24p3基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达
1
作者
安江宏
周建新
陈彬
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第17期1725-1728,共4页
目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能。方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA。用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核...
目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能。方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA。用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体并行酶切和测序鉴定。脂质体DOTAP方法转染NIH3T3细胞,48 h后用G418筛选阳性克隆并培养扩增至21 d。对阳性克隆的培养基上清中24p3/SIP24蛋白的表达用ELISA和W esternb lot分析,进一步用原子吸收分光光谱观察其介导铁向NIH3T3细胞内转运的生物学功能。结果成功克隆24p3 cDNA并构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体,筛选出稳定表达24p3/SIP24蛋白的NIH3T3细胞株,24p3/SIP24蛋白在NIH3T3细胞上清中获得表达,并能介导铁向NIH3T3细胞内转运。结论24p3基因在NIH3T3细胞中获得表达,有良好的生物学活性,为进一步研究24p3/SIP24蛋白介导铁转运的生物学功能及作用机制奠定了基础。
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关键词
24p3/SIP24
稳定转染
小鼠NIH3T3细胞
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职称材料
AC133和EpCAM在人肺腺癌中的表达及双阳性细胞的分选
2
作者
赵振国
罗福康
+4 位作者
安江宏
段玉忠
孙建国
朱波
陈正堂
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期487-490,共4页
目的:通过双重免疫荧光染色法检测人肺腺癌组织标本中AC133以及上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达,并以流式细胞术分选AC133+EpCAM+细胞,为后续人肺腺癌干细胞研究提供实验基础。方法:取人肺腺癌组织标本,冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,...
目的:通过双重免疫荧光染色法检测人肺腺癌组织标本中AC133以及上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达,并以流式细胞术分选AC133+EpCAM+细胞,为后续人肺腺癌干细胞研究提供实验基础。方法:取人肺腺癌组织标本,冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,通过激光共聚焦显微镜检测腺癌组织内AC133和EpCAM的表达。以胶原酶和分散酶将新鲜肺腺癌组织标本制为单细胞悬液,滤除其中的胶原并去除红细胞后,以AC133和EpCAM共同标记单细胞,上流式细胞仪进行分选。结果:在人肺腺癌标本中具有AC133和EpCAM的表达;通过流式细胞术可分选到AC133和EpCAM共表达细胞。结论:验证了人肺腺癌组织中AC133和EpCAM的表达情况;通过流式细胞术分选获得AC133和EpCAM双标记阳性细胞,可为人肺腺癌干细胞的后续研究提供实验基础。
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关键词
AC133
上皮细胞黏附分子
人肺腺癌干细胞
流式细胞术
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职称材料
题名
小鼠24p3基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达
1
作者
安江宏
周建新
陈彬
机构
第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第17期1725-1728,共4页
文摘
目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能。方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA。用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体并行酶切和测序鉴定。脂质体DOTAP方法转染NIH3T3细胞,48 h后用G418筛选阳性克隆并培养扩增至21 d。对阳性克隆的培养基上清中24p3/SIP24蛋白的表达用ELISA和W esternb lot分析,进一步用原子吸收分光光谱观察其介导铁向NIH3T3细胞内转运的生物学功能。结果成功克隆24p3 cDNA并构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体,筛选出稳定表达24p3/SIP24蛋白的NIH3T3细胞株,24p3/SIP24蛋白在NIH3T3细胞上清中获得表达,并能介导铁向NIH3T3细胞内转运。结论24p3基因在NIH3T3细胞中获得表达,有良好的生物学活性,为进一步研究24p3/SIP24蛋白介导铁转运的生物学功能及作用机制奠定了基础。
关键词
24p3/SIP24
稳定转染
小鼠NIH3T3细胞
Keywords
mouse 24p3 gene
stable transfection
NIH3T3 cell
分类号
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
AC133和EpCAM在人肺腺癌中的表达及双阳性细胞的分选
2
作者
赵振国
罗福康
安江宏
段玉忠
孙建国
朱波
陈正堂
机构
第三军医大学新桥医院肿瘤科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期487-490,共4页
基金
国家高技术发展研究计划(“863”项目)(2008aa02Z104)~~
文摘
目的:通过双重免疫荧光染色法检测人肺腺癌组织标本中AC133以及上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达,并以流式细胞术分选AC133+EpCAM+细胞,为后续人肺腺癌干细胞研究提供实验基础。方法:取人肺腺癌组织标本,冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,通过激光共聚焦显微镜检测腺癌组织内AC133和EpCAM的表达。以胶原酶和分散酶将新鲜肺腺癌组织标本制为单细胞悬液,滤除其中的胶原并去除红细胞后,以AC133和EpCAM共同标记单细胞,上流式细胞仪进行分选。结果:在人肺腺癌标本中具有AC133和EpCAM的表达;通过流式细胞术可分选到AC133和EpCAM共表达细胞。结论:验证了人肺腺癌组织中AC133和EpCAM的表达情况;通过流式细胞术分选获得AC133和EpCAM双标记阳性细胞,可为人肺腺癌干细胞的后续研究提供实验基础。
关键词
AC133
上皮细胞黏附分子
人肺腺癌干细胞
流式细胞术
Keywords
AC133
EpCAM
human pulmonary adenocarcinoma stem cell
flow cytometry
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠24p3基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达
安江宏
周建新
陈彬
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
0
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职称材料
2
AC133和EpCAM在人肺腺癌中的表达及双阳性细胞的分选
赵振国
罗福康
安江宏
段玉忠
孙建国
朱波
陈正堂
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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