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皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭能力影响的实验研究被引量：16: 1; 作者何光志邓树轩 +9 位作者何前松李世军吴玛莉魏良纲王文佳王平曹锋黄高安传伟安传相《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2012年第1期77-81,共5页; 目的:研究皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,探讨其抗肿瘤作用机制.方法:通过体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的皂角刺总黄酮处理后,采用WST-1法检测皂角刺总黄酮对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用,琼脂糖凝胶电... 展开更多; 关键词皂角刺总黄酮 HEPG2 增殖凋亡侵袭能力; 在线阅读下载PDF 职称材料

贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体的构建被引量：1: 2; 作者何光志田维毅 +12 位作者王平王文佳奚锦愈奇刘蕾黄高蔡琨韩洁王乾宇刘安胜安传伟查高武张鹏《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第8期6-8,共3页; 为了构建凤冈野生天麻的抗真菌肽基因(gaf)的表达载体,经BamHI和HindIII酶切的pMD18-T-gaf和pET32a(+)质粒的纯化回收产物并进行连接,连接产物pET32a(+)-gaf转化大肠杆菌感受态细胞DH5α后,采用菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析。... 展开更多; 关键词野生天麻抗真菌肽基因表达载体构建贵州; 在线阅读下载PDF 职称材料

凤冈野生天麻抗真菌肽基因(gaf)的克隆与序列分析被引量：1: 3; 作者何光志田维毅 +10 位作者王平王文佳奚锦俞琦黄高蔡琨王乾宇刘安胜安传伟查高武张鹏《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第7期28-30,33,共4页; 为了克隆凤冈野生天麻的抗真菌肽基因(gaf),以凤冈野生天麻的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增抗真菌肽基因(gaf),经克隆和测序结果显示:RT-PCR产物电泳扩增的目标条带长度为545 bp;经测序和序列分析,该基因与Genebank中公布的序列编码天... 展开更多; 关键词野生天麻抗真菌肽基因(gaf) 克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选被引量：1: 4; 作者何光志田维毅 +5 位作者高英王平王文佳王乾宇黄高安传伟《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2011年第5期70-74,共5页; 目的:构建人源噬菌体展示单链抗体(ScFv)库,筛选抗结核杆菌特异性、高亲和力的ScFv.方法:从结核患者的外周血淋巴细胞中,提取RNA并通过RT-PCR扩增出VH和VL基因,并采用SOE-PCR构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载pCANTAB5E中,转化于大肠杆菌T... 展开更多; 关键词结核杆菌人源噬菌体单链抗体制备及筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌鼠源化噬菌体抗体库的构建及筛选: 5; 作者何光志田维毅 +7 位作者高英王平王文佳王乾宇奚锦俞琦黄高安传伟《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第13期131-134,共4页; 用灭活的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌免疫小鼠后,取出小鼠脾脏提取总RNA,以RT-PCR扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,以重叠延伸PCR(SOE-PCR)法将VH和VL拼接成ScFv基因,克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中,转化大肠杆菌E.coli TG1,... 展开更多; 关键词甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌抗体库单链抗体库; 在线阅读下载PDF 职称材料

胰腺癌人源噬菌体单链抗体库的构建及初步筛选: 6; 作者何光志田维毅 +5 位作者高英王平王文佳黄高蔡琨安传伟《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期158-160,共3页; 提取胰腺癌患者的外周淋巴细胞总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出人源抗体H链和L链的可变区基因,采用SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成scFv片段,然后将scFv片段克隆至pCANTAB5E载体,并电转化至感受态TG1菌,经辅助噬菌体M13K07拯救,获得胰腺... 展开更多; 关键词胰腺癌人源噬菌体单链抗体构建与筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪蛔虫卵可溶性抗原单链抗体库的构建及初步筛选: 7; 作者何光志周颖 +5 位作者安传伟张太华熊文康崔小东罗成松谢波《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第12期178-182,共5页; 为进一步研制抗猪蛔虫的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定基础,以猪蛔虫未成熟虫卵可溶性抗原免疫BALB/C小鼠,提取小鼠脾脏总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出H链和L链可变区基因,以SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成ScFv片段,然后将ScF... 展开更多; 关键词蛔虫可溶性抗原单链抗体库构建与筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭能力影响的实验研究被引量：16: 1; 作者何光志邓树轩何前松李世军吴玛莉魏良纲王文佳王平曹锋黄高安传伟安传相; 机构贵阳中医学院大岭山畜牧兽医站贵州省疾病预防控制中心贵阳学院; 出处《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2012年第1期77-81,共5页; 基金 2010年贵州省科学技术基金资助项目(黔科合J字[2010]2262号) 贵州省2011年社会发展科技攻关资助项目[黔科合SY字(2011)3020]; 文摘目的:研究皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,探讨其抗肿瘤作用机制.方法:通过体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的皂角刺总黄酮处理后,采用WST-1法检测皂角刺总黄酮对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化,流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞的凋亡率,划痕实验和Transwell小室检测皂角刺总黄酮对HepG2细胞侵袭、转移的影响.结果:不同浓度的皂角刺总黄酮作用于细胞48 h后,能显著抑制HepG2细胞的增殖,随着药物浓度的增加,抑制作用增强,IC50为(190.62±0.89)mg/L;流式AnnexinV/PI双染法检测显示,不同浓度的皂角刺总黄酮均可诱导HepG2细胞凋亡;不同浓度的皂角刺总黄酮处理组发现凋亡细胞所特有的DNA ladder条带;皂角刺总黄酮可降低HepG2细胞的黏附能力,使Tr-answell小室膜上的肝癌细胞明显减少,并且呈剂量依赖性.结论:皂角刺总黄酮能明显抑制肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭能力和诱导其凋亡.; 关键词皂角刺总黄酮 HEPG2 增殖凋亡侵袭能力; Keywords flavone components from Spina gleditsiae HepG2 proliferation apoptosis metastasi; 分类号 R28 [医药卫生—中药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体的构建被引量：1: 2; 作者何光志田维毅王平王文佳奚锦愈奇刘蕾黄高蔡琨韩洁王乾宇刘安胜安传伟查高武张鹏; 机构贵阳中医学院凤冈县天桥乡畜牧兽医水产站兴义市乌沙镇格里小学兴义市捧乍中学; 出处《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第8期6-8,共3页; 基金贵州省中药管理局课题"贵州野生天麻抗真菌肽基因的表达及重组蛋白抗真菌作用研究"; 文摘为了构建凤冈野生天麻的抗真菌肽基因(gaf)的表达载体,经BamHI和HindIII酶切的pMD18-T-gaf和pET32a(+)质粒的纯化回收产物并进行连接,连接产物pET32a(+)-gaf转化大肠杆菌感受态细胞DH5α后,采用菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析。结果表明:构建的凤冈野生天麻抗真菌肽基因表达载体通过菌落PCR、酶切鉴定和阳性质粒测序分析,目的片段成功插入载体,目的片段与预期的gaf基因大小(545 bp)相符。试验成功构建了贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体,pET32a(+)-gaf可以用来制备抗真菌蛋白。; 关键词野生天麻抗真菌肽基因表达载体构建贵州; Keywords wild Gastrodia antifungal peptide gene(gaf) expression vector construction Guizhou; 分类号 S567 [农业科学—中草药栽培]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名凤冈野生天麻抗真菌肽基因(gaf)的克隆与序列分析被引量：1: 3; 作者何光志田维毅王平王文佳奚锦俞琦黄高蔡琨王乾宇刘安胜安传伟查高武张鹏; 机构贵阳中医学院凤冈天桥乡畜牧兽医水产站兴义乌沙镇格里小学兴义捧乍中学; 出处《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第7期28-30,33,共4页; 基金贵州省中药管理局课题"贵州野生天麻抗真菌肽基因的表达及重组蛋白抗真菌作用研究"; 文摘为了克隆凤冈野生天麻的抗真菌肽基因(gaf),以凤冈野生天麻的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增抗真菌肽基因(gaf),经克隆和测序结果显示:RT-PCR产物电泳扩增的目标条带长度为545 bp;经测序和序列分析,该基因与Genebank中公布的序列编码天麻抗真菌蛋白的基因序列(AY032588)同源性达97%。此研究成功地克隆了凤冈野生天麻抗真菌肽编码基因。; 关键词野生天麻抗真菌肽基因(gaf) 克隆序列分析; Keywords wild Gastrodia antifungal peptide gene（gaf） cloning sequence analysis; 分类号 S567.9 [农业科学—中草药栽培]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选被引量：1: 4; 作者何光志田维毅高英王平王文佳王乾宇黄高安传伟; 机构贵阳中医学院遵义医学院附属医院; 出处《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2011年第5期70-74,共5页; 基金贵州省2011年社会发展科技攻关资助项目(黔科合SY字(2011)3020); 文摘目的:构建人源噬菌体展示单链抗体(ScFv)库,筛选抗结核杆菌特异性、高亲和力的ScFv.方法:从结核患者的外周血淋巴细胞中,提取RNA并通过RT-PCR扩增出VH和VL基因,并采用SOE-PCR构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载pCANTAB5E中,转化于大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.结果:初级库库容量为3.5×106,在大肠杆菌TG1中重组后得到2.6×106的次级抗体库.结论:成功构建噬菌体展示ScFv库并获得人源抗结核杆菌特异性ScFv,为进一步研制抗抗结核杆菌的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定了基础.; 关键词结核杆菌人源噬菌体单链抗体制备及筛选; Keywords Mycobacterium Smegmatis human single-chain antibody construction and screening; 分类号 R378.91 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌鼠源化噬菌体抗体库的构建及筛选: 5; 作者何光志田维毅高英王平王文佳王乾宇奚锦俞琦黄高安传伟; 机构贵阳中医学院基础部遵义医学院附属医院; 出处《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第13期131-134,共4页; 基金贵阳中医学院博士基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目(黔省专合字[2010]50号); 文摘用灭活的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌免疫小鼠后,取出小鼠脾脏提取总RNA,以RT-PCR扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,以重叠延伸PCR(SOE-PCR)法将VH和VL拼接成ScFv基因,克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中,转化大肠杆菌E.coli TG1,构建鼠源抗金黄色葡萄天然噬菌体抗体库。研究结果表明,构建的鼠源性抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌抗体库库容为3.2×106,多样性良好,共筛选出8个阳性克隆。说明已成功构建抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌抗体库,为筛选有效治疗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌奠定了基础。; 关键词甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌抗体库单链抗体库; Keywords methicillin-resistant Staphylococcus aureus antibody library single-chain antibody; 分类号 G423.04 [文化科学—课程与教学论]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胰腺癌人源噬菌体单链抗体库的构建及初步筛选: 6; 作者何光志田维毅高英王平王文佳黄高蔡琨安传伟; 机构贵阳中医学院遵义医学院附院; 出处《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期158-160,共3页; 基金贵州省科学技术基金(黔科合J字[2010]2262号); 文摘提取胰腺癌患者的外周淋巴细胞总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出人源抗体H链和L链的可变区基因,采用SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成scFv片段,然后将scFv片段克隆至pCANTAB5E载体,并电转化至感受态TG1菌,经辅助噬菌体M13K07拯救,获得胰腺癌人源噬菌体单链抗体库。结果表明,从外周血淋巴细胞中获取可变区基因,利用噬菌体抗体库技术制备人源抗胰腺癌单链抗体的策略是可行的。; 关键词胰腺癌人源噬菌体单链抗体构建与筛选; Keywords pancreatic cancer human phage antibody construction and screening; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪蛔虫卵可溶性抗原单链抗体库的构建及初步筛选: 7; 作者何光志周颖安传伟张太华熊文康崔小东罗成松谢波; 机构贵阳中医学院基础部思南县动物疾病预防控制中心贵阳中医学院时珍学院; 出处《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第12期178-182,共5页; 基金贵州省2011年社会发展科技攻关项目"IL-4R单链抗体制备及其与竹叶青蛇毒LAAO融合蛋白靶向抗胰腺癌的研究"[黔科合SY字(2011)3020]; 文摘为进一步研制抗猪蛔虫的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定基础,以猪蛔虫未成熟虫卵可溶性抗原免疫BALB/C小鼠,提取小鼠脾脏总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出H链和L链可变区基因,以SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成ScFv片段,然后将ScFv片段克隆至pCANTAB-5E载体,并转化至感受态TG1菌,经辅助噬菌体M13K07拯救,构建猪蛔虫卵可溶性抗原噬菌体展示单链抗体库,结果从20个噬菌体克隆中筛选到15个阳性克隆。; 关键词蛔虫可溶性抗原单链抗体库构建与筛选; Keywords Ascaris suum soluble immature antigen（SIEA） single-chain Fv antibody（ScFv） construction and screening; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	皂角刺总黄酮对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭能力影响的实验研究	何光志邓树轩何前松李世军吴玛莉魏良纲王文佳王平曹锋黄高安传伟安传相	《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心	2012	16	在线阅读下载PDF 职称材料
2	贵州野生天麻抗真菌肽基因表达载体的构建	何光志田维毅王平王文佳奚锦愈奇刘蕾黄高蔡琨韩洁王乾宇刘安胜安传伟查高武张鹏	《贵州农业科学》 CAS 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	凤冈野生天麻抗真菌肽基因(gaf)的克隆与序列分析	何光志田维毅王平王文佳奚锦俞琦黄高蔡琨王乾宇刘安胜安传伟查高武张鹏	《贵州农业科学》 CAS 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选	何光志田维毅高英王平王文佳王乾宇黄高安传伟	《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	抗甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌鼠源化噬菌体抗体库的构建及筛选	何光志田维毅高英王平王文佳王乾宇奚锦俞琦黄高安传伟	《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	胰腺癌人源噬菌体单链抗体库的构建及初步筛选	何光志田维毅高英王平王文佳黄高蔡琨安传伟	《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	猪蛔虫卵可溶性抗原单链抗体库的构建及初步筛选	何光志周颖安传伟张太华熊文康崔小东罗成松谢波	《贵州农业科学》 CAS 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料