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磷酸腺苷激活的蛋白激酶参与调节细胞外信号调节激酶1/2活化发挥对血管平滑肌细胞胰岛素样生长因子-1信号的抑制作用 被引量：2
1
作者 宁钧宇 敬海明 +3 位作者 杜宏举 齐丽娟 高珊 李国君 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期101-105,共5页
目的进一步证实在猪主动脉平滑肌细胞中磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)抑制胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)刺激引起的细胞增生,以及探讨其可能的机制。方法使用AMPK活化剂二甲双... 目的进一步证实在猪主动脉平滑肌细胞中磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)抑制胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)刺激引起的细胞增生,以及探讨其可能的机制。方法使用AMPK活化剂二甲双胍增强细胞内AMPK的活化(表现为AMPK第172位苏氨酸磷酸化增高);采用定点突变获得组成性激活型AMPK突变体,设计短发卡RNA (short hairpin,shRNA)序列构建AMPK干扰载体,并分别包装产生组成性激活型AMPK和AMPK敲低慢病毒。分别采用AMPK活化剂二甲双胍处理、组成性激活型AMPK慢病毒感染和AMPK敲低慢病毒感染猪主动脉平滑肌细胞,观察AMPK活性对猪主动脉平滑肌细胞中IGF-1刺激引起的细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases 1/2,ERK1/2)活性(表现为202位苏氨酸和204位酪氨酸的磷酸化)及其下游细胞增生的影响。结果二甲双胍明显增强AMPK的活性(表现为172位苏氨酸磷酸化增高),并明显抑制IGF-1刺激引起的ERK1/2活化(表现为202位苏氨酸和204位酪氨酸的磷酸化受到抑制);组成性激活型AMPK表达能明显抑制IGF-1刺激引起的ERK1/2活化以及下游的细胞增生;在AMPK敲低细胞中,IGF-1能引起更强的ERK1/2活化。结论 AMPK能通过抑制ERK1/2活化抑制血管平滑肌细胞IGF-1信号,并能抑制IGF-1刺激引起的血管平滑肌细胞增生。 展开更多
关键词 磷酸腺苷激活的蛋白激酶 胰岛素样生长因子-1 细胞外信号调节激酶1/2
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TMSG-1基因转染对肿瘤转移表型的影响 被引量：10
2
作者 边巴 马春树 +3 位作者 由江峰 宁钧宇 方伟岗 郑杰 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期18-22,共5页
目的 :研究肿瘤转移抑制基因TMSG 1对肿瘤转移表型的影响。方法 :将含TMSG 1全长开放阅读框架的 1.5kbcDNA克隆于 pcDNA3,构建正义及反义TMSG 1cDNA真核表达载体 ,以脂质体转染人肺巨细胞癌PG的高转移亚系BE1,挑选G4 18抗性克隆 ,RT PC... 目的 :研究肿瘤转移抑制基因TMSG 1对肿瘤转移表型的影响。方法 :将含TMSG 1全长开放阅读框架的 1.5kbcDNA克隆于 pcDNA3,构建正义及反义TMSG 1cDNA真核表达载体 ,以脂质体转染人肺巨细胞癌PG的高转移亚系BE1,挑选G4 18抗性克隆 ,RT PCR检测正义或反义TMSG 1cDNA在转染细胞中的表达 ,进行转染细胞体外肿瘤生物学行为检测。结果 :RT PCR显示正义TMSG 1cDNA转染的BE1细胞 (BE1 S)中TMSG 1表达明显高于BE1及空载体对照细胞 ,反义TMSG 1cDNA转染细胞 (BE1 AS)中TMSG 1表达低于空载体对照细胞。与BE1及空载体对照细胞 (BE1 V)相比 ,BE1 AS细胞体外生长较快 ,软琼脂克隆形成能力明显增强 ;而BE1 S细胞体外生长能力没有显著改变 ,但其穿越Matrigel的能力及软琼脂克隆形成能力明显减弱。流式细胞仪分析结果显示BE1 S的G0 、G1期的细胞较BE1 V细胞比例增多 ,并且BE1 S出现了细胞凋亡峰。结论 :实验结果表明反义TMSG 1基因转染可增强BE1细胞的体外生长、体外侵袭能力及克隆形成能力。而正义TMSG 1基因转染则使BE1细胞的侵袭能力及软琼脂克隆形成能力减弱 ,而对细胞体外生长能力无明显影响。结论支持TMSG 展开更多
关键词 TMSG-1基因转染 肿瘤转移 表型 病理生理学
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小麦胚芽抗氧化肽对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖的保护作用 被引量：2
3
作者 曹小舟 陈海娟 +2 位作者 刘永祥 宁钧宇 沈新春 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第17期49-53,58,共6页
目的:研究小麦胚芽抗氧化肽对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的保护作用。方法:用高糖诱导的VSMCs模型,将培养的VSMCs随机分为三大组:正常组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖,G)和实验组... 目的:研究小麦胚芽抗氧化肽对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的保护作用。方法:用高糖诱导的VSMCs模型,将培养的VSMCs随机分为三大组:正常组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖,G)和实验组(25 mmol/L葡萄糖+不同浓度的抗氧化肽)。采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)快速比色法和流式细胞仪检测抗氧化肽对VSMCs增殖活性及其细胞周期分布影响;通过酶标法测定在不同处理条件下细胞内总抗氧化能力(total antioxidation capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量变化。结果:小麦胚芽抗氧化肽可有效抑制高糖诱导的VSMCs增殖(p<0.01),阻滞细胞周期G1/S期转换,显著提高了细胞中总抗氧化能力,GSH-Px和SOD酶水平(p<0.01),降低了细胞中MDA水平(p<0.01)。结论:小麦胚芽抗氧化肽对高糖诱导的VSMCs增殖具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 小麦胚芽抗氧化肽 血管平滑肌细胞 高糖 保护作用
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