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体外人脐静脉内皮细胞的培养鉴定及抗原表达分析
被引量：
8
1
作者
刘长乐
郑心田
+2 位作者
李广平
孟恒星
邱录贵
《山东医药》
CAS
北大核心
2011年第36期25-26,共2页
目的探讨体外分离、培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的方法及进行HUVECs的扩增和鉴定,明确HUVECs表面抗原表达情况。方法采集正常人脐带,应用改良的酶消化法进行HUVECs的分离培养;通过细胞形态学观察及免疫荧光化学鉴定HUVECs,应用细胞荧...
目的探讨体外分离、培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的方法及进行HUVECs的扩增和鉴定,明确HUVECs表面抗原表达情况。方法采集正常人脐带,应用改良的酶消化法进行HUVECs的分离培养;通过细胞形态学观察及免疫荧光化学鉴定HUVECs,应用细胞荧光化学进行内皮细胞(ECs)功能检测;应用流式细胞仪分析内皮细胞的特异性抗原表达。结果观察细胞形态呈铺路石样,Ⅷ因子相关抗原荧光染色阳性,显示出摄取乙酰化低密度脂蛋白、结合荆豆凝集素等ECs的功能特性;流式细胞仪检测CD31、VWF、KDR、CD34抗原表达阳性百分比高,而CD133处于低水平。结论通过本实验改良的分离培养方法,可以在体外获得较高数量的HUVECs,在细胞形态、表面抗原标志、细胞功能等方面具有ECs特征,可以用于血管ECs模型的构建。
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关键词
脐静脉内皮细胞
流式细胞术
抗原表达
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职称材料
不同培养体系对脐带血造血干细胞扩增的影响
被引量：
1
2
作者
郝牧
邱录贵
+2 位作者
吴瞳
李斯丹
孟恒星
《生物医学工程与临床》
CAS
2008年第4期295-298,共4页
目的探讨不同培养体系对造血干细胞的体外扩增及其表型的改变。方法新鲜分离人脐带血单个核细胞(MNC),免疫磁珠法分选CD34+造血干细胞(HSC),计数富集得到的CD34+细胞,平均分为3组,每组含CD34+细胞2.2×105:A组(HSC+CK)CD34+细胞接种...
目的探讨不同培养体系对造血干细胞的体外扩增及其表型的改变。方法新鲜分离人脐带血单个核细胞(MNC),免疫磁珠法分选CD34+造血干细胞(HSC),计数富集得到的CD34+细胞,平均分为3组,每组含CD34+细胞2.2×105:A组(HSC+CK)CD34+细胞接种于StemlineTMⅡ无血清培养基中,加入早期作用因子FST组合(SCF、FL和TPO,质量浓度50ng/ml的SCF、质量浓度100ng/ml的TPO和FL),并于接种0d添加质量浓度20ng/mlIL-3;B组(HSC+MSC)CD34+细胞接种于含MSCfeeder的培养瓶,加入StemlineTMⅡ无血清培养基;C组(HSC+MSC+CK)CD34+细胞接种于含MSCfeeder的培养瓶,加入StemlineTMⅡ无血清培养基,加入早期作用因子FST组合首剂添加IL-3(剂量同A组)。在培养后4、7、10、14d计数有核细胞总数,流式细胞术检测扩增细胞免疫表型的改变。结果0～14d培养后MNC细胞扩增数C组(HSC+MSC+CK)>A组(HSC+CK)>B组(HSC+MSC),P<0.01。3组间CD34+细胞比例B组(HSC+MSC)>C组(HSC+MSC+CK)>A组(HSC+CK),P<0.01。CD34+细胞绝对数也出现了明显增加,其中C组(HSC+MSC+CK)增加最为明显,其次是A组(HSC+CK)。其中A组(HSC+CK)培养4d较0d(14.68%)CD34+CD38-细胞有明显增加(62.71%,P<0.05),C组(HSC+MSC+CK)CD34+CD38-细胞也略有增加(23.99%);培养7d时,A组(HSC+CK)、C组(HSC+MSC+CK)CD34+CD38-细胞数明显下降,分别为4.44%和1.38%,而B组(HSC+MSC)CD34+CD38-细胞上升为18.92%,与0d时比较P<0.05,与A组(HSC+CK)、C组(HSC+MSC+CK)比较P<0.05。结论MSC和细胞因子的联合应用,一方面使得总MNC细胞得到大量扩增,同时还使扩增后细胞保持CD34+免疫表型,培养体系中加入MSC能更有效/特异地扩增CD34+造血干细胞群。目的探讨不同培养体系对造血干细胞的体外扩增及其表型的改变。方法新鲜分离人脐带血单个核细胞(MNC),免疫磁珠法分选CD34+造血干细胞(HSC),计数富集得到的CD34+细胞,平均分为3组,每组含CD34+细胞2.2×105:A组(HSC+CK)CD34+细胞接种于StemlineTMⅡ无血清培养基中,加入早期作用因子FST组合(SCF、FL和TPO,质量浓度50ng/ml的SCF、质量浓度100ng/ml的TPO和FL),并于接种0d添加质量浓度20ng/mlIL-3;B组(HSC+MSC)CD34+细胞接种于含MSCfeeder的培养瓶,加入StemlineTMⅡ无血清培养基;C组(HSC+MSC+CK)CD34+细胞接种于含MSCfeeder的培养瓶,加入StemlineTMⅡ无血清培养基,加入早期作用因子FST组合首剂添加IL-3(剂量同A组)。在培养后4、7、10、14d计数有核细胞总数,流式细胞术检测扩增细胞免疫表型的改变。结果0～14d培养后MNC细胞扩增数C组(HSC+MSC+CK)>A组(HSC+CK)>B组(HSC+MSC),P<0.01。3组间CD34+细胞比例B组(HSC+MSC)>C组(HSC+MSC+CK)>A组(HSC+CK),P<0.01。CD34+细胞绝对数也出现了明显增加,其中C组(HSC+MSC+CK)增加最为明显,其次是A组(HSC+CK)。其中A组(HSC+CK)培养4d较0d(14.68%)CD34+CD38-细胞有明显增加(62.71%,P<0.05),C组(HSC+MSC+CK)CD34+CD38-细胞也略有增加(23.99%);培养7d时,A组(HSC+CK)、C组(HSC+MSC+CK)CD34+CD38-细胞数明显下降,分别为4.44%和1.38%,而B组(HSC+MSC)CD34+CD38-细胞上升为18.92%,与0d时比较P<0.05,与A组(HSC+CK)、C组(HSC+MSC+CK)比较P<0.05。结论MSC和细胞因子的联合应用,一方面使得总MNC细胞得到大量扩增,同时还使扩增后细胞保持CD34+免疫表型,培养体系中加入MSC能更有效/特异地扩增CD34+造血干细胞群。
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关键词
脐带血
造血干细胞
体外扩增
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职称材料
华北地区1026例脐带血细胞各参数结果分析
3
作者
林莹
邱辉
+3 位作者
赵英新
武文杰
孟恒星
韩俊领
《生物医学工程与临床》
CAS
2006年第6期383-386,共4页
目的确定华北地区脐带血血细胞和造血祖细胞参数及其相关性。方法采集1026例符合标准的脐带血标本,分别用全自动五分类血细胞计数仪进行脐带血细胞分类计数,流式细胞术和半固体培养进行造血干/祖细胞特性检测。结果脐带血中RBC穴4.06...
目的确定华北地区脐带血血细胞和造血祖细胞参数及其相关性。方法采集1026例符合标准的脐带血标本,分别用全自动五分类血细胞计数仪进行脐带血细胞分类计数,流式细胞术和半固体培养进行造血干/祖细胞特性检测。结果脐带血中RBC穴4.06±0.47雪×1012/L,HGB穴149.0±18.2雪g/L,Plt穴241.2±53.7雪×109/L,WBC穴13.6±4.6雪×109/L,NEUT穴5.16±3.2雪×109/L,LYMP穴4.53±1.97雪×109/L,MONO穴0.78±0.36雪×109/L,NRBC穴0.45±0.45雪×109/L,RET穴0.14±0.04雪×1012/L。CD34阳性率0.36%±0.22%,CFU-GM和BFU-E产率(/5×104)分别为23.2±11.4和31.1±17.2。结论脐带血由独特的细胞组成,其血细胞各项参数多高于成人静脉血,其造血细胞具有更强的增殖潜力。
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关键词
脐带血
有核细胞
脐带血干/祖细胞
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职称材料
低氧对人脐带间充质干细胞生物学特性及增殖的影响
被引量：
3
4
作者
宋希拿
孟恒星
+3 位作者
张宇光
武文杰
李茜
韩俊领
《生物医学工程与临床》
CAS
2014年第2期106-112,共7页
目的探讨低氧培养条件对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的生长和增殖的影响。方法采用人脐带酶消化法分离培养hUC-MSCs,分别将细胞置入体积分数20%、10%、3%O2条件下培养,通过细胞成脂、成骨分化诱导及流式细胞仪检测其表面标志物,鉴定hU...
目的探讨低氧培养条件对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的生长和增殖的影响。方法采用人脐带酶消化法分离培养hUC-MSCs,分别将细胞置入体积分数20%、10%、3%O2条件下培养,通过细胞成脂、成骨分化诱导及流式细胞仪检测其表面标志物,鉴定hUC-MSCs;绘制细胞生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果低氧条件培养hUC-MSCs具有成脂、成骨等多项分化的潜能;流式细胞仪检测呈CD105、CD73、CD90、CD44、HLA-ABC高表达,CD106、CD29、CD45、CD34、HLA-DR低表达;体积分数3%O2培养组与正常体积分数20%O2培养组及体积分数10%O2培养组相比(各组倍增时间分别为17.2 h、20.8 h、18.9 h),细胞增殖速度加快(P<0.05);G0/G1期细胞减少(各组G0/G1期细胞数分别为77.11%±3.89%、83.92%±5.59%、80.19%±5.16%),S期细胞增多(S期细胞数分别为15.73%±2.56%、10.91%±1.86%、13.31%±2.31%),增殖指数升高(P<0.05);细胞凋亡率降低(流式细胞仪检测各组凋亡率分别为13.41%±1.39%、20.83%±1.81%、19.11%±2.44%)(P<0.05)。结论体积分数3%O2持续培养可促进hUCMSCs的增殖,减少细胞凋亡。
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关键词
人脐带间充质干细胞
低氧
细胞增殖
细胞凋亡
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职称材料
乙醛脱氢酶在检测脐带血造血干/祖细胞中的应用
被引量：
2
5
作者
李莉
赵英新
+4 位作者
孟恒星
刘兰婷
何祎
李茜
韩俊领
《生物医学工程与临床》
CAS
2009年第4期324-327,共4页
目的通过比较乙醛脱氢酶(ALDH)与CD34、CD133及粒单核细胞集落形成单位(CFU-GM)在脐带血中含量的差异,探讨ALDH作为脐带血造血干/祖细胞(HSPC)检测指标的有用性。方法采集新鲜脐带血标本28份,用荧光底物法标记ALDH,流式细胞仪检测脐带...
目的通过比较乙醛脱氢酶(ALDH)与CD34、CD133及粒单核细胞集落形成单位(CFU-GM)在脐带血中含量的差异,探讨ALDH作为脐带血造血干/祖细胞(HSPC)检测指标的有用性。方法采集新鲜脐带血标本28份,用荧光底物法标记ALDH,流式细胞仪检测脐带血中低侧向角高表达ALDH活性(SSCloALDHbr)细胞、CD34+和CD133+含量,并进行CFU-GM的培养。结果脐带血SSCloALDHbr细胞表达率在ALDH反应后直接上机检测组(ALDH组)及在ALDH反应后进一步标记抗体再检测组(ALDH+抗体组)分别为(0.32±0.16)%和(0.30±0.17)%,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。脐带血CD34+表达率在抗体组和ALDH+抗体组分别为(0.40±0.26)%和(0.36±0.19)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);脐带血CD133+表达率在抗体组和ALDH+抗体组分别为(0.18±0.16)%和(0.17±0.10)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。脐带血SSCloALDHbr细胞表达率和CD34+表达率、CD133+表达率及CFU-GM产率均呈正相关(r分别为0.87、0.69和0.54,P均<0.01)。结论ALDH反应后进一步标记抗体不影响脐带血SSCloALDHbr细胞的检测结果,ALDH反应亦不影响进一步标记抗体的检测结果;脐带血SSCloALDHbr细胞表达率和CD34+表达率、CD133+表达率及CFU-GM产率均呈正相关;ALDH活性检测可以作为检测脐带血HSPC的一个有用指标。
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关键词
脐带血
干/祖细胞
SSC^loALDH^br细胞
CD34^+
CD133^+
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职称材料
组织块法分离人脐带间充质干细胞的研究
被引量：
7
6
作者
李铎
石钏
+3 位作者
洪敬欣
孟恒星
韩俊领
张宇光
《中国医药导报》
CAS
2011年第24期19-22,共4页
目的:应用组织块法分离人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)并对其生物学特性进行研究。同时探讨在不同储存条件下的脐带是否对组织块法的分离成功率产生影响。方法:无菌条件下采集足月儿的脐带,应用组织块法分离hUC-MSCs,通过流式细胞术观察...
目的:应用组织块法分离人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)并对其生物学特性进行研究。同时探讨在不同储存条件下的脐带是否对组织块法的分离成功率产生影响。方法:无菌条件下采集足月儿的脐带,应用组织块法分离hUC-MSCs,通过流式细胞术观察其免疫学、生长特性。脐带在常温条件和冷冻条件下储存后进行组织块法分离,观察细胞生长情况。结果:应用组织块法能获得贴壁生长的hUC-MSCs,流式细胞仪分析结果显示细胞高表达常见MSC表面分子CD105、CD73及HLA-ABC;低表达造血细胞表面标记CD34、CD45及HLA-DR。常温储存条件下,随着处理时间的延长,获得原代细胞数量下降;组织冷冻后可以获得hUC-MSCs。结论:组织块分离法可以获得贴壁生长的hUC-MSCs,并成功传代扩增;脐带采集后24 h内处理,hUC-MSCs获得数量及分离成功率高;随着处理时间延长,hUC-MSCs获得数量减少,分离成功率降低。
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关键词
人脐带间充质干细胞
组织块分离法
生物学鉴定
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职称材料
复合多肽制剂对肉鸡免疫功能的影响
7
作者
李程
田向学
+7 位作者
李秀丽
邱大勇
任卫科
赵阳
李富强
高旭盟
董志民
孟恒星
《动物医学进展》
北大核心
2022年第12期50-55,共6页
旨在探索复合多肽制剂对于肉鸡免疫功能的影响。选取1日龄肉鸡120羽,随机分为4组(每组3个重复),于6日龄和13日龄,分别采用喷雾的方式添加0.05 mL/只(低剂量)、0.1 mL/只(中剂量)、0.15 mL/只(高剂量)的复合多肽制剂,空白对照采用生理盐...
旨在探索复合多肽制剂对于肉鸡免疫功能的影响。选取1日龄肉鸡120羽,随机分为4组(每组3个重复),于6日龄和13日龄,分别采用喷雾的方式添加0.05 mL/只(低剂量)、0.1 mL/只(中剂量)、0.15 mL/只(高剂量)的复合多肽制剂,空白对照采用生理盐水喷雾。于7、14、21、28、35、42日龄用HA/HI方法检测肉鸡新城疫病毒(NDV)抗体滴度。21、42日龄测定肉鸡免疫器官指数。采用ELISA测定7、14、21日龄肉鸡血清中细胞因子含量。复合多肽制剂能显著提高肉鸡新城疫病毒抗体水平(P<0.05),其中14日龄低剂量组和21、28日龄低剂量组和中剂量组新城疫病毒抗体滴度显著升高(P<0.05),但其对肉鸡免疫器官指数无显著影响(P>0.05)。复合多肽制剂能影响肉鸡血清细胞因子的表达水平,7日龄各试验组肉鸡血清中IL-4含量显著升高且与给药剂量正相关(P<0.05),7、14日龄试验鸡血清中IL-6含量显著降低(P<0.05),14、21日龄各剂量组IL-10含量显著下降(P<0.01)。结果表明,复合多肽制剂对肉鸡的免疫功能均具有一定的调节作用,低剂量复合多肽制剂上调新城疫病毒抗体水平效果最好。
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关键词
复合多肽
喷雾
免疫调节
肉鸡
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职称材料
题名
体外人脐静脉内皮细胞的培养鉴定及抗原表达分析
被引量：
8
1
作者
刘长乐
郑心田
李广平
孟恒星
邱录贵
机构
天津医科大学第二医院
中国协和医科大学血液病学研究所
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2011年第36期25-26,共2页
基金
天津市科技发展计划基金资助项目(0438031111)
文摘
目的探讨体外分离、培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的方法及进行HUVECs的扩增和鉴定,明确HUVECs表面抗原表达情况。方法采集正常人脐带,应用改良的酶消化法进行HUVECs的分离培养;通过细胞形态学观察及免疫荧光化学鉴定HUVECs,应用细胞荧光化学进行内皮细胞(ECs)功能检测;应用流式细胞仪分析内皮细胞的特异性抗原表达。结果观察细胞形态呈铺路石样,Ⅷ因子相关抗原荧光染色阳性,显示出摄取乙酰化低密度脂蛋白、结合荆豆凝集素等ECs的功能特性;流式细胞仪检测CD31、VWF、KDR、CD34抗原表达阳性百分比高,而CD133处于低水平。结论通过本实验改良的分离培养方法,可以在体外获得较高数量的HUVECs,在细胞形态、表面抗原标志、细胞功能等方面具有ECs特征,可以用于血管ECs模型的构建。
关键词
脐静脉内皮细胞
流式细胞术
抗原表达
Keywords
human umbilical vein endothelial cells
flow cytometry
antigen express
分类号
R543 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
不同培养体系对脐带血造血干细胞扩增的影响
被引量：
1
2
作者
郝牧
邱录贵
吴瞳
李斯丹
孟恒星
机构
中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所
出处
《生物医学工程与临床》
CAS
2008年第4期295-298,共4页
基金
天津市科技发展计划项目(06YFSYSF01900)
文摘
目的探讨不同培养体系对造血干细胞的体外扩增及其表型的改变。方法新鲜分离人脐带血单个核细胞(MNC),免疫磁珠法分选CD34+造血干细胞(HSC),计数富集得到的CD34+细胞,平均分为3组,每组含CD34+细胞2.2×105:A组(HSC+CK)CD34+细胞接种于StemlineTMⅡ无血清培养基中,加入早期作用因子FST组合(SCF、FL和TPO,质量浓度50ng/ml的SCF、质量浓度100ng/ml的TPO和FL),并于接种0d添加质量浓度20ng/mlIL-3;B组(HSC+MSC)CD34+细胞接种于含MSCfeeder的培养瓶,加入StemlineTMⅡ无血清培养基;C组(HSC+MSC+CK)CD34+细胞接种于含MSCfeeder的培养瓶,加入StemlineTMⅡ无血清培养基,加入早期作用因子FST组合首剂添加IL-3(剂量同A组)。在培养后4、7、10、14d计数有核细胞总数,流式细胞术检测扩增细胞免疫表型的改变。结果0～14d培养后MNC细胞扩增数C组(HSC+MSC+CK)>A组(HSC+CK)>B组(HSC+MSC),P<0.01。3组间CD34+细胞比例B组(HSC+MSC)>C组(HSC+MSC+CK)>A组(HSC+CK),P<0.01。CD34+细胞绝对数也出现了明显增加,其中C组(HSC+MSC+CK)增加最为明显,其次是A组(HSC+CK)。其中A组(HSC+CK)培养4d较0d(14.68%)CD34+CD38-细胞有明显增加(62.71%,P<0.05),C组(HSC+MSC+CK)CD34+CD38-细胞也略有增加(23.99%);培养7d时,A组(HSC+CK)、C组(HSC+MSC+CK)CD34+CD38-细胞数明显下降,分别为4.44%和1.38%,而B组(HSC+MSC)CD34+CD38-细胞上升为18.92%,与0d时比较P<0.05,与A组(HSC+CK)、C组(HSC+MSC+CK)比较P<0.05。结论MSC和细胞因子的联合应用,一方面使得总MNC细胞得到大量扩增,同时还使扩增后细胞保持CD34+免疫表型,培养体系中加入MSC能更有效/特异地扩增CD34+造血干细胞群。目的探讨不同培养体系对造血干细胞的体外扩增及其表型的改变。方法新鲜分离人脐带血单个核细胞(MNC),免疫磁珠法分选CD34+造血干细胞(HSC),计数富集得到的CD34+细胞,平均分为3组,每组含CD34+细胞2.2×105:A组(HSC+CK)CD34+细胞接种于StemlineTMⅡ无血清培养基中,加入早期作用因子FST组合(SCF、FL和TPO,质量浓度50ng/ml的SCF、质量浓度100ng/ml的TPO和FL),并于接种0d添加质量浓度20ng/mlIL-3;B组(HSC+MSC)CD34+细胞接种于含MSCfeeder的培养瓶,加入StemlineTMⅡ无血清培养基;C组(HSC+MSC+CK)CD34+细胞接种于含MSCfeeder的培养瓶,加入StemlineTMⅡ无血清培养基,加入早期作用因子FST组合首剂添加IL-3(剂量同A组)。在培养后4、7、10、14d计数有核细胞总数,流式细胞术检测扩增细胞免疫表型的改变。结果0～14d培养后MNC细胞扩增数C组(HSC+MSC+CK)>A组(HSC+CK)>B组(HSC+MSC),P<0.01。3组间CD34+细胞比例B组(HSC+MSC)>C组(HSC+MSC+CK)>A组(HSC+CK),P<0.01。CD34+细胞绝对数也出现了明显增加,其中C组(HSC+MSC+CK)增加最为明显,其次是A组(HSC+CK)。其中A组(HSC+CK)培养4d较0d(14.68%)CD34+CD38-细胞有明显增加(62.71%,P<0.05),C组(HSC+MSC+CK)CD34+CD38-细胞也略有增加(23.99%);培养7d时,A组(HSC+CK)、C组(HSC+MSC+CK)CD34+CD38-细胞数明显下降,分别为4.44%和1.38%,而B组(HSC+MSC)CD34+CD38-细胞上升为18.92%,与0d时比较P<0.05,与A组(HSC+CK)、C组(HSC+MSC+CK)比较P<0.05。结论MSC和细胞因子的联合应用,一方面使得总MNC细胞得到大量扩增,同时还使扩增后细胞保持CD34+免疫表型,培养体系中加入MSC能更有效/特异地扩增CD34+造血干细胞群。
关键词
脐带血
造血干细胞
体外扩增
Keywords
umbilical cord blood
CD34^＋ cell
ex-vivo expansion
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
华北地区1026例脐带血细胞各参数结果分析
3
作者
林莹
邱辉
赵英新
武文杰
孟恒星
韩俊领
机构
天津市脐带血造血干细胞库
中国医学科学院
出处
《生物医学工程与临床》
CAS
2006年第6期383-386,共4页
文摘
目的确定华北地区脐带血血细胞和造血祖细胞参数及其相关性。方法采集1026例符合标准的脐带血标本,分别用全自动五分类血细胞计数仪进行脐带血细胞分类计数,流式细胞术和半固体培养进行造血干/祖细胞特性检测。结果脐带血中RBC穴4.06±0.47雪×1012/L,HGB穴149.0±18.2雪g/L,Plt穴241.2±53.7雪×109/L,WBC穴13.6±4.6雪×109/L,NEUT穴5.16±3.2雪×109/L,LYMP穴4.53±1.97雪×109/L,MONO穴0.78±0.36雪×109/L,NRBC穴0.45±0.45雪×109/L,RET穴0.14±0.04雪×1012/L。CD34阳性率0.36%±0.22%,CFU-GM和BFU-E产率(/5×104)分别为23.2±11.4和31.1±17.2。结论脐带血由独特的细胞组成,其血细胞各项参数多高于成人静脉血,其造血细胞具有更强的增殖潜力。
关键词
脐带血
有核细胞
脐带血干/祖细胞
Keywords
umbilical cord blood unit
nuclear cells
hematopoietic stem/progenitor cells
分类号
R446.1 [医药卫生—诊断学]
在线阅读
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职称材料
题名
低氧对人脐带间充质干细胞生物学特性及增殖的影响
被引量：
3
4
作者
宋希拿
孟恒星
张宇光
武文杰
李茜
韩俊领
机构
中国医学科学院.北京协和医学院血液病医院.血液学研究所
协和干细胞基因工程有限公司天津市脐带血造血干细胞库
出处
《生物医学工程与临床》
CAS
2014年第2期106-112,共7页
文摘
目的探讨低氧培养条件对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的生长和增殖的影响。方法采用人脐带酶消化法分离培养hUC-MSCs,分别将细胞置入体积分数20%、10%、3%O2条件下培养,通过细胞成脂、成骨分化诱导及流式细胞仪检测其表面标志物,鉴定hUC-MSCs;绘制细胞生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果低氧条件培养hUC-MSCs具有成脂、成骨等多项分化的潜能;流式细胞仪检测呈CD105、CD73、CD90、CD44、HLA-ABC高表达,CD106、CD29、CD45、CD34、HLA-DR低表达;体积分数3%O2培养组与正常体积分数20%O2培养组及体积分数10%O2培养组相比(各组倍增时间分别为17.2 h、20.8 h、18.9 h),细胞增殖速度加快(P<0.05);G0/G1期细胞减少(各组G0/G1期细胞数分别为77.11%±3.89%、83.92%±5.59%、80.19%±5.16%),S期细胞增多(S期细胞数分别为15.73%±2.56%、10.91%±1.86%、13.31%±2.31%),增殖指数升高(P<0.05);细胞凋亡率降低(流式细胞仪检测各组凋亡率分别为13.41%±1.39%、20.83%±1.81%、19.11%±2.44%)(P<0.05)。结论体积分数3%O2持续培养可促进hUCMSCs的增殖,减少细胞凋亡。
关键词
人脐带间充质干细胞
低氧
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
human umbilical cord mesenchymal stem cells
hypoxia
cell proliferation
cell apoptosis
分类号
R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
乙醛脱氢酶在检测脐带血造血干/祖细胞中的应用
被引量：
2
5
作者
李莉
赵英新
孟恒星
刘兰婷
何祎
李茜
韩俊领
机构
协和干细胞基因工程有限公司
中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院
出处
《生物医学工程与临床》
CAS
2009年第4期324-327,共4页
文摘
目的通过比较乙醛脱氢酶(ALDH)与CD34、CD133及粒单核细胞集落形成单位(CFU-GM)在脐带血中含量的差异,探讨ALDH作为脐带血造血干/祖细胞(HSPC)检测指标的有用性。方法采集新鲜脐带血标本28份,用荧光底物法标记ALDH,流式细胞仪检测脐带血中低侧向角高表达ALDH活性(SSCloALDHbr)细胞、CD34+和CD133+含量,并进行CFU-GM的培养。结果脐带血SSCloALDHbr细胞表达率在ALDH反应后直接上机检测组(ALDH组)及在ALDH反应后进一步标记抗体再检测组(ALDH+抗体组)分别为(0.32±0.16)%和(0.30±0.17)%,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。脐带血CD34+表达率在抗体组和ALDH+抗体组分别为(0.40±0.26)%和(0.36±0.19)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);脐带血CD133+表达率在抗体组和ALDH+抗体组分别为(0.18±0.16)%和(0.17±0.10)%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。脐带血SSCloALDHbr细胞表达率和CD34+表达率、CD133+表达率及CFU-GM产率均呈正相关(r分别为0.87、0.69和0.54,P均<0.01)。结论ALDH反应后进一步标记抗体不影响脐带血SSCloALDHbr细胞的检测结果,ALDH反应亦不影响进一步标记抗体的检测结果;脐带血SSCloALDHbr细胞表达率和CD34+表达率、CD133+表达率及CFU-GM产率均呈正相关;ALDH活性检测可以作为检测脐带血HSPC的一个有用指标。
关键词
脐带血
干/祖细胞
SSC^loALDH^br细胞
CD34^+
CD133^+
Keywords
cord blood
stem/progenitor cells
SSC^loALDH^br cells
CD34^＋
CD133^＋
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
组织块法分离人脐带间充质干细胞的研究
被引量：
7
6
作者
李铎
石钏
洪敬欣
孟恒星
韩俊领
张宇光
机构
中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所
协和干细胞基因工程有限公司
出处
《中国医药导报》
CAS
2011年第24期19-22,共4页
文摘
目的:应用组织块法分离人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)并对其生物学特性进行研究。同时探讨在不同储存条件下的脐带是否对组织块法的分离成功率产生影响。方法:无菌条件下采集足月儿的脐带,应用组织块法分离hUC-MSCs,通过流式细胞术观察其免疫学、生长特性。脐带在常温条件和冷冻条件下储存后进行组织块法分离,观察细胞生长情况。结果:应用组织块法能获得贴壁生长的hUC-MSCs,流式细胞仪分析结果显示细胞高表达常见MSC表面分子CD105、CD73及HLA-ABC;低表达造血细胞表面标记CD34、CD45及HLA-DR。常温储存条件下,随着处理时间的延长,获得原代细胞数量下降;组织冷冻后可以获得hUC-MSCs。结论:组织块分离法可以获得贴壁生长的hUC-MSCs,并成功传代扩增;脐带采集后24 h内处理,hUC-MSCs获得数量及分离成功率高;随着处理时间延长,hUC-MSCs获得数量减少,分离成功率降低。
关键词
人脐带间充质干细胞
组织块分离法
生物学鉴定
Keywords
Human umbilical cord mesenchymal stem cells
Tissue isolation
Bioloy identification
分类号
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
复合多肽制剂对肉鸡免疫功能的影响
7
作者
李程
田向学
李秀丽
邱大勇
任卫科
赵阳
李富强
高旭盟
董志民
孟恒星
机构
天津市农业科学院畜牧兽医研究所
农业农村部兽用药物与诊断技术天津科学观测实验站
天津市畜禽健康养殖技术工程中心
天津奥康普尼生物医药科技有限公司
出处
《动物医学进展》
北大核心
2022年第12期50-55,共6页
基金
国家重点研发计划项目(2016YFD0500800)。
文摘
旨在探索复合多肽制剂对于肉鸡免疫功能的影响。选取1日龄肉鸡120羽,随机分为4组(每组3个重复),于6日龄和13日龄,分别采用喷雾的方式添加0.05 mL/只(低剂量)、0.1 mL/只(中剂量)、0.15 mL/只(高剂量)的复合多肽制剂,空白对照采用生理盐水喷雾。于7、14、21、28、35、42日龄用HA/HI方法检测肉鸡新城疫病毒(NDV)抗体滴度。21、42日龄测定肉鸡免疫器官指数。采用ELISA测定7、14、21日龄肉鸡血清中细胞因子含量。复合多肽制剂能显著提高肉鸡新城疫病毒抗体水平(P<0.05),其中14日龄低剂量组和21、28日龄低剂量组和中剂量组新城疫病毒抗体滴度显著升高(P<0.05),但其对肉鸡免疫器官指数无显著影响(P>0.05)。复合多肽制剂能影响肉鸡血清细胞因子的表达水平,7日龄各试验组肉鸡血清中IL-4含量显著升高且与给药剂量正相关(P<0.05),7、14日龄试验鸡血清中IL-6含量显著降低(P<0.05),14、21日龄各剂量组IL-10含量显著下降(P<0.01)。结果表明,复合多肽制剂对肉鸡的免疫功能均具有一定的调节作用,低剂量复合多肽制剂上调新城疫病毒抗体水平效果最好。
关键词
复合多肽
喷雾
免疫调节
肉鸡
Keywords
compound polypeptide
spray
immune regulation
broiler
分类号
S859.799.9 [农业科学—临床兽医学]
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
体外人脐静脉内皮细胞的培养鉴定及抗原表达分析
刘长乐
郑心田
李广平
孟恒星
邱录贵
《山东医药》
CAS
北大核心
2011
8
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职称材料
2
不同培养体系对脐带血造血干细胞扩增的影响
郝牧
邱录贵
吴瞳
李斯丹
孟恒星
《生物医学工程与临床》
CAS
2008
1
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职称材料
3
华北地区1026例脐带血细胞各参数结果分析
林莹
邱辉
赵英新
武文杰
孟恒星
韩俊领
《生物医学工程与临床》
CAS
2006
0
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职称材料
4
低氧对人脐带间充质干细胞生物学特性及增殖的影响
宋希拿
孟恒星
张宇光
武文杰
李茜
韩俊领
《生物医学工程与临床》
CAS
2014
3
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职称材料
5
乙醛脱氢酶在检测脐带血造血干/祖细胞中的应用
李莉
赵英新
孟恒星
刘兰婷
何祎
李茜
韩俊领
《生物医学工程与临床》
CAS
2009
2
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职称材料
6
组织块法分离人脐带间充质干细胞的研究
李铎
石钏
洪敬欣
孟恒星
韩俊领
张宇光
《中国医药导报》
CAS
2011
7
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职称材料
7
复合多肽制剂对肉鸡免疫功能的影响
李程
田向学
李秀丽
邱大勇
任卫科
赵阳
李富强
高旭盟
董志民
孟恒星
《动物医学进展》
北大核心
2022
0
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职称材料
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