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猪传染性胃肠炎病毒Nsp2与宿主细胞蛋白PSMD11相互作用的研究
1
作者
孙傲颖
王亚楠
+7 位作者
姜艳平
崔文
乔薪瑗
周晗
唐丽杰
徐义刚
李一经
王丽
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021年第7期2569-2576,共8页
为确定猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)非结构蛋白2(nonstructural protein 2,Nsp2)与宿主细胞蛋白26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)之间是否存在相互作用,本研究利用RT-PCR方法扩增猪源PSMD11基因...
为确定猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)非结构蛋白2(nonstructural protein 2,Nsp2)与宿主细胞蛋白26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)之间是否存在相互作用,本研究利用RT-PCR方法扩增猪源PSMD11基因,并构建其真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11,经测序和双酶切验证正确后,转染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),通过Western blotting和间接免疫荧光试验(IFA)检测真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11是否能在IPEC-J2中表达。利用免疫共沉淀(Co-IP)试验检测TGEV Nsp2和宿主细胞PSMD11蛋白之间的相互作用,并通过激光共聚焦显微镜观察TGEV Nsp2与PSMD11在宿主细胞中的共定位情况。结果显示,本研究成功扩增了猪源PSMD11基因,大小约为1474 bp,基因序列经测序比对与标准序列完全一致。构建的真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11能在IPEC-J2细胞中成功表达PSMD11蛋白;Co-IP结果表明,PSMD11与Nsp2之间存在相互作用;共定位试验结果显示,PSMD11与Nsp2的相互作用发生在细胞质中,且细胞中PSMD11蛋白的表达位置并未因Nsp2的表达而发生改变。本研究结果为进一步研究TGEV Nsp2在病毒感染过程中所发挥的重要作用提供新的线索。
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关键词
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)
非结构蛋白2
26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11
蛋白互作
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职称材料
题名
猪传染性胃肠炎病毒Nsp2与宿主细胞蛋白PSMD11相互作用的研究
1
作者
孙傲颖
王亚楠
姜艳平
崔文
乔薪瑗
周晗
唐丽杰
徐义刚
李一经
王丽
机构
东北农业大学动物医学学院
黑龙江省动物疾病防控技术与制剂创制实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021年第7期2569-2576,共8页
基金
黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划(UNPYSCT-2018147)。
文摘
为确定猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)非结构蛋白2(nonstructural protein 2,Nsp2)与宿主细胞蛋白26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11(PSMD11)之间是否存在相互作用,本研究利用RT-PCR方法扩增猪源PSMD11基因,并构建其真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11,经测序和双酶切验证正确后,转染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),通过Western blotting和间接免疫荧光试验(IFA)检测真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11是否能在IPEC-J2中表达。利用免疫共沉淀(Co-IP)试验检测TGEV Nsp2和宿主细胞PSMD11蛋白之间的相互作用,并通过激光共聚焦显微镜观察TGEV Nsp2与PSMD11在宿主细胞中的共定位情况。结果显示,本研究成功扩增了猪源PSMD11基因,大小约为1474 bp,基因序列经测序比对与标准序列完全一致。构建的真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11能在IPEC-J2细胞中成功表达PSMD11蛋白;Co-IP结果表明,PSMD11与Nsp2之间存在相互作用;共定位试验结果显示,PSMD11与Nsp2的相互作用发生在细胞质中,且细胞中PSMD11蛋白的表达位置并未因Nsp2的表达而发生改变。本研究结果为进一步研究TGEV Nsp2在病毒感染过程中所发挥的重要作用提供新的线索。
关键词
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)
非结构蛋白2
26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11
蛋白互作
Keywords
Transmissible gastroenteritis virus(TGEV)
Nsp2
PSMD11
protein interaction
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
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1
猪传染性胃肠炎病毒Nsp2与宿主细胞蛋白PSMD11相互作用的研究
孙傲颖
王亚楠
姜艳平
崔文
乔薪瑗
周晗
唐丽杰
徐义刚
李一经
王丽
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021
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