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基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输方法的建立
被引量：
1
1
作者
朱飞艳
赵耀博
+7 位作者
赵红芳
魏太云
程文杰
刘凯
保岳宵
娄亚玲
魏红江
徐凯祥
《器官移植》
北大核心
2025年第2期272-279,共8页
目的 建立基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输的方法。方法 以8基因修饰猪为实验动物,肾脏获取前通过血液学检查猪的健康状况,影像学检查肾脏血管结构。肾脏获取后对猪肾脏进行灌注,将猪肾打包后放入粘贴“器官运输专用”标识的...
目的 建立基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输的方法。方法 以8基因修饰猪为实验动物,肾脏获取前通过血液学检查猪的健康状况,影像学检查肾脏血管结构。肾脏获取后对猪肾脏进行灌注,将猪肾打包后放入粘贴“器官运输专用”标识的低温保存箱中,与运输部门沟通运输流程后跨省运输。采用苏木素-伊红(HE)染色、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)荧光染色和酶联免疫吸附试验(ELISA)评估猪肾病理损伤情况。结果 术前检查8基因修饰猪的血清肌酐73.2μmol/L、血尿素氮2.8 mmol/L、血红蛋白116 g/L,均在正常范围内,提示肾功能正常;CT造影显示猪肾脏无病变,血管无扩张、狭窄或过早分支的情况;从8基因修饰猪获取左、右肾时间共计(125±10)min,出血量为(20±2)mL,热缺血时间分别为3 min和7 min;左、右肾灌注修整时间分别为36 min和41 min,灌注后双肾色白质润;冷保存运输时间为8 h,HE染色结果显示肾脏保存至8 h时部分肾小球发生皱缩,周围肾小管管腔向内轻微凹陷肿胀并有部分内膜脱落,有微小空泡形成;肾脏组织中半胱氨酸天冬氨酸酶3信使RNA水平在冷保存2 h后随时间延长逐渐升高(P<0.05);TUNEL荧光染色显示冷保存至8 h仅有少量细胞凋亡,这与0 h相比无差异(P>0.05)。ELISA结果显示保存液乳酸脱氢酶(LDH)和肌酐含量保持相对稳定,但肾损伤分子1(KIM-1)含量随保存时间延长逐渐升高,提示猪肾脏有轻微损伤。结论 通过建立基因修饰供体猪的肾脏获取、灌注、保存和运输方法,可有效可靠地将基因修饰猪肾脏用于异种肾脏移植。
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关键词
肾脏
异种移植
基因修饰猪
获取
灌注
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运输
半胱氨酸天冬氨酸酶3
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职称材料
多西环素长期高剂量诱导对滇南小耳猪肝肾功能的影响
2
作者
娄亚楠
熊晶晶
+7 位作者
娄亚玲
王福斌
程文杰
陈晓晶
李加宇
普少瑕
魏红江
赵红业
《生物技术通报》
北大核心
2025年第4期345-354,共10页
【目的】探究Tet-On系统中多西环素(doxycycline,Dox)持续高剂量摄入对实验猪健康状态的影响。【方法】选用9只6月龄滇南小耳猪作为模型动物,分别设置3倍(30 mg/kg)和5倍(50 mg/kg)推荐剂量组及空白对照组。各组实验猪均肌肉注射相应药...
【目的】探究Tet-On系统中多西环素(doxycycline,Dox)持续高剂量摄入对实验猪健康状态的影响。【方法】选用9只6月龄滇南小耳猪作为模型动物,分别设置3倍(30 mg/kg)和5倍(50 mg/kg)推荐剂量组及空白对照组。各组实验猪均肌肉注射相应药物或生理盐水,持续30 d,分别采集第0、10、20、28天的血液进行血常规及肝肾功能指标测定,末次给药后2 h采集实验猪肝、肾进行形态学观察、病理学检测及疾病检测。【结果】与对照组相比,30 mg/kg剂量组Lym#、MPV下降,而PLT上升;50 mg/kg剂量组中这些指标的变化更为显著,且RDW-SD显著降低,同时ALT、MG、P等指标升高,NA、CO_(2)、CYSC等指标下降,显示出较为明显的肝肾功能损伤。组织病理学检查结果显示30 mg/kg和50 mg/kg剂量组实验猪的肝脏和肾脏均出现不同程度的病变,且50 mg/kg剂量组的肝脏炎性细胞和红细胞浸润更为严重,肾脏则显示出更明显的萎缩和组织结构损伤。病原感染检测结果排除病毒感染对实验结果的干扰。【结论】高剂量Dox长期使用会对实验猪的肝肾功能造成显著损伤,且损伤程度与Dox的剂量呈正相关,为大型基因编辑动物的条件性诱导表达相关研究提供参考。
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关键词
盐酸多西环素
Tet-On系统
滇南小耳猪
肝肾损伤
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职称材料
题名
基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输方法的建立
被引量：
1
1
作者
朱飞艳
赵耀博
赵红芳
魏太云
程文杰
刘凯
保岳宵
娄亚玲
魏红江
徐凯祥
机构
云南农业大学动物科学技术学院
云南农业大学动物医学院
文山州动物疫病预防控制中心
出处
《器官移植》
北大核心
2025年第2期272-279,共8页
基金
云南省重大科技专项(202102AA310047)
国家重点研发计划(2019YFA0110700)。
文摘
目的 建立基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输的方法。方法 以8基因修饰猪为实验动物,肾脏获取前通过血液学检查猪的健康状况,影像学检查肾脏血管结构。肾脏获取后对猪肾脏进行灌注,将猪肾打包后放入粘贴“器官运输专用”标识的低温保存箱中,与运输部门沟通运输流程后跨省运输。采用苏木素-伊红(HE)染色、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)荧光染色和酶联免疫吸附试验(ELISA)评估猪肾病理损伤情况。结果 术前检查8基因修饰猪的血清肌酐73.2μmol/L、血尿素氮2.8 mmol/L、血红蛋白116 g/L,均在正常范围内,提示肾功能正常;CT造影显示猪肾脏无病变,血管无扩张、狭窄或过早分支的情况;从8基因修饰猪获取左、右肾时间共计(125±10)min,出血量为(20±2)mL,热缺血时间分别为3 min和7 min;左、右肾灌注修整时间分别为36 min和41 min,灌注后双肾色白质润;冷保存运输时间为8 h,HE染色结果显示肾脏保存至8 h时部分肾小球发生皱缩,周围肾小管管腔向内轻微凹陷肿胀并有部分内膜脱落,有微小空泡形成;肾脏组织中半胱氨酸天冬氨酸酶3信使RNA水平在冷保存2 h后随时间延长逐渐升高(P<0.05);TUNEL荧光染色显示冷保存至8 h仅有少量细胞凋亡,这与0 h相比无差异(P>0.05)。ELISA结果显示保存液乳酸脱氢酶(LDH)和肌酐含量保持相对稳定,但肾损伤分子1(KIM-1)含量随保存时间延长逐渐升高,提示猪肾脏有轻微损伤。结论 通过建立基因修饰供体猪的肾脏获取、灌注、保存和运输方法,可有效可靠地将基因修饰猪肾脏用于异种肾脏移植。
关键词
肾脏
异种移植
基因修饰猪
获取
灌注
保存
运输
半胱氨酸天冬氨酸酶3
Keywords
Kidney
Xenotransplantation
Genetically modified pig
Acquisition
Perfusion
Preservation
Transportation
Cysteinyl aspartate-specific proteinase-3
分类号
R617 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
多西环素长期高剂量诱导对滇南小耳猪肝肾功能的影响
2
作者
娄亚楠
熊晶晶
娄亚玲
王福斌
程文杰
陈晓晶
李加宇
普少瑕
魏红江
赵红业
机构
云南农业大学、云南省小型猪基因编辑与异种器官移植重点实验室
云南农业大学动物医学院
云南农业大学动物科学技术学院
云南农业大学食品科学技术学院
出处
《生物技术通报》
北大核心
2025年第4期345-354,共10页
基金
云南省重大科技专项计划(202102AA100054,202102AA310047)。
文摘
【目的】探究Tet-On系统中多西环素(doxycycline,Dox)持续高剂量摄入对实验猪健康状态的影响。【方法】选用9只6月龄滇南小耳猪作为模型动物,分别设置3倍(30 mg/kg)和5倍(50 mg/kg)推荐剂量组及空白对照组。各组实验猪均肌肉注射相应药物或生理盐水,持续30 d,分别采集第0、10、20、28天的血液进行血常规及肝肾功能指标测定,末次给药后2 h采集实验猪肝、肾进行形态学观察、病理学检测及疾病检测。【结果】与对照组相比,30 mg/kg剂量组Lym#、MPV下降,而PLT上升;50 mg/kg剂量组中这些指标的变化更为显著,且RDW-SD显著降低,同时ALT、MG、P等指标升高,NA、CO_(2)、CYSC等指标下降,显示出较为明显的肝肾功能损伤。组织病理学检查结果显示30 mg/kg和50 mg/kg剂量组实验猪的肝脏和肾脏均出现不同程度的病变,且50 mg/kg剂量组的肝脏炎性细胞和红细胞浸润更为严重,肾脏则显示出更明显的萎缩和组织结构损伤。病原感染检测结果排除病毒感染对实验结果的干扰。【结论】高剂量Dox长期使用会对实验猪的肝肾功能造成显著损伤,且损伤程度与Dox的剂量呈正相关,为大型基因编辑动物的条件性诱导表达相关研究提供参考。
关键词
盐酸多西环素
Tet-On系统
滇南小耳猪
肝肾损伤
Keywords
doxycycline hydrochloride
Tet-On system
Diannan miniature pigs
liver and kidney injury
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基因修饰供体猪肾脏获取、灌注、保存和运输方法的建立
朱飞艳
赵耀博
赵红芳
魏太云
程文杰
刘凯
保岳宵
娄亚玲
魏红江
徐凯祥
《器官移植》
北大核心
2025
1
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职称材料
2
多西环素长期高剂量诱导对滇南小耳猪肝肾功能的影响
娄亚楠
熊晶晶
娄亚玲
王福斌
程文杰
陈晓晶
李加宇
普少瑕
魏红江
赵红业
《生物技术通报》
北大核心
2025
0
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