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可抑制I型胶原表达的siRNA重组腺病毒的构建
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作者 姚咏嫦 周嘉安 陈晓峰 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第12期95-100,共6页
滑膜间质干细胞(SMSCs)与其他来源的间质干细胞相比,具有更强的生长能力和更大的软骨分化潜力.但由于SMSCs固有地表达I型胶原,这将会大大损害再生软骨的整体质量.为解决此问题,文中首先设计了可抑制I型胶原表达的shRNA,并将其构建到腺... 滑膜间质干细胞(SMSCs)与其他来源的间质干细胞相比,具有更强的生长能力和更大的软骨分化潜力.但由于SMSCs固有地表达I型胶原,这将会大大损害再生软骨的整体质量.为解决此问题,文中首先设计了可抑制I型胶原表达的shRNA,并将其构建到腺病毒载体上.接着通过Pac I酶切反应,使重组腺病毒载体线性化并通过脂质体转染293细胞进行病毒包装.收集的病毒初液进行滴度测定后,再次通过293细胞进行病毒扩增,经过纯化后,最终获得高滴度重组腺病毒.将重组腺病毒分别感染成纤维细胞和成骨细胞,通过荧光显微镜观察,检测转染效率,利用实时定量PCR实验验证siRNA的干扰效果.实验结果表明,包装后的重组腺病毒具有高的转染效率,能成功编译siRNA,并具有抑制I型胶原表达的能力. 展开更多
关键词 滑膜间质干细胞 腺病毒 SIRNA I型胶原 载体 转染
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光交联N-丙烯酰氨基葡萄糖/PEGDA水凝胶的制备及表征
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作者 王群芳 任力 +2 位作者 王迎军 姚咏嫦 侯思润 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第7期62-67,共6页
采用紫外光交联技术制备可原位成型的N-丙烯酰氨基葡萄糖(AGA)/聚乙二醇双丙烯酸酯(PEGDA)水凝胶.通过核磁共振氢谱考察凝胶成型过程中AGA/PEGDA体系组成的变化,采用傅里叶变换红外光谱、X射线光电子能谱、扫描电子显微镜等表征了冷冻... 采用紫外光交联技术制备可原位成型的N-丙烯酰氨基葡萄糖(AGA)/聚乙二醇双丙烯酸酯(PEGDA)水凝胶.通过核磁共振氢谱考察凝胶成型过程中AGA/PEGDA体系组成的变化,采用傅里叶变换红外光谱、X射线光电子能谱、扫描电子显微镜等表征了冷冻干燥凝胶的化学组成和表面形貌,同时考察了光引发剂质量浓度、AGA和PEGDA用量对水凝胶溶胀率和交联产率的影响.结果表明:氨基葡萄糖单元被成功引入到PEGDA凝胶网络中;光引发剂质量浓度为0.6 g/L时,AGA/PEGDA体系的交联产率最佳;AGA用量增加会引起体系交联产率下降,而随PEGDA用量增加,体系交联产率呈先下降后升高的趋势;AGA和PEGDA用量的增加都会导致凝胶溶胀率下降,AGA用量的增加还将使凝胶表面出现皱褶. 展开更多
关键词 氨基葡萄糖 聚乙二醇双丙烯酸酯 光交联聚合 原位成型 水凝胶
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