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基于短小芽孢杆菌转录组的强启动子鉴定
1
作者
姚动邦
张康
+1 位作者
朱昫飏
吴敬
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第18期15-22,共8页
短小芽孢杆菌(Brevibacillus choshinensis)是一种潜在的高效表达系统,但由于高效强启动子的缺乏严重限制了该表达系统的应用。该研究的主要目的是为B.choshinensis表达系统提供更多新高效强启动子。在该研究中,首先通过转录组测序技术...
短小芽孢杆菌(Brevibacillus choshinensis)是一种潜在的高效表达系统,但由于高效强启动子的缺乏严重限制了该表达系统的应用。该研究的主要目的是为B.choshinensis表达系统提供更多新高效强启动子。在该研究中,首先通过转录组测序技术获得B.choshinensis的转录组数据。然后基于基因的转录水平及功能,筛选高表达目的基因。基于筛选到的目的基因的启动子序列,以α-淀粉酶为报告蛋白构建了强启动子筛选文库。将含有不同启动子的重组菌摇瓶发酵后,以胞外α-淀粉酶活性为筛选指标,获得了内源性强启动子PE和PF,对应的重组菌BCWES和BCWFS胞外α-淀粉酶活性分别是常用的强启动子P2介导的对照菌BCWPS胞外α-淀粉酶活性的2.3和1.3倍。最后以蔗糖异构酶和角质酶为新的报告蛋白证明了PE启动子具有通用性,且经3 L罐发酵进一步验证了重组菌BCWES高分泌生产α-淀粉酶的能力。该研究丰富了可用于B.choshinensis表达系统的强启动子数量,促进了B.choshinensis作为一种新高效表达系统的开发与应用。
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关键词
短小芽孢杆菌
Α-淀粉酶
RNA测序
启动子
3
L罐发酵
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职称材料
1株产顺式-4-羟基-L-脯氨酸基因工程菌的构建及发酵初步优化
被引量:
1
2
作者
王付才
张震宇
+2 位作者
孙付保
姚动邦
周杨
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期7-12,共6页
顺式-4-羟基-L-脯氨酸是一种可用于合成多种药物和香料的手性结构物质。通过对L-脯氨酸顺式-4-羟化酶基因的优化设计,并引入色氨酸串联启动子,构建出1株能表达L-脯氨酸顺式-4-羟化酶的重组大肠杆菌JM109/p EHC4,从而可以将游离的L-脯氨...
顺式-4-羟基-L-脯氨酸是一种可用于合成多种药物和香料的手性结构物质。通过对L-脯氨酸顺式-4-羟化酶基因的优化设计,并引入色氨酸串联启动子,构建出1株能表达L-脯氨酸顺式-4-羟化酶的重组大肠杆菌JM109/p EHC4,从而可以将游离的L-脯氨酸转化为顺式-4-羟基-L-脯氨酸。对该菌株进行摇瓶发酵优化,得出优选培养基为(g/L):葡萄糖10,甘油10,蛋白胨10,NaCl 6,FeSO_4·7H_2O 0.278,L-抗坏血酸0.528,(NH_4)_2SO_45,K_2HPO41,MgSO_40.2,CaCl_20.015,L-脯氨酸4。在该条件下发酵12 h,顺式-4-羟基-L-脯氨酸的产量达到657.08mg/L,比优化前提高了3.76倍;在24 h时产量达到1 582.75 mg/L。研究结果为顺式-4-羟基-L-脯氨酸的微生物转化法生产提供了基础。
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关键词
L-脯氨酸顺式-4-羟化酶
密码子优化
重组大肠杆菌
微生物转化
发酵优化
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职称材料
题名
基于短小芽孢杆菌转录组的强启动子鉴定
1
作者
姚动邦
张康
朱昫飏
吴敬
机构
食品科学与技术国家重点实验室(江南大学)
工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第18期15-22,共8页
基金
国家重点研发项目(2019YFA0706900)
国家自然科学基金(31901633,31730067)
江苏省研究生培养创新工程(KYCX19_1837)。
文摘
短小芽孢杆菌(Brevibacillus choshinensis)是一种潜在的高效表达系统,但由于高效强启动子的缺乏严重限制了该表达系统的应用。该研究的主要目的是为B.choshinensis表达系统提供更多新高效强启动子。在该研究中,首先通过转录组测序技术获得B.choshinensis的转录组数据。然后基于基因的转录水平及功能,筛选高表达目的基因。基于筛选到的目的基因的启动子序列,以α-淀粉酶为报告蛋白构建了强启动子筛选文库。将含有不同启动子的重组菌摇瓶发酵后,以胞外α-淀粉酶活性为筛选指标,获得了内源性强启动子PE和PF,对应的重组菌BCWES和BCWFS胞外α-淀粉酶活性分别是常用的强启动子P2介导的对照菌BCWPS胞外α-淀粉酶活性的2.3和1.3倍。最后以蔗糖异构酶和角质酶为新的报告蛋白证明了PE启动子具有通用性,且经3 L罐发酵进一步验证了重组菌BCWES高分泌生产α-淀粉酶的能力。该研究丰富了可用于B.choshinensis表达系统的强启动子数量,促进了B.choshinensis作为一种新高效表达系统的开发与应用。
关键词
短小芽孢杆菌
Α-淀粉酶
RNA测序
启动子
3
L罐发酵
Keywords
Brevibacillus choshinensis
α-amylase
RNA sequencing
promoter
3 L fermenter fermentation
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
1株产顺式-4-羟基-L-脯氨酸基因工程菌的构建及发酵初步优化
被引量:
1
2
作者
王付才
张震宇
孙付保
姚动邦
周杨
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期7-12,共6页
基金
国家自然科学基金(30970058)
江苏省自然科学基金(BK2012554)
工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)开放课题基金(KLIB-ZR200801)
文摘
顺式-4-羟基-L-脯氨酸是一种可用于合成多种药物和香料的手性结构物质。通过对L-脯氨酸顺式-4-羟化酶基因的优化设计,并引入色氨酸串联启动子,构建出1株能表达L-脯氨酸顺式-4-羟化酶的重组大肠杆菌JM109/p EHC4,从而可以将游离的L-脯氨酸转化为顺式-4-羟基-L-脯氨酸。对该菌株进行摇瓶发酵优化,得出优选培养基为(g/L):葡萄糖10,甘油10,蛋白胨10,NaCl 6,FeSO_4·7H_2O 0.278,L-抗坏血酸0.528,(NH_4)_2SO_45,K_2HPO41,MgSO_40.2,CaCl_20.015,L-脯氨酸4。在该条件下发酵12 h,顺式-4-羟基-L-脯氨酸的产量达到657.08mg/L,比优化前提高了3.76倍;在24 h时产量达到1 582.75 mg/L。研究结果为顺式-4-羟基-L-脯氨酸的微生物转化法生产提供了基础。
关键词
L-脯氨酸顺式-4-羟化酶
密码子优化
重组大肠杆菌
微生物转化
发酵优化
Keywords
L-proline cis-4-hydroxylases
codon optimization
recombinant Escherichia coli
microbial transformation
fermentation optimization
分类号
TQ922 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于短小芽孢杆菌转录组的强启动子鉴定
姚动邦
张康
朱昫飏
吴敬
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
1株产顺式-4-羟基-L-脯氨酸基因工程菌的构建及发酵初步优化
王付才
张震宇
孙付保
姚动邦
周杨
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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职称材料
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