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丁酸钠体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为肝细胞 被引量:11
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作者 商昌珍 闵军 +4 位作者 张磊 刘璐 邓小耿 陈亚进 陈积圣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期2424-2428,共5页
目的:探讨分化刺激剂丁酸钠对体外培养的小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为肝细胞的影响,并分析其可能机制。方法:常规培养E14 ES细胞后,继续悬浮培养4 d以形成拟胚体,然后转移拟胚体到铺有明胶的6孔板中并添加3 mmol/L丁酸钠开始诱导分化,... 目的:探讨分化刺激剂丁酸钠对体外培养的小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为肝细胞的影响,并分析其可能机制。方法:常规培养E14 ES细胞后,继续悬浮培养4 d以形成拟胚体,然后转移拟胚体到铺有明胶的6孔板中并添加3 mmol/L丁酸钠开始诱导分化,分化过程中用倒置相差显微镜观察细胞形态学的改变;免疫荧光染色观察肝细胞特异性标志白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白18(CK18)的表达;RT-PCR检测肝细胞特异性标志基因ALB、AFP、甲状腺素运载蛋白(TTR)、α1抗胰蛋白酶(AAT)的mRNA表达;流式细胞技术检测ALB阳性细胞比例;糖原PAS染色和吲哚氰绿(ICG)摄取试验检测肝细胞功能。结果:诱导分化过程中ES细胞逐渐出现肝细胞样改变;诱导分化第7d仅检测到AFP和TTR在mRNA水平的表达,第14 d检测到ALB、AAT在mRNA水平的表达;分化14 d时免疫荧光检测显示ALB、AFP、CK18均为阳性;流式细胞技术检测ALB阳性细胞比例约为48.6%;糖原PAS染色和ICG摄取试验显示分化18d的肝细胞样细胞具有肝细胞功能。结论:丁酸钠可以高效诱导小鼠ES细胞分化为肝细胞样细胞,并且分化细胞具有肝细胞功能。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 肝细胞 细胞分化 丁酸钠
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85岁以上高龄患者的腹腔镜胆囊切除术 被引量:15
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作者 张磊 曹铭辉 +3 位作者 商昌珍 张红卫 钟锋 陈亚进 《中国微创外科杂志》 CSCD 2007年第6期520-521,523,共3页
目的:探讨85岁以上超高龄患者行腹腔镜胆囊切除术(1aparoscopic cholecystectomy,LC)的可行性。方法1996年10月~2006年10月,对79例85岁以上高龄患者行LC术,术前控制合并症,持续性硬膜外麻醉,CO2气腹压8~10mmHg,三孔法操作。... 目的:探讨85岁以上超高龄患者行腹腔镜胆囊切除术(1aparoscopic cholecystectomy,LC)的可行性。方法1996年10月~2006年10月,对79例85岁以上高龄患者行LC术,术前控制合并症,持续性硬膜外麻醉,CO2气腹压8~10mmHg,三孔法操作。结果70例LC成功,9例(11.4%)中转开腹,其中6例因腹腔内粘连严重,1例因发生不易控制出血,2例因术中怀疑胆囊癌。术后并发症发生率12.7%(10/79),其中1例死于术后心肌梗死,另9例治愈,包括左心力衰竭1例,肺部感染2例,肠梗阻1例,穿刺孔血肿1例,真菌性肠炎1例,胆囊窝积液3例。结论:术前积极处理合并症,术中适度的气腹压力,熟练规范的手术操作,术后严密观察,对超高龄患者行LC安全可行。 展开更多
关键词 超高龄 腹腔镜 胆囊切除术 围手术期
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丁酸钠诱导的未成熟树突状细胞的免疫学功能研究 被引量:8
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作者 刘璐 闵军 +6 位作者 王捷 商昌珍 万云乐 余强 杨梅 曹君 陈积圣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1199-1203,共5页
目的:探讨丁酸钠对人外周血来源的树突状细胞(DC)的成熟状态和免疫学功能的影响。方法:通过粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)结合丁酸钠体外诱导人外周血来源的DC,6d后结合不同成熟因子诱导成熟,并以流式细胞仪... 目的:探讨丁酸钠对人外周血来源的树突状细胞(DC)的成熟状态和免疫学功能的影响。方法:通过粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)结合丁酸钠体外诱导人外周血来源的DC,6d后结合不同成熟因子诱导成熟,并以流式细胞仪、FITC标记的Dextran的内吞检测、混合淋巴细胞反应(MLR)、ELISA法分别检测DC的表面标志、内吞能力、DC刺激淋巴细胞增殖能力和白细胞介素12(IL-12)分泌量的改变。结果:丁酸钠可以抑制DC成熟,使DC具有较强的抗原吞噬能力,而刺激淋巴细胞增殖能力和IL-12的分泌能力下降。结论:丁酸钠可以抑制DC成熟,诱导不成熟DC生成,在移植免疫耐受方面具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 树突细胞 丁酸盐类 免疫耐受 白细胞介素12
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微小RNA在丁酸钠诱导胚胎干细胞分化为肝细胞过程中表达差异谱的变化 被引量:2
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作者 陈亚进 闵军 +4 位作者 商昌珍 任萌 彭孝雄 曹君 陈积圣 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期469-473,共5页
目的探讨微小RNA(microRNA)在丁酸钠诱导胚胎干细胞分化为肝细胞过程中表达差异谱的变化,为进一步研究microRNA调控胚胎干细胞向肝细胞分化的分子机制奠定基础。方法分别于丁酸钠诱导小鼠胚胎干细胞向肝细胞分化过程中的第0、6、9天提... 目的探讨微小RNA(microRNA)在丁酸钠诱导胚胎干细胞分化为肝细胞过程中表达差异谱的变化,为进一步研究microRNA调控胚胎干细胞向肝细胞分化的分子机制奠定基础。方法分别于丁酸钠诱导小鼠胚胎干细胞向肝细胞分化过程中的第0、6、9天提取细胞总RNA,并分离获得分化细胞microRNA。利用microRNA芯片技术将细胞microRNA与哺乳动物microRNA芯片杂交,采用LuxScan 3.0图像分析软件和SAM(version 2.1)软件对芯片杂交结果进行数据分析,筛选出明显差异表达microRNA并进行靶基因预测。结果胚胎干细胞向肝细胞方向分化6 d时明显差异表达的microRNA共39个,其中17个表达上调、22个表达下调;9 d时明显差异表达的microRNA共44个,其中17个表达上调,27个表达下调。明显时相差异表达的36种microRNA中15种与组蛋白去乙酰化酶相关联。结论在丁酸钠诱导胚胎干细胞向肝细胞分化过程中,组蛋白去乙酰化酶及与其相关的microRNA很可能具有重要的调控胚胎干细胞生长和分化的作用。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 肝细胞 分化 微小RNA 丁酸钠
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丁酸钠、激活素A和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰腺外分泌细胞 被引量:1
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作者 任萌 闵军 +4 位作者 严励 商昌珍 曹君 李静宜 程桦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1585-1590,共6页
目的:探讨丁酸钠、激活素A(activinA)和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为胰腺外分泌细胞的可行性,并对诱导作用进行比较。方法:小鼠ES细胞悬浮培养为拟胚体后,以不同浓度的丁酸钠(1mmol/L,2mmol/L,3mmol/L)诱导分化,通过RT-PC... 目的:探讨丁酸钠、激活素A(activinA)和地塞米松诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)分化为胰腺外分泌细胞的可行性,并对诱导作用进行比较。方法:小鼠ES细胞悬浮培养为拟胚体后,以不同浓度的丁酸钠(1mmol/L,2mmol/L,3mmol/L)诱导分化,通过RT-PCR检测不同时点胰腺特异性外分泌基因的表达水平,确定丁酸钠诱导ES细胞向胰腺外分泌细胞分化的最佳浓度和作用时间。进一步单独或联合应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导ES细胞分化,并通过细胞形态学变化、RT-PCR和免疫荧光检测观察不同诱导方案对胰腺外分泌基因和蛋白表达的影响,确定最佳诱导方案。结果:1mmol/L丁酸钠能明显促进胰腺外分泌基因amylase、chymot-rypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达,随着丁酸钠浓度的增加,丁酸钠的诱导作用逐渐减弱;1mmol/L丁酸钠诱导第3d后可检测到amylase、chymotrypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达,在第5d外分泌基因mRNA表达水平达到高峰,随后逐渐下降。与自发对照组相比,单独应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导ES细胞分化,均能提高amylase、chymotrypsinogen、elastase1、elastase2和carboxypeptidase的表达水平。但联合应用丁酸钠、activinA、地塞米松诱导后,ES细胞形态更为均一,上述胰腺外分泌基因的表达进一步增强;免疫荧光结果显示amylase表达为阳性。结论:低浓度的丁酸钠、activinA以及地塞米松均可以诱导小鼠ES细胞胰腺外分泌基因的表达,多种诱导因子的联合作用能明显提高胰腺外分泌细胞的诱导效率。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 丁酸钠 地塞米松 胰腺外分泌细胞 细胞分化
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