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橡胶树炭疽菌CsHog1基因的克隆和原核表达分析
被引量:
2
1
作者
廖小淼
何其光
+6 位作者
刘耀
徐良向
周晓韵
刘文波
张宇
林春花
缪卫国
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2019年第5期932-938,共7页
HOG MAPK途径在植物病原真菌生长发育、致病过程和对杀菌剂敏感性等方面发挥重要功能,但在不同的病原真菌中具有一定差异。为研究Hog1蛋白在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)中的功能和调控机制,本研究利用同源克隆法克隆获得橡...
HOG MAPK途径在植物病原真菌生长发育、致病过程和对杀菌剂敏感性等方面发挥重要功能,但在不同的病原真菌中具有一定差异。为研究Hog1蛋白在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)中的功能和调控机制,本研究利用同源克隆法克隆获得橡胶树炭疽菌(C. siamense)的CsHog1基因,构建GST-CsHog1融合表达载体,利用SDS-PAGE和WesternBlot检测蛋白表达情况。结果表明:橡胶树炭疽菌(C.siamense)的CsHog1基因大小1383 nt,编码459个氨基酸,包含5个内含子,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域;聚类分析显示橡胶树炭疽菌的CsHog1基因编码的氨基酸序列与黄瓜炭疽菌的ClOsc1(Hog1同源基因)同源性最高。所构建的蛋白融合表达载体在供试条件下(IPTG0.3、0.5、0.8、1.0 mmol/L;温度16、25、28℃)均可较好诱导表达,GST-CsHog1融合蛋白大小约为70 ku。用GST亲和层析柱纯化获得蛋白,经Western Blot检测显示该蛋白可与GST单克隆抗体特异性结合。
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关键词
橡胶树
橡胶树炭疽菌
Hog1基因
蛋白纯化
原核表达
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职称材料
题名
橡胶树炭疽菌CsHog1基因的克隆和原核表达分析
被引量:
2
1
作者
廖小淼
何其光
刘耀
徐良向
周晓韵
刘文波
张宇
林春花
缪卫国
机构
海南大学植物保护学院
热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室
出处
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2019年第5期932-938,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.31760499
No.31560495)
现代农业产业技术体系建设专项资金项目(No.CARS-33-GW-BC1)
文摘
HOG MAPK途径在植物病原真菌生长发育、致病过程和对杀菌剂敏感性等方面发挥重要功能,但在不同的病原真菌中具有一定差异。为研究Hog1蛋白在橡胶树炭疽菌(Colletotrichum siamense)中的功能和调控机制,本研究利用同源克隆法克隆获得橡胶树炭疽菌(C. siamense)的CsHog1基因,构建GST-CsHog1融合表达载体,利用SDS-PAGE和WesternBlot检测蛋白表达情况。结果表明:橡胶树炭疽菌(C.siamense)的CsHog1基因大小1383 nt,编码459个氨基酸,包含5个内含子,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域;聚类分析显示橡胶树炭疽菌的CsHog1基因编码的氨基酸序列与黄瓜炭疽菌的ClOsc1(Hog1同源基因)同源性最高。所构建的蛋白融合表达载体在供试条件下(IPTG0.3、0.5、0.8、1.0 mmol/L;温度16、25、28℃)均可较好诱导表达,GST-CsHog1融合蛋白大小约为70 ku。用GST亲和层析柱纯化获得蛋白,经Western Blot检测显示该蛋白可与GST单克隆抗体特异性结合。
关键词
橡胶树
橡胶树炭疽菌
Hog1基因
蛋白纯化
原核表达
Keywords
rubber tree
Colletotrichum siamense
Hog1 gene
protein purification
prokaryotic expression
分类号
S794.1 [农业科学—林木遗传育种]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
橡胶树炭疽菌CsHog1基因的克隆和原核表达分析
廖小淼
何其光
刘耀
徐良向
周晓韵
刘文波
张宇
林春花
缪卫国
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2019
2
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