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cpcB与CT融合蛋白表达质粒在大肠杆菌中的表达和纯化
被引量：
4
1
作者
王玉梅
张学成
+2 位作者
周一江
隋正红
茅云翔
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期62-66,共5页
将人和鲑鱼嵌合型降钙素基因与藻蓝蛋白的β亚基基因相连,插入融合表达载体pGEX-4T-3中,转化大肠杆菌BL21.融合蛋白cpcB-CT基因在IPTG诱导下获得高效表达.超声破碎后,经SDS-PAGE分析,在48kD处有新增条,灰度扫描测定,过表达蛋白量占50%～...
将人和鲑鱼嵌合型降钙素基因与藻蓝蛋白的β亚基基因相连,插入融合表达载体pGEX-4T-3中,转化大肠杆菌BL21.融合蛋白cpcB-CT基因在IPTG诱导下获得高效表达.超声破碎后,经SDS-PAGE分析,在48kD处有新增条,灰度扫描测定,过表达蛋白量占50%～60%,85%为包涵体.包涵体经变性、复性,过Glutathion-Sepharose-4B亲和吸附柱,获含有GST的融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化和截留分离,获得纯化的融合蛋白cpcB-CT.Western blotting分析表明,产物具有与合成人降钙素相似的抗原决定簇部分;ELISA-受体法和大鼠降血钙试验表明,其具有降血钙作用.提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景.
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关键词
融合蛋白
大肠杆菌
表达质粒
纯化
SDS-PAGE分析
Western
CT
融合表达载体
降钙素基因
抗原决定簇
藻蓝蛋白
高效表达
IPTG
超声破碎
包涵体
β亚基
蛋白量
过表达
吸附柱
GST
凝血酶
分析表
血钙
大鼠
受体
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职称材料
题名
cpcB与CT融合蛋白表达质粒在大肠杆菌中的表达和纯化
被引量：
4
1
作者
王玉梅
张学成
周一江
隋正红
茅云翔
机构
中国海洋大学海洋生命学院
出处
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期62-66,共5页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)
文摘
将人和鲑鱼嵌合型降钙素基因与藻蓝蛋白的β亚基基因相连,插入融合表达载体pGEX-4T-3中,转化大肠杆菌BL21.融合蛋白cpcB-CT基因在IPTG诱导下获得高效表达.超声破碎后,经SDS-PAGE分析,在48kD处有新增条,灰度扫描测定,过表达蛋白量占50%～60%,85%为包涵体.包涵体经变性、复性,过Glutathion-Sepharose-4B亲和吸附柱,获含有GST的融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化和截留分离,获得纯化的融合蛋白cpcB-CT.Western blotting分析表明,产物具有与合成人降钙素相似的抗原决定簇部分;ELISA-受体法和大鼠降血钙试验表明,其具有降血钙作用.提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景.
关键词
融合蛋白
大肠杆菌
表达质粒
纯化
SDS-PAGE分析
Western
CT
融合表达载体
降钙素基因
抗原决定簇
藻蓝蛋白
高效表达
IPTG
超声破碎
包涵体
β亚基
蛋白量
过表达
吸附柱
GST
凝血酶
分析表
血钙
大鼠
受体
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S884.51 [农业科学—特种经济动物饲养]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
cpcB与CT融合蛋白表达质粒在大肠杆菌中的表达和纯化
王玉梅
张学成
周一江
隋正红
茅云翔
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2005
4
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