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绵羊lncRNA-MRLN基因的克隆和蛋白编码能力分析 被引量:1
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作者 刘芝瑾 曹洋 +3 位作者 吾热力哈孜.哈孜汗 倪伟 王大伟 胡圣伟 《动物医学进展》 北大核心 2018年第12期37-42,共6页
为了验证长链非编码MRLN基因具有蛋白编码能力,通过提取哈萨克羊胚胎期比目鱼肌总RNA,用RT-PCR获得lncRNA-MRLN基因;用EGFP自身发光及不影响目的蛋白特性的特点,构建了pcD-MRLN-EGFP融合表达载体,且转染293T细胞对lncRNA-MRLN是否具有... 为了验证长链非编码MRLN基因具有蛋白编码能力,通过提取哈萨克羊胚胎期比目鱼肌总RNA,用RT-PCR获得lncRNA-MRLN基因;用EGFP自身发光及不影响目的蛋白特性的特点,构建了pcD-MRLN-EGFP融合表达载体,且转染293T细胞对lncRNA-MRLN是否具有蛋白编码能力进行分析。结果表明,重组质粒经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切成1 059bp和5 428bp片段,真核表达载体pcDNA 3.1(+)中插入MRLN和EGFP基因,经测序编码框正确;转染293T细胞后,在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光,且通过RT-PCR在RNA水平上可检测到lncRNA-MRLN的表达,说明lncRNA可以编码蛋白。 展开更多
关键词 长链非编码RNA MRLN 克隆 转染 真核表达
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哈萨克羊INHβA基因克隆及生物信息学分析 被引量:1
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作者 解津刚 巴合提.博代 +1 位作者 热衣扎别克.哈德坎 吾热力哈孜.哈孜汗 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期1290-1298,共9页
试验旨在克隆哈萨克羊抑制素βA(inhibin beta A,INHβA)基因序列,并探究其序列特征及编码蛋白的结构和功能。根据GenBank中绵羊INHβA基因序列(登录号:NM_001009458.1)设计1对特异性引物,通过RT-PCR方法对哈萨克羊INHβA基因进行扩增,... 试验旨在克隆哈萨克羊抑制素βA(inhibin beta A,INHβA)基因序列,并探究其序列特征及编码蛋白的结构和功能。根据GenBank中绵羊INHβA基因序列(登录号:NM_001009458.1)设计1对特异性引物,通过RT-PCR方法对哈萨克羊INHβA基因进行扩增,将获得的INHβA基因片段插入到pMD19-T载体中进行克隆测序,并结合生物信息学方法预测和分析其核苷酸序列、氨基酸序列、蛋白跨膜、蛋白修饰位点及二级结构、三级结构模型等。结果显示,哈萨克羊INHβA基因长1 278 bp,编码425个氨基酸。哈萨克羊INHβA基因与绵羊、牛、野猪、小鼠、人、大鼠、猫、兔、马的同源性分别为98.6%、97.7%、90.4%、87.9%、91.1%、88.2%、91.8%、89.8%和91.8%,表明INHβA基因在不同物种之间具有较高的保守性。INHβA蛋白分子式为C_(2072)H_(3325)N_(603)O_(628)S_(26),分子质量为47.57 ku,理论等电点(pI)为7.87,不稳定系数为66.16,脂溶指数为78.47,亲水值为-0.507。INHβA是一种碱性不稳定的亲水性脂溶性蛋白,没有跨膜结构,含有信号肽。二级结构预测显示,INHβA蛋白α-螺旋、β-转角、无规则卷曲、延伸链分别占22.59%、4.47%、54.12%和18.82%。三级结构预测显示,INHβA蛋白以α-螺旋为主,是含有8种蛋白修饰位点的β-桶状蛋白。本试验结果为深入研究哈萨克羊INHβA蛋白功能及探讨INHβA基因对提高哈萨克羊繁殖力的影响提供参考数据。 展开更多
关键词 哈萨克羊 INHβA基因 克隆 序列分析
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新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析
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作者 加米拉.吐尔逊 陈云蕾 +2 位作者 吾热力哈孜.哈孜汗 马亚茹 赛务加甫 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第1期45-50,共6页
本研究通过新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析,为研究绵羊NYD-SP27表达调控机制奠定基础。根据Genbank中公布的人类的NYD-SP27基因序列设计引物,本研究以新疆哈萨克羊的睾丸组织的总DNA为模板,采用RT-PCR扩增方法对绵羊NYD-SP2... 本研究通过新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析,为研究绵羊NYD-SP27表达调控机制奠定基础。根据Genbank中公布的人类的NYD-SP27基因序列设计引物,本研究以新疆哈萨克羊的睾丸组织的总DNA为模板,采用RT-PCR扩增方法对绵羊NYD-SP27基因序列进行研究。结果显示:哈萨克羊NYD-SP27基因全长为1901 bp,其中只含有1617 bp组成的开放阅读框(ORF),共编码538个氨基酸;相对分子质量61995.66,理论PI值为6.16,正电荷残基数(Arg+Lys)为61,负电荷残基数(Asp+Glu)为67;分子式C2798H4319N737O819S19;体外半衰期为30 h,不稳定系数46.96(不稳定);总平均吸水性-0.403。结论:哈萨克羊NYD-SP27基因属于PLCζ家族;同时将所得序列已提交到Gene Bank(登录号:KX905090)。 展开更多
关键词 哈萨克羊 NYD-SP27基因 基因克隆 序列分析
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也木勒羊抑制素α亚基基因克隆及其真核表达 被引量:1
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作者 黄增文 木尔扎提 吾热力哈孜.哈孜汗 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1340-1347,共8页
为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,... 为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了也木勒白羊INHα亚基基因编码区全长序列。并将扩增产物克隆到表达载体(pEGFP-N1)的ScalⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,构建重组质粒pEGFP-INHα并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,后进行鉴定、测序,证明成功构建了INHα亚基基因的真核表达载体。将也木勒白羊INHα亚基基因与人、大猩猩、牛等动物的INHα亚基基因序列进行同源性比对分析,相似度都在50%以上,说明了抑制素基因具有高度保守性。用RT-PCR和Western blotting方法验证了INHα亚基基因的真核表达载体在BHK细胞中的成功表达及蛋白表达。 展开更多
关键词 也木勒白羊 卵泡抑制素 真核表达 同源性分析
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也木勒白羊种质资源现状调查与分析 被引量:3
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作者 黄增文 木尔扎提 +3 位作者 阿德力 阿曼太 吾热力哈孜.哈孜汗 哈普尔 《畜禽业》 2014年第12期50-52,共3页
也木勒白羊(原名喀拉也木勒羊)作为新近被发现的新疆宝贵地方绵羊品种资源之一,主要分布于新疆额敏县及其周围地区,具有很强的环境适应性和较强的抗寒抗病力。具有生长发育快、耐高寒、耐粗饲等优良特性。曾由于各种原因,其选种、选育... 也木勒白羊(原名喀拉也木勒羊)作为新近被发现的新疆宝贵地方绵羊品种资源之一,主要分布于新疆额敏县及其周围地区,具有很强的环境适应性和较强的抗寒抗病力。具有生长发育快、耐高寒、耐粗饲等优良特性。曾由于各种原因,其选种、选育工作没有得到足够的重视,加上引入大量外国优秀绵羊品种并进行无计划的杂交,使纯种也木勒羊的数量一度急剧下降。2012—2013年间,在县、乡畜牧部门的协同下,进行种群生产现状调查的同时,在新疆额敏县喀拉也木勒乡牧区,对部分核心种群120只处于不同生长阶段的也木勒白羊及100只4岁以上成年也木勒白羊进行了体重、基本体尺测定,并对其结果进行了整理。 展开更多
关键词 也木勒白羊 品种特性 生产性能
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