基于牛分枝杆菌融合蛋白ESAT6-CFP10-TB27.4间接ELISA检测方法的建立

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作者 姜美奇 赵文娟 +11 位作者 许淑芸 魏京京 黎雪勤 徐雪可 周霞 吴桐忠 王莉莉 韩猛立 张星星 张倩 钟发钢 黄新 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第5期480-486,515,共8页

为建立检测牛分枝杆菌(MB)抗体的间接ELISA方法,本研究选取MB ESAT6、CFP10和TB27.4基因,通过柔性linker(GGGGS)连接,克隆至pET-32a载体,构建重组质粒pET-32a-EC-27.4,经双酶切及测序鉴定正确后,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),并在不同温... 为建立检测牛分枝杆菌(MB)抗体的间接ELISA方法,本研究选取MB ESAT6、CFP10和TB27.4基因,通过柔性linker(GGGGS)连接,克隆至pET-32a载体,构建重组质粒pET-32a-EC-27.4,经双酶切及测序鉴定正确后,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),并在不同温度和时间下经IPTG诱导表达并超声破碎。采用镍亲和层析方法纯化重组EC-27.4蛋白(rEC-27.4)后,通过SDS-PAGE检测rEC-27.4的表达及纯化效果,采用western blot检测其反应原性。SDS-PAGE结果显示,当IPTG浓度为0.3 mmol/L,温度为16℃时,诱导rEC-27.4的表达量最高且其以可溶性形式表达,且纯化后在75 ku处出现单一目的条带。Western blot结果显示在75 ku处出现特异性条带。经BCA试剂盒测定rEC-27.4的浓度为0.852 mg/mL。以纯化的该重组蛋白作为包被抗原,采用棋盘法优化各反应条件,初步建立检测MB抗体的间接ELISA方法。采用优化后的间接ELISA方法分别检测MB阳性和阴性血清以及沙门氏菌、大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、副结核分枝杆菌、结核分枝杆菌、布鲁氏菌和牛病毒性腹泻病毒等阳性牛血清,评估该方法的特异性;将MB阳性血清2倍倍比稀释(1:50~1:6400)后,采用本研究建立的间接ELISA方法检测,评估该方法的敏感性;以同批次和不同批次表达的rEC-TB27.4分别包被ELISA板,采用优化的间接ELISA方法检测5份MB阳性血清和3份阴性血清,评估该方法的重复性。结果显示,该方法仅能检测到MB阳性血清,其他相关细菌及病毒阳性血清均为阴性结果;牛分枝杆菌阳性血清1:400稀释时仍为阳性结果;该方法对8份血清的批内、批间重复性试验的变异系数均小于7%。采用建立的间接ELISA方法检测377份临床牛血清样品,并同时采用动物结核分枝杆菌夹心ELISA抗体检测试剂盒及PPDB皮肤试验(TST)和BTB IFN-γ释放试验(IGRA)检测,结果显示,该间接ELISA方法的阳性检测率为6.90%(26/377),阴性样品数为351份;夹心ELISA试剂盒的阳性检测率为7.43%(28/377),阴性样品数为349份;TST和IGRA的阳性检测率均为52.52%(198/377),阴性样品数均为179份。本研究建立的间接ELISA与夹心ELISA抗体检测试剂盒的阳性和阴性符合率分别为53.6%和96.8%;与TST和IGRA的阳性和阴性符合率均为11.1%和97.8%。本研究基于MB r EC-27.4建立的间接ELISA抗体检测方法特异性较强、敏感性较高、重复性较好,在MB所致牛结核的早期检测中有一定的优势,为牛结核的检测和早期诊断提供了新的技术手段。 展开更多

关键词 牛分枝杆菌 ESAT6-CFP10-TB27.4融合蛋白 原核表达 间接ELISA

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新疆部分地区羊副结核血清学调查

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作者 姜美奇 赵文娟 +10 位作者 黎雪勤 党士荣 徐雪可 吴桐忠 王莉莉 韩猛立 张星星 张倩 黄新 钟发钢 周霞 《新疆农垦科技》 2025年第3期58-60,共3页

为阐明新疆部分地区羊场副结核病流行情况,本研究从新疆8个羊场采集424份羊血清样本,采用ELISA方法进行羊副结核杆菌抗体检测。结果显示:受检的424份羊血清样本中,阳性样本13份,抗体阳性率为3.07%;按不同羊场分类统计,MAP血清抗体群体... 为阐明新疆部分地区羊场副结核病流行情况,本研究从新疆8个羊场采集424份羊血清样本,采用ELISA方法进行羊副结核杆菌抗体检测。结果显示:受检的424份羊血清样本中,阳性样本13份,抗体阳性率为3.07%;按不同羊场分类统计,MAP血清抗体群体阳性率为37.50%(3/8),个体阳性率为0%~6.34%;按不同养殖方式统计,规模化养殖场阳性率为3.00%(9/300),散养阳性率为3.26%(4/124);以不同年龄羊统计,4月龄以内未检测到阳性样本,2岁以上抗体阳性率最高,为8.08%(8/99)。调查结果显示,新疆地区羊场存在不同程度的MAP感染,散养户的阳性率略高于规模化养殖场,且羊MAP抗体阳性率与羊年龄成正比(P<0.01)。 展开更多

关键词 新疆 羊 副结核病 血清学调查

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新疆肉羊产业发展现状及未来养殖模式展望 被引量：3

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作者 赵文娟 张星星 +5 位作者 杨庆勇 钟发钢 韩猛立 黄新 张倩 吴桐忠 《现代畜牧科技》 2024年第3期112-115,共4页

新疆是羊肉的重要生产地和消费地,肉羊产业对新疆农牧业增效及农牧民增收致富具有重要意义。当前新疆地区羊肉供给严重不足,满足不了当地消费需求,养殖模式与方法相对分散与落后,与现代化、集约化养殖模式存在很大差距。该文分析了新疆... 新疆是羊肉的重要生产地和消费地,肉羊产业对新疆农牧业增效及农牧民增收致富具有重要意义。当前新疆地区羊肉供给严重不足,满足不了当地消费需求,养殖模式与方法相对分散与落后,与现代化、集约化养殖模式存在很大差距。该文分析了新疆肉羊产业的发展现状及面临的挑战和问题,探讨发展肉羊智慧化养殖的趋势及意义,对新疆肉羊产业发展智慧养殖的前景进行了展望,并提出发展标准化规模养殖、加强科技队伍建设、完善科技支撑体系、加快饲草料产业发展、推广智慧化养殖技术、打造规模化羊场智慧管理云平台等建议,为新疆肉羊产业健康、可持续发展提供参考。 展开更多

关键词 新疆 肉羊产业 发展现状 养殖模式

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绵羊肺源大肠杆菌cyaA基因的分子特征及抗原性分析

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作者 操义恒 贾开文 +10 位作者 党士荣 胡亚辉 王巧梅 俞杰 郭云霞 周霞 黄新 钟发钢 韩猛立 吴桐忠 张倩 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第17期58-64,共7页

为研究绵羊肺源大肠杆菌cyaA基因的分子特征、抗原性及其遗传进化关系,采用PCR技术对绵羊肺源大肠杆菌XJ10菌株的cyaA基因进行扩增、克隆并测序,应用定量PCR检测cyaA基因在不同培养阶段的mRNA表达量,利用在线软件对其进行编码蛋白分子... 为研究绵羊肺源大肠杆菌cyaA基因的分子特征、抗原性及其遗传进化关系,采用PCR技术对绵羊肺源大肠杆菌XJ10菌株的cyaA基因进行扩增、克隆并测序,应用定量PCR检测cyaA基因在不同培养阶段的mRNA表达量,利用在线软件对其进行编码蛋白分子特征、抗原性及其遗传进化分析。结果显示,cyaA基因全长2547 bp,编码848个氨基酸;cyaA基因在细菌对数期的mRNA表达量最高,其次是稳定期及迟缓期,在衰亡期的mRNA表达量最低;氨基酸序列分析发现,分子式为C_(4389)H_(6759)N_(1193)O_(1273)S_(30),理论分子质量为97.57 ku,理论等电点为5.82,为酸性亲水性蛋白,稳定性较低;二级结构中α-螺旋、无规则卷曲、延伸链和β-折叠所占比例分别为42.81%、39.03%、14.27%和3.89%。AC蛋白无信号肽与跨膜区,保守结构域位于1~848位氨基酸,属于腺苷酸环化酶超家族,具有14个开放阅读框,存在81个磷酸化位点。AC蛋白B细胞优势表位共16个,分别位于第44~51、61~65、248~250、259~267、296~304、355~366、436~439、456~456、476~481、489~490、540~559、589~597、634~640、717~722、766~773、806~806区段;遗传进化分析发现大肠杆菌XJ10菌株AC蛋白与志贺氏菌AC蛋白相似性最高。本试验结果为进一步研究大肠杆菌AC蛋白的功能及其作为大肠杆菌疫苗候选抗原奠定了基础。 展开更多

关键词 绵羊肺源大肠杆菌 cyaA基因 分子特征 抗原性 遗传进化

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表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析 被引量：6

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作者 吴桐忠 努尔赛力克·努素甫 +6 位作者 黄新 韩猛立 张星星 张倩 王新华 何延华 钟发刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第8期2975-2981,共7页

试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E 2基因克隆后测序,根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进... 试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E 2基因克隆后测序,根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化,再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中,并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞,构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000,经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后,对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛,在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清,用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示,PCR扩增到了1149 bp的目的片段,乳酸菌密码子偏嗜性优化后,GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符,在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带,与预期蛋白大小一致,且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明,表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应,该重组菌具有较好的免疫原性。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) E 2基因 乳酸乳球菌 免疫原性

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肠外致病性大肠杆菌研究 被引量：2

6

作者 吴桐忠 张倩 +4 位作者 张星星 钟发刚 何延华 韩猛立 黄新 《湖北农业科学》 2022年第16期147-150,168,共5页

肠外致病性大肠杆菌(Extraintestinal pathogenic E.coli,ExPEC)是近年来出现的引起人和动物免疫系统受损的主要临床病原体,由不同血清型且不发生交叉反应的菌株引起,部分菌株具有高度耐药性是导致感染严重程度的主要因素之一。对目前Ex... 肠外致病性大肠杆菌(Extraintestinal pathogenic E.coli,ExPEC)是近年来出现的引起人和动物免疫系统受损的主要临床病原体,由不同血清型且不发生交叉反应的菌株引起,部分菌株具有高度耐药性是导致感染严重程度的主要因素之一。对目前ExPEC的主要感染类型、毒力因子以及抵御感染的潜在手段进行了概述。 展开更多

关键词 肠外致病性大肠杆菌 毒力因子 免疫反应

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致羔羊腹泻大肠杆菌分离培养、药敏试验及鉴定 被引量：1

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作者 吴桐忠 钟发刚 +2 位作者 黄新 韩猛力 张星星 《当代畜禽养殖业》 2017年第2期13-13,共1页

为了确定引起该羊场羔羊腹泻的致病菌,通过分离培养和细菌鉴定确定致病菌为大肠杆菌,药敏试验结果表明米诺环素、氨曲南、头孢噻肟、头孢吡肟、头孢他啶和头孢西叮对该菌的抑制和杀灭效果最好。

关键词 羔羊 大肠杆菌 分离培养 药敏实验

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秸秆中添加纤维素酶对羔羊增重效果的影响 被引量：4

8

作者 吴桐忠 《新疆农垦科技》 2008年第6期35-36,共2页

纤维素酶作为一种生物催化剂，可以将饲料中的纤维素催化降解为小分子物质，便于吸收利用，近年来在国内外畜禽养殖业中广泛应用。在新疆，番茄酱生产的加工副产品一番茄皮具有较高的营养价值，是家畜的优质饲料。但是，它们水分含量高... 纤维素酶作为一种生物催化剂，可以将饲料中的纤维素催化降解为小分子物质，便于吸收利用，近年来在国内外畜禽养殖业中广泛应用。在新疆，番茄酱生产的加工副产品一番茄皮具有较高的营养价值，是家畜的优质饲料。但是，它们水分含量高，容积大，夏季气温高时容易腐败，不易长期利用。本试验利用作物秸秆和番茄皮并通过添加适量纤维素酶进行生物处理后，饲喂羔羊，以测定其不同处理方式对羔羊增重的影响。 展开更多

关键词 纤维素酶 增重效果 作物秸秆 羔羊 优质饲料 生物催化剂 小分子物质 畜禽养殖业

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猪繁殖与呼吸综合症的防治

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作者 吴桐忠 王建 +1 位作者 李永刚 王新峰 《黑龙江动物繁殖》 2004年第1期34-34,共1页

关键词 猪繁殖与呼吸综合症 防治 披膜病毒科 动脉炎病毒属 蓝耳病毒

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牛源多杀性巴氏杆菌血清分型及毒力相关基因的检测研究 被引量：23

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作者 邬琴 张星星 +6 位作者 顾晓晓 陶乔孝慈 黄新 韩猛立 吴桐忠 周霞 钟发刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1910-1920,共11页

为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法(LPS-mPCR)、多... 为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法(LPS-mPCR)、多位点序列分型法(MLST)及PCR方法检测17株Pm分离株的荚膜型、脂多糖型、MLST型及7类共25个毒力相关基因的分布情况。结果显示,13株Pm的荚膜脂多糖型为A∶L3型,ST型均为ST1型,4株Pm荚膜脂多糖型为B∶L2型,ST型均为ST44;17株Pm毒力相关基因(exbB、exbD、fimA、fur、hgbA、hsf2、nanB、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、ptfA、sodA、sodC、tonB和tbpA)的检出率高达100%,toxA基因的检出率为0。结果表明,从新疆北疆部分地区规模化牛场疑似病例中分离的Pm主要血清型为A∶L3∶ST1型。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌(Pm) 荚膜 脂多糖 多位点序列分型(MLST) 毒力相关基因

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牛病毒性腹泻病毒的分子生物学特性及发病机制研究进展 被引量：17

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作者 韩猛立 张倩 +4 位作者 赵文娟 张星星 吴桐忠 黄新 钟发钢 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4632-4645,共14页

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)是影响全世界养牛业的重要病原体之一,给畜牧业造成了巨大经济损失。BVDV由2种生物型和多种不同基因亚型毒株组成,这些毒株具有不同的抗原性、细胞病理学和致病性发病机制。尽管世... 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)是影响全世界养牛业的重要病原体之一,给畜牧业造成了巨大经济损失。BVDV由2种生物型和多种不同基因亚型毒株组成,这些毒株具有不同的抗原性、细胞病理学和致病性发病机制。尽管世界各国为控制和预防BVDV的发生与流行做出诸多努力,但仍有BVDV感染动物的报道。笔者主要围绕BVDV的分子生物学、发病机制以及宿主对病毒感染的免疫反应尤其是免疫逃避策略、免疫防控等方面进行论述,阐述了BVDV通过劫持宿主免疫系统以确保病毒复制成功的一些免疫逃避策略,以期为遏制BVDV的出现和传播,从而实现净化、控制该病毒提供参考。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 分子生物学 发病机制

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放牧与舍饲条件下夏洛莱牛肠道微生物多样性及差异分析 被引量：7

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作者 张星星 黄新 +6 位作者 韩猛立 蒋烈戈 张倩 高攀 刘鹏 吴桐忠 钟发刚 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1729-1739,共11页

【目的】采用高通量测序技术研究放牧与舍饲条件下夏洛莱牛肠道微生物多样性及差异。【方法】选取新疆塔城地区健康的舍饲夏洛莱牛(CB组)和放牧夏洛莱牛(CG组)各5头,分别采集CB、CG组每头夏洛莱牛的直肠粪便,提取微生物总DNA,通过Illumi... 【目的】采用高通量测序技术研究放牧与舍饲条件下夏洛莱牛肠道微生物多样性及差异。【方法】选取新疆塔城地区健康的舍饲夏洛莱牛(CB组)和放牧夏洛莱牛(CG组)各5头,分别采集CB、CG组每头夏洛莱牛的直肠粪便,提取微生物总DNA,通过Illumina HiSeq测序技术,分析10个粪便样品的菌落结构及多样性。【结果】所有样本共检测出1089个OTUs(CB:1044、CG:1087),归属于12门24纲33目57科170属的细菌。在门水平,厚壁菌门和拟杆菌门在2组中均为优势菌门,其次为疣微菌门、放线菌、广古菌门和变形菌门,在科水平的优势菌依次为瘤胃球菌科、理研菌科、毛螺菌科、消化链球菌科、普雷沃氏菌科、克里斯滕森菌科、拟杆菌科等;其中CB组中拟杆菌门、拟杆菌纲、拟杆菌目、理研菌科、消化链球菌科丰度显著高于CG组(P<0.05),CG组中厚壁菌门、瘤胃球菌科的丰度显著高于CB组(P<0.05)。【结论】舍饲夏洛莱牛和放牧夏洛莱牛肠道微生物结构与组成存在显著性差异,放牧夏洛莱牛肠道微生物具有更强的纤维消化的能力。 展开更多

关键词 夏洛莱牛 肠道菌群结构 细菌多样性 高通量测序

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肉牛长途运输诱发应激综合征的诊治 被引量：5

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作者 侯小林 吴桐忠 +4 位作者 李伟 张星星 黄佐兴 黄新 韩猛立 《中国动物检疫》 CAS 2020年第8期93-99,共7页

为确诊引起新疆某基层团场长途调运西门塔尔后备母牛发病死亡的病因,通过临床剖解,结合常规细菌分离鉴定、PCR检测,对发病肉牛进行现场诊断和实验室检测确诊,证实引起此次西门塔尔肉牛发病死亡的主要原因是长途运输诱发的应激综合征,主... 为确诊引起新疆某基层团场长途调运西门塔尔后备母牛发病死亡的病因,通过临床剖解,结合常规细菌分离鉴定、PCR检测,对发病肉牛进行现场诊断和实验室检测确诊,证实引起此次西门塔尔肉牛发病死亡的主要原因是长途运输诱发的应激综合征,主要致病菌为巴氏杆菌和支原体,并伴有附红细胞体混合感染。针对病因和药敏试验结果,采取了抗菌消炎和对症治疗等措施,发病死亡情况由此得到有效控制。此病例的诊治为新疆地区长途调运牛只时,降低类似事件的发生提供了一定的理论基础和实践指导。 展开更多

关键词 运输应激综合征 肉牛 支原体 巴氏杆菌 诊治

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牛源多杀性巴氏杆菌Oma87基因的分子特征、抗原性及遗传进化分析 被引量：2

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作者 张星星 黄新 +5 位作者 何延华 何立雄 韩猛立 张倩 吴桐忠 钟发刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第7期2200-2206,共7页

为研究牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)Oma87基因的分子特征及同源性,本研究对荚膜血清A型(capsular serotype A,Pm8)Oma87基因进行扩增、克隆和测序,利用在线软件对其进行分子特征、抗原性及遗传进化分析。结果显示,Oma8... 为研究牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)Oma87基因的分子特征及同源性,本研究对荚膜血清A型(capsular serotype A,Pm8)Oma87基因进行扩增、克隆和测序,利用在线软件对其进行分子特征、抗原性及遗传进化分析。结果显示,Oma87基因全长为2376 bp,编码791个氨基酸;氨基酸序列分析发现,该蛋白为酸性的亲水性蛋白,稳定性高,具有信号肽结构但不存在跨膜区域;二、三级结构分析发现,该蛋白为无规则卷曲及多段延伸链所形成的“N”字型三维立体结构。遗传进化分析显示,新疆分离株Pm8 Oma87基因与其他不同地域的牛源A型Pm和部分猪源A型Pm的同源性较近,与其他型Pm的同源性较远;通过VaxiJen软件分析发现,Oma87蛋白的保护性抗原的总体预测值为0.5478,高于正常阈值0.4,证明Oma87蛋白可作为免疫原性蛋白,为进一步研究Oma87蛋白奠定了理论基础。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 Oma87基因 分子特征 抗原性 遗传进化

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布鲁氏菌疫苗(S2株)气雾免疫绵羊血清抗体阳性率优于口服免疫 被引量：1

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作者 黄新 韩猛立 +12 位作者 张星星 张宾 汪保 吴桐忠 晁旭东 何立雄 韩文国 蒲新竹 陈朝阳 罗文毅 彭剑 何延华 钟发刚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期24-28,33,共6页

本研究旨在检测经气雾和口服途径接种布鲁氏菌疫苗(S2株)后羊特异性血清抗体阳性率的变化以确定其相对免疫功效。布鲁氏菌阴性羊群分别通过口服(1×1010 CFU剂量)和气雾(1×1010、8×109、6×109、4×109、2×... 本研究旨在检测经气雾和口服途径接种布鲁氏菌疫苗(S2株)后羊特异性血清抗体阳性率的变化以确定其相对免疫功效。布鲁氏菌阴性羊群分别通过口服(1×1010 CFU剂量)和气雾(1×1010、8×109、6×109、4×109、2×109、1×109 CFU和5×108 CFU共7种剂量)接种布鲁氏菌疫苗(S2株)。接种后30、60、90、120 d和320 d分别采集试验羊的血清样品,并用虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)进行血清抗体检测。结果显示,口服免疫组接种后30d抗体阳性率达到最高(羔羊RBPT:38.00%,SAT:32.00%;成年羊RBPT:72.00%,SAT:68.00%),30~90 d抗体阳性率下降较快,90 d后抗体阳性率降到较低水平(RBPT﹤12.00%,SAT﹤10.00%);气雾免疫组,羔羊接种后30d,阳性率最高升至40.00%(RBPT:16.70%~40.00%,SAT:11.10%~30.00%),60d阳性率降至20.00%以内(RBPT:0~20.00%,SAT:5.60%~20.00%),90d阳性率降至10.00%以内,不同剂量气雾免疫羔羊阳性率变化差异不显著(P>0.05)。成年羊(除5×108 CFU组外),接种后30d阳性率升至84.81%(SAT:84.81%~88.50%),60d阳性率低于53.33%(SAT:44.30%~53.33%),90d阳性率低于24.39%(SAT:18.66%~24.39%),120d阳性率低于10.00%;5×108CFU组接种后30d阳性率较低(RBPT:48.70%,SAT:44.73%);成年羊气雾免疫组1×109~1×1010 CFU剂量同一时间点,阳性率结果变化差异不显著(P>0.05),与5×108 CFU组在30d和60d变化差异极显著(P<0.01)。口服免疫组抗体阳性率曲线变化趋势与气雾免疫组基本一致,接种后30d时都达到峰值,羔羊阳性率均较低,成年羊气雾免疫组阳性率高出口服免疫组18.84%。本试验表明,布鲁氏菌疫苗(S2株)气雾免疫在成年羊体内产生的特异性血清抗体阳性率优于口服免疫。 展开更多

关键词 绵羊布鲁氏菌 S2疫苗 气雾免疫 口服免疫 特异性抗体

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新疆石河子部分地区猪流行性腹泻病毒遗传变异分析 被引量：1

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作者 黄新 吴桐忠 +3 位作者 韩猛立 张星星 何延华 钟发刚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期17-20,共4页

为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)遗传变异情况,从石河子的3个地区已确诊PED猪场采集病料,分别获得了3株PEDV S基因序列和ORF3基因序列,将其进行序列比对及遗传进化分析。根据3株S基因序列分析表明,XJ-SHZ148、XJSHZ146株与韩国QIAP1401株(... 为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)遗传变异情况,从石河子的3个地区已确诊PED猪场采集病料,分别获得了3株PEDV S基因序列和ORF3基因序列,将其进行序列比对及遗传进化分析。根据3株S基因序列分析表明,XJ-SHZ148、XJSHZ146株与韩国QIAP1401株(KX793713)序列相似性最高,达到97.4%和98.7%;XJ-SW株与广东GD-03 2012株(KP870115)序列相似性最高,达到98.5%。3个分离株与PEDV疫苗株AF353511(CV777)性序列相似性分别为94.5%、94.2%和94.1%。系统进化分析表明,XJ-SHZ148、XJ-SHZ146与韩国的KPV1406(KM108353))、QIAP1401(KX793713))同为一群。XJ-SW株与广东GD/03/2012((KP870115))、GD/2011株(KP870115)同为一群;3株PEDV ORF3基因序列与疫苗株(CV777)序列比对多个位点存在突变,序列相似性较低。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 遗传进化 S基因 ORF3基因 新疆石河子

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新疆生产建设兵团第十师羊小反刍兽疫抗体监测与评价 被引量：3

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作者 李军 黄佐兴 +5 位作者 李伟 侯小林 黄新 张宾 韩猛立 吴桐忠 《草食家畜》 2021年第2期31-36,共6页

为了评估新疆生产建设兵团第十师北屯市(以下简称师市)羊群小反刍兽疫强制免疫效果,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2017-2020年全师8个农牧团场采集的4 010份血清进行小反刍兽疫抗体检测,并按单位、年份、类别对检测结果进行了统计分析... 为了评估新疆生产建设兵团第十师北屯市(以下简称师市)羊群小反刍兽疫强制免疫效果,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2017-2020年全师8个农牧团场采集的4 010份血清进行小反刍兽疫抗体检测,并按单位、年份、类别对检测结果进行了统计分析。结果表明,2018-2020年全师8个农牧团场小反刍兽疫血清抗体平均合格率为84.69%(3 396/4 010),均符合国家农业农村部相关规定,高于平均值的三家单位是E 87.22%(157/180)、G 86.45%(268/310)、H 88.67%(798/900),合格率最低的是D 76.11%(137/180);养殖合作社的抗体合格率为84.81%(1 340/1 580),养殖大户为84.65%(2 057/2 430)均接近于平均合格率,两者差异不显著(P>0.05)。总体来看,师市羊群小反刍兽疫免疫效果较好,为确保师市辖区内重大动物疫病免疫无疫提供技术保障。 展开更多

关键词 羊 小反刍兽疫 抗体监测

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MC1R基因多态性与其肤色、胫色表型相关性的分析 被引量：5

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作者 王建 钟发刚 吴桐忠 《国外畜牧学（猪与禽）》 2008年第2期75-77,共3页

利用引进的隐性白羽肉鸡和黑羽乌骨鸡的资源家系及由该亲本建立的资源家系群体,对MC1R基因的进行PCR-SSCP分析,分析其性状与基因型的相关性,并对检测到的基因型与肤色和胫色性状进行卡方独立性检验,结果表明:AA、BB和AB各基因型分布在... 利用引进的隐性白羽肉鸡和黑羽乌骨鸡的资源家系及由该亲本建立的资源家系群体,对MC1R基因的进行PCR-SSCP分析,分析其性状与基因型的相关性,并对检测到的基因型与肤色和胫色性状进行卡方独立性检验,结果表明:AA、BB和AB各基因型分布在不同肤色性状中差异显著(P<0.05);CC和CE基因型分布在不同活体胫色性状中差异显著(P<0.05)。 展开更多

关键词 MCIR基因 肤色 胫色 PCR—SSCP

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中国黑凤鸡马立克氏肿瘤的定量组织学观察

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作者 刘辉 王丽琴 +1 位作者 王健 吴桐忠 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第8期16-16,共1页

中国黑凤鸡马立克氏肿瘤的定量组织学观察刘辉王丽琴王健吴桐忠（新疆农垦科学院畜牧兽医研究所，石河子８３２０００）中国黑凤鸡是近年育成的一个特禽品种，于１９９４年引入新疆。该鸡易患马立克氏肿瘤病，据报道，中国黑凤鸡马立克... 中国黑凤鸡马立克氏肿瘤的定量组织学观察刘辉王丽琴王健吴桐忠（新疆农垦科学院畜牧兽医研究所，石河子８３２０００）中国黑凤鸡是近年育成的一个特禽品种，于１９９４年引入新疆。该鸡易患马立克氏肿瘤病，据报道，中国黑凤鸡马立克氏肿瘤的发病率为１０％～３０％，病... 展开更多

关键词 黑凤鸡 马立克氏肿瘤 定量组织 观察

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新疆牛源溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性和毒力分析 被引量：22

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作者 贾开文 操义恒 +8 位作者 王子杰 胡亚辉 周霞 黄新 钟发刚 吴桐忠 韩猛立 张星星 张倩 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期201-206,共6页

为鉴定新疆石河子地区某规模化牛场表现呼吸道感染症状荷斯坦病牛的细菌性病原及其分离株的血清型、耐药基因和毒力基因携带情况,本研究无菌采集病死牛病变组织,采用常规细菌分离培养及PCR方法鉴定细菌,采用PCR方法检测其血清型、耐药... 为鉴定新疆石河子地区某规模化牛场表现呼吸道感染症状荷斯坦病牛的细菌性病原及其分离株的血清型、耐药基因和毒力基因携带情况,本研究无菌采集病死牛病变组织,采用常规细菌分离培养及PCR方法鉴定细菌,采用PCR方法检测其血清型、耐药基因和毒力基因携带情况,采用K-B纸片法检测其耐药表型。结果显示,从病变组织样品中分离了4株荚膜A1型的溶血性曼氏杆菌(Mh-1、Mh-2、Mh-3、Mh-4);耐药表型显示4株Mh对β-内酰胺类(青霉素)、氨基糖苷类(链霉素)和糖肽类(替考拉宁)药物耐药;耐药基因仅检测到β-内酰胺类基因blaTEM;分离菌株Mh-1携带8类9种毒力基因中的5种(LKT-C、gs60、fbpA、gapA、ptfA),Mh-2携带其中的4种(LKT-C、plpB、dnaN、ptfA),Mh-3携带其中的7种(LKT-C、plpB、gs60、fbpA、gapA、dnaN、ptfA),Mh-4携带其中的6种(LKT-C、plpB、gs60、fbpA、gapA、ptfA)。同时分离出1株荚膜A型,脂多糖L3型的多杀性巴氏杆菌(Pm-1);Pm-1仅对克林霉素耐药;Pm-1携带6类12种不同的毒力基因(exbD、tonB、hsf2、ptfA、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、nanB、tbpA、pmHAS)。将Mh和Pm-1均以3.2×10^(8) cfu/mL的剂量感染30只小鼠进行致病性试验,结果显示,4株Mh感染小鼠于3 d内陆续全部死亡,Pm-1感染小鼠于10 h内全部死亡,表明分离菌株Mh和Pm-1均携带致病性毒力基因,且具有较强的致病性。结果表明,新疆石河子地区某集约化牛场表现为呼吸道症状病死牛的细菌性病原是牛源Mh和Pm混合感染,两者均携带与呼吸道粘附侵染相关的IV型菌毛基因ptfA,且Pm-1株主要对青、链霉素耐药,对大多数药物较敏感,为本地区牛呼吸道疾病综合征的流行病学调查与临床治疗提供参考依据。 展开更多

关键词 牛呼吸道感染 多杀性巴氏杆菌 溶血性曼氏杆菌 耐药表型 耐药基因和毒力基因

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