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条件性胰岛β细胞HLF基因敲除小鼠构建与鉴定
1
作者
侯梦龙
齐心语
+4 位作者
吴建凤
廖启超
马杰
周磊
李一星
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第8期1432-1439,共8页
目的为了探究肝白血病因子(HLF)在糖尿病中的作用机制,构建条件性胰岛β细胞HLF基因敲除小鼠动物模型。方法在细胞水平上,通过CCK-8试验验证HLF抑制或过表达对MIN6细胞增殖的影响。通过RT-qPCR和Western blot,分别在mRNA水平和蛋白水平...
目的为了探究肝白血病因子(HLF)在糖尿病中的作用机制,构建条件性胰岛β细胞HLF基因敲除小鼠动物模型。方法在细胞水平上,通过CCK-8试验验证HLF抑制或过表达对MIN6细胞增殖的影响。通过RT-qPCR和Western blot,分别在mRNA水平和蛋白水平检测HLF抑制或过表达效果。将HLF flox/flox转基因小鼠与Pdx1-Cre+/-小鼠(C57BL/6J)杂交繁育,获得子代小鼠。利用PCR方法鉴定小鼠基因型,通过RT-qPCR技术和Western blot检测HLF基因在胰岛β细胞敲除小鼠(HLF flox/flox Cre+/-)和对照小鼠(HLF flox/flox)中的mRNA水平和蛋白水平表达差异,验证敲除效果。同时取2组小鼠的胰岛组织制作石蜡切片并进行苏木精-伊红(HE)染色分析。结果HLF基因抑制或过表达对MIN6细胞增殖无显著影响。在MIN6细胞中抑制HLF基因,其mRNA表达水平较对照组下降了74%,蛋白表达水平较对照组下降了60%;过表达HLF基因后,其mRNA表达水平为对照组的2.13倍,蛋白表达水平为对照组的1.8倍。敲除小鼠的HLF基因mRNA表达水平较对照组下降了89%,蛋白表达水平较对照组下降了65%。HE染色结果显示:敲除小鼠胰岛组织内细胞形态与对照小鼠无明显差异。抑制HLF使MIN6细胞中糖原含量提高约20%。结论成功构建HLF基因敲除小鼠,为研究HLF在糖尿病发病机制中的作用提供了动物模型。
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关键词
肝白血病因子
条件性胰岛β细胞
RT-QPCR
Western
blot
基因敲除
C57BL/6J小鼠
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职称材料
温热地区竹荪栽培的气象条件及适用技术探讨
2
作者
朱伯伦
吴登秀
吴建凤
《贵州农业科学》
CAS
1994年第1期46-49,共4页
本文探讨了温热地区竹荪生育的气候生态条件及温湿度指标,指出竹荪不仅可在温凉地区种植,而且在温热地区也有发展前景,提出了温热地区竹荪栽培的适用技术。
关键词
温热地区
竹荪
栽培
气象条件
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职称材料
题名
条件性胰岛β细胞HLF基因敲除小鼠构建与鉴定
1
作者
侯梦龙
齐心语
吴建凤
廖启超
马杰
周磊
李一星
机构
广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室
出处
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第8期1432-1439,共8页
基金
国家重点研发计划项目(编号:2023YFE0100800)。
文摘
目的为了探究肝白血病因子(HLF)在糖尿病中的作用机制,构建条件性胰岛β细胞HLF基因敲除小鼠动物模型。方法在细胞水平上,通过CCK-8试验验证HLF抑制或过表达对MIN6细胞增殖的影响。通过RT-qPCR和Western blot,分别在mRNA水平和蛋白水平检测HLF抑制或过表达效果。将HLF flox/flox转基因小鼠与Pdx1-Cre+/-小鼠(C57BL/6J)杂交繁育,获得子代小鼠。利用PCR方法鉴定小鼠基因型,通过RT-qPCR技术和Western blot检测HLF基因在胰岛β细胞敲除小鼠(HLF flox/flox Cre+/-)和对照小鼠(HLF flox/flox)中的mRNA水平和蛋白水平表达差异,验证敲除效果。同时取2组小鼠的胰岛组织制作石蜡切片并进行苏木精-伊红(HE)染色分析。结果HLF基因抑制或过表达对MIN6细胞增殖无显著影响。在MIN6细胞中抑制HLF基因,其mRNA表达水平较对照组下降了74%,蛋白表达水平较对照组下降了60%;过表达HLF基因后,其mRNA表达水平为对照组的2.13倍,蛋白表达水平为对照组的1.8倍。敲除小鼠的HLF基因mRNA表达水平较对照组下降了89%,蛋白表达水平较对照组下降了65%。HE染色结果显示:敲除小鼠胰岛组织内细胞形态与对照小鼠无明显差异。抑制HLF使MIN6细胞中糖原含量提高约20%。结论成功构建HLF基因敲除小鼠,为研究HLF在糖尿病发病机制中的作用提供了动物模型。
关键词
肝白血病因子
条件性胰岛β细胞
RT-QPCR
Western
blot
基因敲除
C57BL/6J小鼠
Keywords
hepatic leukemia factor
conditional isletβcells
RT-qPCR
Western blot
gene knockout
C57BL/6J mice
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
温热地区竹荪栽培的气象条件及适用技术探讨
2
作者
朱伯伦
吴登秀
吴建凤
机构
铜仁地区气象局
出处
《贵州农业科学》
CAS
1994年第1期46-49,共4页
文摘
本文探讨了温热地区竹荪生育的气候生态条件及温湿度指标,指出竹荪不仅可在温凉地区种植,而且在温热地区也有发展前景,提出了温热地区竹荪栽培的适用技术。
关键词
温热地区
竹荪
栽培
气象条件
Keywords
temperate-hot area
meteorological factors
cultivation of Dictyophora phalloidea
applicable technique
分类号
S646.904 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
条件性胰岛β细胞HLF基因敲除小鼠构建与鉴定
侯梦龙
齐心语
吴建凤
廖启超
马杰
周磊
李一星
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
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职称材料
2
温热地区竹荪栽培的气象条件及适用技术探讨
朱伯伦
吴登秀
吴建凤
《贵州农业科学》
CAS
1994
0
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职称材料
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