检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析被引量：4: 1; 作者吴刘成刘春 +2 位作者蒋荧梅王生存邵义祥《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期1-5,共5页; 对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增... 展开更多; 关键词 B6-Co突变系小鼠 Map3k1基因 PCR扩增序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

三种抗球虫药物对家兔CYP1A2 mRNA和蛋白表达的影响被引量：1: 2; 作者刘春吴刘成 +1 位作者王胜洁邵义祥《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第7期69-73,共5页; 利用Real-time PCR和Western blot分别检测抗球虫药物磺胺喹噁啉、氯苯胍和妥曲珠利对家兔肝脏、肾脏、十二指肠中CYP1A2mRNA和蛋白表达的影响。40只新西兰白兔分为空白对照组、磺胺喹噁啉处理组、氯苯胍处理组和妥曲珠利处理组。空白... 展开更多; 关键词磺胺喹噁啉氯苯胍妥曲珠利家兔 CYP1A2; 在线阅读下载PDF 职称材料

应用16S rDNA克隆文库法分析B6-Co小鼠角膜炎细菌组成被引量：1: 3; 作者宋鸿雁仇保丰 +6 位作者刘春朱顺星缪进王生存吴刘成王旭邵义祥《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第12期1124-1127,共4页; 目的鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,并与人类细菌性角膜炎病原菌组成进行比较分析。方法选取10 d龄B6小鼠和B6-Co小鼠各6只为实验动物,提取小鼠角膜组织刮取物细菌基因组DNA,通过PCR扩增构建16S rDNA克隆文库,采用随机测序法分析... 展开更多; 关键词细菌性角膜炎 16S r DNA克隆文库细菌组成 B6-Co小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白磷酸酶2A催化亚基α在小鼠胚胎成纤维细胞迁移中的作用研究被引量：1: 4; 作者王庆华王生存 +4 位作者李斌刘春吴刘成王旭邵义祥《动物医学进展》北大核心 2016年第6期49-54,共6页; 利用体外基因敲除技术检测小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)周期和迁移能力的变化,探究蛋白磷酸酶2A的Cα亚基在MEFs细胞迁移过程中的作用。用Cαfl/fl的纯合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取E12.5d的胚胎制作小鼠胚胎成... 展开更多; 关键词蛋白磷酸酶2A 小鼠胚胎成纤维细胞细胞迁移细胞周期; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞凋亡过程中的作用被引量：1: 5; 作者王庆华王生存 +5 位作者李斌刘春吴刘成王旭彭晓清邵义祥《动物医学进展》北大核心 2016年第2期64-69,共6页; 为探究蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞(MEFs)凋亡过程中的作用,用Cβ+/-的杂合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取胚胎期12.5d(E12.5)的胚胎制备MEFs,用PCR、RT-PCR和Western blot方法进行基因型鉴定。同时对P3代MEFs利用流式分选技术检... 展开更多; 关键词胚胎成纤维细胞细胞凋亡细胞周期; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析被引量：4: 1; 作者吴刘成刘春蒋荧梅王生存邵义祥; 机构南通大学实验动物中心南通大学比较医学研究所; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期1-5,共5页; 基金国家自然科学基金项目(30671081) 江苏省自然科学基金项目(BK2010279) +1 种基金南通大学研究生科技创新计划项目; 文摘对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增目的基因,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,质粒DNA分子提取,电泳检测,EcoRⅠ酶切释放目的片段,送上海生工生物工程技术服务有限公司测序。成功扩增出Map3k1基因的20个外显子和上游调控序列,B6-Co小鼠测序结果与基因组数据库序列比对,该基因位于13号染色体第112 559 574的碱基由T突变为A,编码的蛋白质第314氨基酸由亮氨酸变为谷氨酸,但是该基因的表达调控及蛋白质剪切机制仍有待深入研究。; 关键词 B6-Co突变系小鼠 Map3k1基因 PCR扩增序列分析; Keywords B6-Co mutant strain mouse Map3k1 gene PCR amplification sequence analysis; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名三种抗球虫药物对家兔CYP1A2 mRNA和蛋白表达的影响被引量：1: 2; 作者刘春吴刘成王胜洁邵义祥; 机构扬州大学兽医学院南通大学实验动物中心; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第7期69-73,共5页; 基金南通市科技创新计划(AS2010020) 南通大学研究生科技创新计划(YKC13053); 文摘利用Real-time PCR和Western blot分别检测抗球虫药物磺胺喹噁啉、氯苯胍和妥曲珠利对家兔肝脏、肾脏、十二指肠中CYP1A2mRNA和蛋白表达的影响。40只新西兰白兔分为空白对照组、磺胺喹噁啉处理组、氯苯胍处理组和妥曲珠利处理组。空白对照组家兔饲喂正常颗粒饲料,磺胺喹噁啉处理组饲喂含25mg/kg浓度磺胺喹噁啉的颗粒饲料,氯苯胍处理组饲喂含66mg/kg浓度氯苯胍的颗粒饲料,妥曲珠利处理组饲喂含2mg/kg浓度妥曲珠利的颗粒饲料,连续30d。在第31天无菌条件下取出动物的部分肝脏、肾脏以及十二指肠,提取RNA、蛋白分别进行Real-time PCR、Western blot检测。Real-time PCR的结果表明,磺胺喹噁啉、氯苯胍和妥曲珠利都能够诱导家兔肝脏和肾脏CYP1A2mRNA的表达,而妥曲珠利能够显著的抑制十二指肠CYP1A2mRNA的表达。Western blot结果表明,磺胺喹噁啉、氯苯胍和妥曲珠利能够显著的诱导家兔肝脏CYP1A2蛋白水平的表达;磺胺喹噁啉显著的诱导肾脏和十二指肠CYP1A2蛋白表达,而氯苯胍能够显著的抑制肾脏CYP1A2蛋白的表达。结果提示,磺胺喹噁啉、氯苯胍和妥曲珠利对家兔CYP1A2mRNA和蛋白水平的表达均具有组织特异性,在不同的组织器官呈现出显著的诱导和抑制作用。; 关键词磺胺喹噁啉氯苯胍妥曲珠利家兔 CYP1A2; Keywords sulfaquinoxaline robenidine toltrazuril rabbit CYP1A2; 分类号 S852.723 [农业科学—基础兽医学] Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用16S rDNA克隆文库法分析B6-Co小鼠角膜炎细菌组成被引量：1: 3; 作者宋鸿雁仇保丰刘春朱顺星缪进王生存吴刘成王旭邵义祥; 机构南通大学实验动物中心南通大学比较医学研究所南通出入境检验检疫局动检科; 出处《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第12期1124-1127,共4页; 基金江苏省自然科学基金项目(编号:BK2010279) 江苏省高校自然科学基金项目(编号:13KJB180019) 南通大学自然科学类科研基金项目(编号:12R082)~~; 文摘目的鉴定B6-Co突变系小鼠角膜的病原菌组成,并与人类细菌性角膜炎病原菌组成进行比较分析。方法选取10 d龄B6小鼠和B6-Co小鼠各6只为实验动物,提取小鼠角膜组织刮取物细菌基因组DNA,通过PCR扩增构建16S rDNA克隆文库,采用随机测序法分析B6-Co小鼠角膜细菌组成,B6小鼠作为对照。结果 B6-Co角膜混浊小鼠中共鉴定出20种细菌,隶属于15个属,包括葡萄球菌属、假单胞菌属、链球菌属、微球菌属、棒状杆菌属等。葡萄球菌属和假单胞菌属为优势群,葡萄球菌属丰度为19.7%~53.1%,假单胞菌属的丰度为17.4%~32.8%。其中葡萄球菌属主要是表皮葡萄球菌,丰度为13.8%~20.9%;缓慢葡萄球菌,丰度为14.0%~30.9%;金黄色葡萄球菌,丰度为7.4%~20.3%。此外,棒状杆菌和微球菌也比较常见。10 d龄B6小鼠未检测出细菌。结论 B6-Co突变系小鼠角膜细菌组成与人类角膜炎病原菌相似,是研究人类角膜炎诊断方法、发病机理及临床用药的很好的动物模型。; 关键词细菌性角膜炎 16S r DNA克隆文库细菌组成 B6-Co小鼠; Keywords bacteria keratitis 15S rDNA clone library bacteria composition; 分类号 R772.21 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白磷酸酶2A催化亚基α在小鼠胚胎成纤维细胞迁移中的作用研究被引量：1: 4; 作者王庆华王生存李斌刘春吴刘成王旭邵义祥; 机构南通大学实验动物中心南通大学附属医院儿科; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第6期49-54,共6页; 基金江苏省高校自然科学研究项目(11KJB180010) 江苏省高校自然科学研究项目(14KJB180018) 江苏省高校自然科学研究项目(15KJB180015); 文摘利用体外基因敲除技术检测小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)周期和迁移能力的变化,探究蛋白磷酸酶2A的Cα亚基在MEFs细胞迁移过程中的作用。用Cαfl/fl的纯合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取E12.5d的胚胎制作小鼠胚胎成纤维细胞。利用表达Cre重组酶(Ad-Cre-EGFP)以及GFP荧光蛋白(Ad-EGFP)的腺病毒载体,对P3代MEFs进行感染,分别用PCR,RT-PCR和Western blot方法进行基因型鉴定。同时利用流式分选技术检测感染后MEFs的细胞周期的变化,利用细胞划痕试验检测了其细胞迁移能力的变化。结果显示,胰酶消化的方法成功获得了小鼠胚胎成纤维细胞,DNA,RNA和蛋白水平的鉴定获得了3对3的野生型和基因敲除MEFs。流式分选发现Ad-Cre处理的MEFs与Ad-EGFP处理的MEFs相比,处于G2期的细胞比例为30.8%±2.57%,高于Ad-EGFP MEFs的23.9%±2.46%,并且细胞碎片的比例也远高于后者。划痕试验表明,Cα亚基缺失后细胞迁移能力下降,12h就显著低于对照组。结果表明,腺病毒携带的Cre重组酶能够在体外有效地敲除掉MEFs中的蛋白磷酸酶2A的Cα亚基,PP2ACα亚基的缺失会导致MEFs细胞周期倾向于阻滞在G2期,并会降低细胞迁移的能力。; 关键词蛋白磷酸酶2A 小鼠胚胎成纤维细胞细胞迁移细胞周期; Keywords protein phosphatase 2A mouse embryonic fibroblast cell migration cell cycle; 分类号 S852.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞凋亡过程中的作用被引量：1: 5; 作者王庆华王生存李斌刘春吴刘成王旭彭晓清邵义祥; 机构南通大学实验动物中心南通大学附属医院儿科; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第2期64-69,共6页; 基金江苏省高校自然科学研究面上项目(11KJB180010 14KJB180018 15KJB180015); 文摘为探究蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞(MEFs)凋亡过程中的作用,用Cβ+/-的杂合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取胚胎期12.5d(E12.5)的胚胎制备MEFs,用PCR、RT-PCR和Western blot方法进行基因型鉴定。同时对P3代MEFs利用流式分选技术检测其细胞凋亡和细胞周期的变化,并采用Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果采用胰酶消化方法成功获得了MEFs,DNA、RNA和蛋白水平鉴定显示获得了3对3的野生型和Cβ基因敲除MEFs。流式分选发现Cβ基因敲除MEFs和野生型之间细胞分裂期前期(M1期)细胞分别为53.95%±2.81和46.94%±4.17,细胞分裂期后期(M2期)细胞分别为21.14%±2.53和29.83%±3.25。但Bcl-2的蛋白表达量和mRNA表达量没有显著差异。结果表明,虽然蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基的缺失并不会导致小鼠胚胎死亡,但Cβ亚基的缺失会轻微影响胚胎成纤维细胞(MEFs)的细胞周期。; 关键词胚胎成纤维细胞细胞凋亡细胞周期; Keywords mouse embryonic fibroblast cell apoptosis cell cycle; 分类号 S852.33 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析	吴刘成刘春蒋荧梅王生存邵义祥	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	三种抗球虫药物对家兔CYP1A2 mRNA和蛋白表达的影响	刘春吴刘成王胜洁邵义祥	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	应用16S rDNA克隆文库法分析B6-Co小鼠角膜炎细菌组成	宋鸿雁仇保丰刘春朱顺星缪进王生存吴刘成王旭邵义祥	《眼科新进展》 CAS 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蛋白磷酸酶2A催化亚基α在小鼠胚胎成纤维细胞迁移中的作用研究	王庆华王生存李斌刘春吴刘成王旭邵义祥	《动物医学进展》北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞凋亡过程中的作用	王庆华王生存李斌刘春吴刘成王旭彭晓清邵义祥	《动物医学进展》北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料