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汉坦病毒重组核蛋白抗体用于鼠肺组织病毒抗原的检测
被引量:
3
1
作者
赵凤玲
陈锦英
+2 位作者
吕莉琨
杨东靖
李力
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期510-513,共4页
目的纯化汉坦病毒(HV)SEO型L99株重组核蛋白(rNP),制备抗体用于鼠肺组织HV抗原的检测。方法重组菌株E.coliBL21(DE3)/pET32a-L99S经IPTG诱导表达rNP,采用Ni亲和层析方法纯化,纯化蛋白免疫日本大耳白兔,获取抗血清用于间接免疫荧光法(IFA...
目的纯化汉坦病毒(HV)SEO型L99株重组核蛋白(rNP),制备抗体用于鼠肺组织HV抗原的检测。方法重组菌株E.coliBL21(DE3)/pET32a-L99S经IPTG诱导表达rNP,采用Ni亲和层析方法纯化,纯化蛋白免疫日本大耳白兔,获取抗血清用于间接免疫荧光法(IFA)检测鼠肺组织的HV抗原;并与病人混合血清作为一抗的IFA结果进行比较,部分标本进一步用RT-PCR法进行验证。结果rNP表达量占菌体总蛋白的52.2%,纯化蛋白的总回收率为22.9%;纯化蛋白Western blot分析为单带,纯度达95%以上,用其制备多克隆抗体滴度达1∶512000。IFA检测59份鼠肺标本,用兔rNP抗体和病人混合血清作为一抗其阳性率分别为23.7%和16.9%;两者结果不一致的6份鼠肺经RT-PCR检测HV核酸,均与兔rNP抗体的IFA结果相一致。结论采用rNP抗体进行IFA检测,可显著地提高鼠类HV感染监测的准确性,值得推广使用。
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关键词
汉坦病毒
重组核蛋白
鼠肺
间接免疫荧光
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题名
汉坦病毒重组核蛋白抗体用于鼠肺组织病毒抗原的检测
被引量:
3
1
作者
赵凤玲
陈锦英
吕莉琨
杨东靖
李力
机构
天津医科大学基础医学院
天津市疾病预防控制中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期510-513,共4页
基金
天津市科技发展计划项目(No.043113511)
文摘
目的纯化汉坦病毒(HV)SEO型L99株重组核蛋白(rNP),制备抗体用于鼠肺组织HV抗原的检测。方法重组菌株E.coliBL21(DE3)/pET32a-L99S经IPTG诱导表达rNP,采用Ni亲和层析方法纯化,纯化蛋白免疫日本大耳白兔,获取抗血清用于间接免疫荧光法(IFA)检测鼠肺组织的HV抗原;并与病人混合血清作为一抗的IFA结果进行比较,部分标本进一步用RT-PCR法进行验证。结果rNP表达量占菌体总蛋白的52.2%,纯化蛋白的总回收率为22.9%;纯化蛋白Western blot分析为单带,纯度达95%以上,用其制备多克隆抗体滴度达1∶512000。IFA检测59份鼠肺标本,用兔rNP抗体和病人混合血清作为一抗其阳性率分别为23.7%和16.9%;两者结果不一致的6份鼠肺经RT-PCR检测HV核酸,均与兔rNP抗体的IFA结果相一致。结论采用rNP抗体进行IFA检测,可显著地提高鼠类HV感染监测的准确性,值得推广使用。
关键词
汉坦病毒
重组核蛋白
鼠肺
间接免疫荧光
Keywords
Hantavirus
recombinant nucleocapsid protein
murine lung
IFA
分类号
R511 [医药卫生—内科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
汉坦病毒重组核蛋白抗体用于鼠肺组织病毒抗原的检测
赵凤玲
陈锦英
吕莉琨
杨东靖
李力
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
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