目的基于动物实验探讨IGF1基因慢病毒转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗骨性关节炎(OA)的作用。方法取40只SPF级雄性Wistar大鼠,10~12周龄,体重280~320 g,按照随机数字表法分为BMSCs+IGF1组、BMSCs组、模型组,每组10只,采用膝关节前交叉...目的基于动物实验探讨IGF1基因慢病毒转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗骨性关节炎(OA)的作用。方法取40只SPF级雄性Wistar大鼠,10~12周龄,体重280~320 g,按照随机数字表法分为BMSCs+IGF1组、BMSCs组、模型组,每组10只,采用膝关节前交叉韧带切断法建立OA模型,其余10只大鼠用于BMSCs的分离。BMSCs+IGF1组大鼠膝关节腔内注射0.1 ml IGF1基因慢病毒转染BMSCs(1×107个),BMSCs组大鼠膝关节腔内注射0.1 ml BMSCs(1×107个);模型组大鼠膝关节腔内注射0.1 ml生理盐水。采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)、CTX-Ⅱ、白介素(IL)-1α、IL-6水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测大鼠膝关节软骨组织中骨钙素(OC)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达水平;采用Western blot检测大鼠膝关节软骨组织中β-catenin、Wnt1、GSK-3β的蛋白表达水平。结果BMSCs表面抗原CD29、CD34、CD45、CD105高表达,慢病毒转染效率(90.36±2.18)%;BMSCs+IGF1组大鼠膝关节软骨完整,无明显退化,关节面平整,其他两组均存在不同程度软骨退变,关节面不平。与模型组比较,BMSCs组血清CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ、IL-1α、IL-6水平,OC、GSK-3β、ALP、Runx2 mRNA表达水平,β-catenin、Wnt1、GSK-3β蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与BMSCs组比较,BMSCs+IGF1组以上指标均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IGF1基因慢病毒转染BMSCs能有效改善OA大鼠的病理损伤,能明显促进膝关节损伤修复。展开更多
文摘目的基于动物实验探讨IGF1基因慢病毒转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗骨性关节炎(OA)的作用。方法取40只SPF级雄性Wistar大鼠,10~12周龄,体重280~320 g,按照随机数字表法分为BMSCs+IGF1组、BMSCs组、模型组,每组10只,采用膝关节前交叉韧带切断法建立OA模型,其余10只大鼠用于BMSCs的分离。BMSCs+IGF1组大鼠膝关节腔内注射0.1 ml IGF1基因慢病毒转染BMSCs(1×107个),BMSCs组大鼠膝关节腔内注射0.1 ml BMSCs(1×107个);模型组大鼠膝关节腔内注射0.1 ml生理盐水。采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)、CTX-Ⅱ、白介素(IL)-1α、IL-6水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测大鼠膝关节软骨组织中骨钙素(OC)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达水平;采用Western blot检测大鼠膝关节软骨组织中β-catenin、Wnt1、GSK-3β的蛋白表达水平。结果BMSCs表面抗原CD29、CD34、CD45、CD105高表达,慢病毒转染效率(90.36±2.18)%;BMSCs+IGF1组大鼠膝关节软骨完整,无明显退化,关节面平整,其他两组均存在不同程度软骨退变,关节面不平。与模型组比较,BMSCs组血清CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ、IL-1α、IL-6水平,OC、GSK-3β、ALP、Runx2 mRNA表达水平,β-catenin、Wnt1、GSK-3β蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与BMSCs组比较,BMSCs+IGF1组以上指标均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IGF1基因慢病毒转染BMSCs能有效改善OA大鼠的病理损伤,能明显促进膝关节损伤修复。
