期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建
被引量：
4
1
作者
沙珍霞
刘洋
+4 位作者
陈松林
叶寒清
田永胜
孟亮
唐启升
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期186-190,共5页
旨在通过花鲈胚胎干细胞（LJESl）移植构建嵌合体，证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性。采用脂质体介导法将线性化pCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内，细胞绿色荧光蛋白（GFP）的表达率为5％～10％，以此为供体，通过显...
旨在通过花鲈胚胎干细胞（LJESl）移植构建嵌合体，证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性。采用脂质体介导法将线性化pCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内，细胞绿色荧光蛋白（GFP）的表达率为5％～10％，以此为供体，通过显微注射方法把20—50个LJES1细胞移植到花鲈囊胚中，共移植囊胚478枚，获得了20枚表达GFP的嵌合体胚胎，其中的15枚胚胎发育成鱼苗。荧光显微观察和PCR检测显示了LJES1细胞可在宿主胚胎内片状嵌合和单细胞分散嵌合，嵌合部位可分布于胚体的三个胚层；同时也证明GFP是一种优良的遗传标记。本实验结果为证实LJES1细胞的发育全能性提供了有力证据。
展开更多
关键词
花鲈胚胎干细胞(LJES1)
绿色荧光蛋白(GFP)
细胞移植
显微注射
嵌合体
在线阅读
下载PDF
职称材料
Golph2蛋白质的原核表达及多克隆抗体制备
2
作者
谭龙益
陈洁
+4 位作者
王皓
叶寒清
厉倩
顾继安
孔宪涛
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期443-445,449,共4页
目的:新近发现Golph2蛋白与肝癌关系密切,制备Golph2重组蛋白质和多克隆抗体,建立Western blot检测技术,为后续研究提供基础。方法:RT-PCR从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列,PCR回复突变制备全长完整基因(1206bp),将其插入至原核...
目的:新近发现Golph2蛋白与肝癌关系密切,制备Golph2重组蛋白质和多克隆抗体,建立Western blot检测技术,为后续研究提供基础。方法:RT-PCR从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列,PCR回复突变制备全长完整基因(1206bp),将其插入至原核表达载体pET-21、转化大肠杆菌DH5a,IPTG诱导表达,镍柱亲和层析纯化蛋白,SDS-PAGE鉴定。将纯化蛋白质免疫家兔,制备多克隆抗血清。建立Western blot鉴定重组蛋白和抗血清特异性,测定临床血清标本中Golph2蛋白水平。结果:从肝癌细胞中钓取的基因,出现2个碱基置换突变和1个碱基缺失突变,经回复突变,获得与NM177937完全一致序列。SDS-PAGE和Western blot证实,重组Golph2蛋白质与预期结果一致。抗血清能够特异地识别52kD重组蛋白质和73kD血清蛋白质。结论:Golph2蛋白质表达和抗血清制备完全成功。
展开更多
关键词
Golph2蛋白质
多克隆抗体
蛋白质表达
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建
被引量：
4
1
作者
沙珍霞
刘洋
陈松林
叶寒清
田永胜
孟亮
唐启升
机构
中国海洋大学海洋生命学院
中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室
出处
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期186-190,共5页
基金
国家自然科学基金（30170740）和863计划（2004AA626110）资助项目.
文摘
旨在通过花鲈胚胎干细胞（LJESl）移植构建嵌合体，证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性。采用脂质体介导法将线性化pCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内，细胞绿色荧光蛋白（GFP）的表达率为5％～10％，以此为供体，通过显微注射方法把20—50个LJES1细胞移植到花鲈囊胚中，共移植囊胚478枚，获得了20枚表达GFP的嵌合体胚胎，其中的15枚胚胎发育成鱼苗。荧光显微观察和PCR检测显示了LJES1细胞可在宿主胚胎内片状嵌合和单细胞分散嵌合，嵌合部位可分布于胚体的三个胚层；同时也证明GFP是一种优良的遗传标记。本实验结果为证实LJES1细胞的发育全能性提供了有力证据。
关键词
花鲈胚胎干细胞(LJES1)
绿色荧光蛋白(GFP)
细胞移植
显微注射
嵌合体
Keywords
sea perch （ Lateolabrax japonicus ） embryonic stem cells （LJES1）, green fluorescent protein （GFP）, cell transplantation, microinjection, chimera
分类号
S831.2 [农业科学—畜牧学]
Q813 [生物学—生物工程]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
Golph2蛋白质的原核表达及多克隆抗体制备
2
作者
谭龙益
陈洁
王皓
叶寒清
厉倩
顾继安
孔宪涛
机构
上海市第一人民医院宝山分院医学检验科
第二军医大学附属长征医院实验诊断科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期443-445,449,共4页
基金
国家自然科学基金资助(305771661)
文摘
目的:新近发现Golph2蛋白与肝癌关系密切,制备Golph2重组蛋白质和多克隆抗体,建立Western blot检测技术,为后续研究提供基础。方法:RT-PCR从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列,PCR回复突变制备全长完整基因(1206bp),将其插入至原核表达载体pET-21、转化大肠杆菌DH5a,IPTG诱导表达,镍柱亲和层析纯化蛋白,SDS-PAGE鉴定。将纯化蛋白质免疫家兔,制备多克隆抗血清。建立Western blot鉴定重组蛋白和抗血清特异性,测定临床血清标本中Golph2蛋白水平。结果:从肝癌细胞中钓取的基因,出现2个碱基置换突变和1个碱基缺失突变,经回复突变,获得与NM177937完全一致序列。SDS-PAGE和Western blot证实,重组Golph2蛋白质与预期结果一致。抗血清能够特异地识别52kD重组蛋白质和73kD血清蛋白质。结论:Golph2蛋白质表达和抗血清制备完全成功。
关键词
Golph2蛋白质
多克隆抗体
蛋白质表达
Keywords
Golph2
Polyclonal antibody
Expression of protein
分类号
R562 [医药卫生—呼吸系统]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建
沙珍霞
刘洋
陈松林
叶寒清
田永胜
孟亮
唐启升
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Golph2蛋白质的原核表达及多克隆抗体制备
谭龙益
陈洁
王皓
叶寒清
厉倩
顾继安
孔宪涛
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
