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miR-34a介导Bcl-2促原代听觉皮层神经元凋亡的作用
被引量：
4
1
作者
黄秋红
叶咏怡
郑亿庆
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2017年第12期625-628,共4页
目的探讨miR-34a通过下调Bcl-2表达,介导原代听觉皮层神经元凋亡在年龄相关性聋中枢发病机制中的可能作用。方法采用C57BL/6乳鼠,定位获得听觉皮层脑组织,进行原代神经元培养,并通过对原代神经元进行转染,过表达miR-34a或干扰下调miR-34...
目的探讨miR-34a通过下调Bcl-2表达,介导原代听觉皮层神经元凋亡在年龄相关性聋中枢发病机制中的可能作用。方法采用C57BL/6乳鼠,定位获得听觉皮层脑组织,进行原代神经元培养,并通过对原代神经元进行转染,过表达miR-34a或干扰下调miR-34a表达后,采用western blot进行靶基因Bcl-2蛋白水平检测,采用Hoechst染色行细胞凋亡检测。结果酶消化法可分离并获得原代皮层神经元,将原代神经元进行转染,采用western blot检测转染过表达miRNA-34a后Bcl-2表达情况,转染48 h和72 h后Bcl-2表达均下降,5 nmol/L浓度与阴性对照比较,差异有统计学意义(t=5.127,P<0.05),10 nmol/L与20 nmol/L浓度比较,差异有统计学意义(t=6.379,P<0.05)。抑制表达mi RNA-34a,Bcl-2表达均升高,5 nmol/L浓度与阴性对照比较,差异有统计学意义(t=4.926,P<0.05);10 nmol/L与20 nmol/L浓度比较,差异有统计学意义(t=5.821,P<0.05),免疫荧光检测Bcl-2表达也显示相似结果。细胞凋亡染色在过表达mi RNA-34a后,神经元核固缩,凋亡程度增加。结论 miR-34a通过下调Bcl-2表达,介导原代听觉皮层神经元凋亡,可能是年龄相关性聋中枢发病机制之一。
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关键词
动物实验
老年性聋
听觉皮质
神经元
细胞凋亡
B细胞淋巴瘤-2蛋白
在线阅读
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职称材料
B细胞淋巴瘤-2蛋白在年龄相关性聋小鼠耳蜗中的表达
被引量：
1
2
作者
黄秋红
黄子真
+1 位作者
叶咏怡
郑亿庆
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2017年第6期305-308,共4页
目的了解B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)在不同年龄段年龄相关性小鼠内耳中的表达量及部位的差异,为后续研究Bcl-2信号通路做准备。方法采用听性脑干反应(ABR)行听力水平测试,耳蜗基底膜铺片行毛细胞形态,数量观察,实时荧光定...
目的了解B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)在不同年龄段年龄相关性小鼠内耳中的表达量及部位的差异,为后续研究Bcl-2信号通路做准备。方法采用听性脑干反应(ABR)行听力水平测试,耳蜗基底膜铺片行毛细胞形态,数量观察,实时荧光定量、免疫荧光组织化学法和蛋白质印迹分析进行不同年龄段("年轻"组、"老年"组)C57BL/6小鼠耳蜗Bcl-2在mRNA和蛋白表达水平检测。结果 ABR两组比较,老年组小鼠平均阈值均高于年轻组,各频率差异均有统计学意义。耳蜗基底膜铺片两组比较,老年组耳蜗底转毛细胞排列紊乱且部分缺失,螺旋神经节细胞稀疏,排列凌乱。实时荧光定量结果提示Bcl-2在mRNA水平"老年"鼠耳蜗表达降低。免疫荧光组织化学法和蛋白质印迹分析提示Bcl-2在蛋白水平"老年"鼠耳蜗表达降低,且Bcl-2表达位于胞浆,内毛细胞表达高于外毛细胞。结论 Bcl-2在"老年"鼠耳蜗表达降低,且Bcl-2表达降低与耳蜗毛细胞缺失、听力下降可能具有相关性。
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关键词
动物实验
耳蜗
老年性聋
B细胞淋巴瘤-2蛋白
C57BL/6小鼠
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职称材料
题名
miR-34a介导Bcl-2促原代听觉皮层神经元凋亡的作用
被引量：
4
1
作者
黄秋红
叶咏怡
郑亿庆
机构
中山大学孙逸仙纪念医院耳鼻咽喉头颈外科中山大学听力及言语研究所
出处
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2017年第12期625-628,共4页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目(81400456)
文摘
目的探讨miR-34a通过下调Bcl-2表达,介导原代听觉皮层神经元凋亡在年龄相关性聋中枢发病机制中的可能作用。方法采用C57BL/6乳鼠,定位获得听觉皮层脑组织,进行原代神经元培养,并通过对原代神经元进行转染,过表达miR-34a或干扰下调miR-34a表达后,采用western blot进行靶基因Bcl-2蛋白水平检测,采用Hoechst染色行细胞凋亡检测。结果酶消化法可分离并获得原代皮层神经元,将原代神经元进行转染,采用western blot检测转染过表达miRNA-34a后Bcl-2表达情况,转染48 h和72 h后Bcl-2表达均下降,5 nmol/L浓度与阴性对照比较,差异有统计学意义(t=5.127,P<0.05),10 nmol/L与20 nmol/L浓度比较,差异有统计学意义(t=6.379,P<0.05)。抑制表达mi RNA-34a,Bcl-2表达均升高,5 nmol/L浓度与阴性对照比较,差异有统计学意义(t=4.926,P<0.05);10 nmol/L与20 nmol/L浓度比较,差异有统计学意义(t=5.821,P<0.05),免疫荧光检测Bcl-2表达也显示相似结果。细胞凋亡染色在过表达mi RNA-34a后,神经元核固缩,凋亡程度增加。结论 miR-34a通过下调Bcl-2表达,介导原代听觉皮层神经元凋亡,可能是年龄相关性聋中枢发病机制之一。
关键词
动物实验
老年性聋
听觉皮质
神经元
细胞凋亡
B细胞淋巴瘤-2蛋白
Keywords
Animal Experimentation
Presbycusis
Auditory Cortex
Neurons
Apoptosis
B cell lymphoma-2
分类号
R764.43 [医药卫生—耳鼻咽喉科]
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职称材料
题名
B细胞淋巴瘤-2蛋白在年龄相关性聋小鼠耳蜗中的表达
被引量：
1
2
作者
黄秋红
黄子真
叶咏怡
郑亿庆
机构
中山大学孙逸仙纪念医院耳鼻咽喉头颈外科
中山大学听力及言语研究所
中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科
出处
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2017年第6期305-308,共4页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目(81400456)
文摘
目的了解B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)在不同年龄段年龄相关性小鼠内耳中的表达量及部位的差异,为后续研究Bcl-2信号通路做准备。方法采用听性脑干反应(ABR)行听力水平测试,耳蜗基底膜铺片行毛细胞形态,数量观察,实时荧光定量、免疫荧光组织化学法和蛋白质印迹分析进行不同年龄段("年轻"组、"老年"组)C57BL/6小鼠耳蜗Bcl-2在mRNA和蛋白表达水平检测。结果 ABR两组比较,老年组小鼠平均阈值均高于年轻组,各频率差异均有统计学意义。耳蜗基底膜铺片两组比较,老年组耳蜗底转毛细胞排列紊乱且部分缺失,螺旋神经节细胞稀疏,排列凌乱。实时荧光定量结果提示Bcl-2在mRNA水平"老年"鼠耳蜗表达降低。免疫荧光组织化学法和蛋白质印迹分析提示Bcl-2在蛋白水平"老年"鼠耳蜗表达降低,且Bcl-2表达位于胞浆,内毛细胞表达高于外毛细胞。结论 Bcl-2在"老年"鼠耳蜗表达降低,且Bcl-2表达降低与耳蜗毛细胞缺失、听力下降可能具有相关性。
关键词
动物实验
耳蜗
老年性聋
B细胞淋巴瘤-2蛋白
C57BL/6小鼠
Keywords
Animal Experimentation
Cochlea
Presbycusis
B cell lymphoma-2
C57BL/6 mouse
分类号
R764.43 [医药卫生—耳鼻咽喉科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-34a介导Bcl-2促原代听觉皮层神经元凋亡的作用
黄秋红
叶咏怡
郑亿庆
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2017
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
B细胞淋巴瘤-2蛋白在年龄相关性聋小鼠耳蜗中的表达
黄秋红
黄子真
叶咏怡
郑亿庆
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2017
1
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