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绵羊多杀性巴氏杆菌A型、F型与溶血性曼氏杆菌A2型混合感染的诊断与防治 被引量:2
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作者 金映红 陈古丽 +8 位作者 李威 夏俊 汪萍 苗书魁 汪阳 李璋赟 古丽扎提·塔力甫汗 木克日木·帕尔哈提 薛晶 《草食家畜》 2022年第2期24-28,共5页
新疆某羊场的绵羊出现发热咳嗽、精神萎靡、食欲减退、嗜睡和呼吸困难等症状。经剖检和细菌分离鉴定、PCR鉴定、药敏实验和小鼠致病性试验等方法,分离到了3株革兰氏阴性球杆菌,根据形状和大小判断疑似多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌;PC... 新疆某羊场的绵羊出现发热咳嗽、精神萎靡、食欲减退、嗜睡和呼吸困难等症状。经剖检和细菌分离鉴定、PCR鉴定、药敏实验和小鼠致病性试验等方法,分离到了3株革兰氏阴性球杆菌,根据形状和大小判断疑似多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌;PCR鉴定方法有效扩增出1100 bp、875 bp和900 bp,3条目的条带,经测序与GenBank数据库中同源序列比对,3株菌分别为多杀性巴氏杆菌A型、F型和溶血性曼氏杆菌A2型;药敏试验显示,3株细菌的混合液对左旋氧氟沙星、乳酸环丙沙星敏感;小鼠致病性试验中,小鼠在18 h内陆续死亡,表明巴氏杆菌和曼氏杆菌毒力强。诊断结果为羊巴氏杆菌及曼氏杆菌感染的诊断和治疗提供参考。 展开更多
关键词 绵羊 多杀性巴氏杆菌 溶血性曼氏杆菌 诊断 防治
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新疆地区蓝舌病病毒的分离鉴定及编码VP5外壳蛋白的基因序列分析 被引量:1
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作者 马晓菁 薛晓波 +4 位作者 叶锋 刘丽娅 古丽扎提·塔力甫汗 谷文喜 易新萍 《草食家畜》 2022年第4期22-26,共5页
对分离的新疆蓝舌病病毒(BTV)株编码VP5蛋白的S6基因序列进行比对分析,旨在了解分离毒株的基因遗传变异及进化关系,以期为新疆地区蓝舌病疫苗研究提供科学依据。本研究对绵羊全血中分离的疑似BTV分离毒株,提取RNA进行NS1-PCR扩增,克隆... 对分离的新疆蓝舌病病毒(BTV)株编码VP5蛋白的S6基因序列进行比对分析,旨在了解分离毒株的基因遗传变异及进化关系,以期为新疆地区蓝舌病疫苗研究提供科学依据。本研究对绵羊全血中分离的疑似BTV分离毒株,提取RNA进行NS1-PCR扩增,克隆测序。应用全长cDNA扩增(full-length ampli-fication of cDNAs,FLAC)技术获得S6基因序列,NCBI Blast比对S6基因同源性,MEGA5.0软件绘制进化树,分析BTV新疆分离株与蓝舌病病毒28个血清型S6基因的序列遗传进化关系。结果表明,新疆地区疑似蓝舌病病毒分离株NS1片段与蓝舌病病毒NS1片段序列相似性为98.04%,获得1株蓝舌病病毒。BTV分离株S6基因序列仅与GenBank中BTV strain XJ1407株、BTV strainMNG2/2016株及BTV-18 strain USA2014/FL株的S6基因具有同源性,且同源性均低于90%,分别为88.11%,87.35%以及70.92%。BTV分离株S6基因序列进化关系分析结果表明,分离株与BTV-18血清型在同一进化分支,与BTV-27血清型亲缘关系最近。研究结果为新疆地区蓝舌病疫苗研制提供科学依据。 展开更多
关键词 蓝舌病 VP5蛋白 新疆分离株
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伯氏疏螺旋体TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法的建立及对新疆地区蜱的检测 被引量:1
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作者 王娅 叶锋 +6 位作者 刘丽娅 谢彩云 谷文喜 钟旗 易新萍 古丽扎提·塔力甫汗 马晓菁 《中国动物检疫》 CAS 2019年第11期89-94,99,共7页
为建立一种TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR方法,来快速、特异地检测伯氏疏螺旋体,根据GenBank发表的伯氏疏螺旋体16SrRNA序列,应用分子生物学软件进行比对,选取保守序列设计特异性引物及TaqMan-MGB探针,并优化荧光定量PCR反应体系及条件... 为建立一种TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR方法,来快速、特异地检测伯氏疏螺旋体,根据GenBank发表的伯氏疏螺旋体16SrRNA序列,应用分子生物学软件进行比对,选取保守序列设计特异性引物及TaqMan-MGB探针,并优化荧光定量PCR反应体系及条件,分别对大肠杆菌、沙门氏菌及钩端螺旋体进行扩增;构建伯氏疏螺旋体标准株16SrRNA基因片段阳性质粒,10倍系列稀释后进行real-timePCR扩增,测定该方法的敏感性。结果可见:仅伯氏疏螺旋体出现阳性扩增,而大肠杆菌、沙门氏菌及钩端螺旋体扩增均为阴性;该方法对阳性质粒的检测限约为100copies/μL。应用该方法对新疆地区的100份蜱DNA样本进行检测,发现7份为伯氏疏螺旋体阳性。结果表明,本研究建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法具有较高的特异性及良好的敏感性,为今后伯氏疏螺旋体的快速诊断及流行病学调查提供了技术支撑。 展开更多
关键词 伯氏疏螺旋体 TAQMAN-MGB探针 荧光定量PCR 检测 新疆
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