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小鼠B7-H4重组腺病毒的构建及鉴定 被引量:3
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作者 闫佩毅 姚航平 +3 位作者 钱韵 古丽娟 陶岚 张立煌 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2008年第5期499-505,共7页
目的:利用AdEasyTMXL system构建携带小鼠B7-H4基因的重组腺病毒,并鉴定其生物学活性。方法:以RT-PCR方法从C57小鼠肺组织中扩增B7-H4全长基因并克隆到T载体,然后测序鉴定。经Xhol和EcoR双酶切后接入pshuttle-CMV穿梭载体(简称PSC),构... 目的:利用AdEasyTMXL system构建携带小鼠B7-H4基因的重组腺病毒,并鉴定其生物学活性。方法:以RT-PCR方法从C57小鼠肺组织中扩增B7-H4全长基因并克隆到T载体,然后测序鉴定。经Xhol和EcoR双酶切后接入pshuttle-CMV穿梭载体(简称PSC),构建重组腺病毒的穿梭质粒PSC-mB7-H4,并电转化至BJ5183-AD-1感受态细菌,经筛选获得携带mB7-H4的重组腺病毒的质粒pmB7-H4/Ad。将此质粒转化人胚肾细胞(AD-293)产生复制缺陷的重组腺病毒mB7-H4/Ad。以RT-PCR及Western blot方法检测被mB7-H4/Ad感染的AD-293细胞中B7-H4 mRNA和蛋白的表达,并观察重组腺病毒感染的小鼠成纤维细胞(L929)对T细胞增殖和细胞因子表达的影响。结果:获得序列准确的mB7-H4基因并成功构建重组腺病毒表达质粒,转化AD-293细胞获得重组腺病毒;细胞生物学实验证实,该重组腺病毒具有抑制CD3单抗诱导的T淋巴细胞的增殖和细胞因子的分泌。结论:成功构建具有免疫抑制功能的mB7-H4重组腺病毒。 展开更多
关键词 T淋巴细胞/免疫学 重组 遗传 腺病毒科/遗传学 转染 细胞增殖 细胞 培养的 质粒
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小鼠B7-H4重组蛋白的表达及鉴定 被引量:3
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作者 钱韵 姚航平 +4 位作者 程林芳 沈玲 古丽娟 陶岚 张立煌 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期117-124,共8页
目的:构建小鼠B7-H4胞外区基因的真核表达载体,转染酵母细胞以表达mB7-H4,并检测其生物学活性。方法:以mB7-H4的重组质粒为模板,在克隆引物上加入XhoI和EcoRI酶切位点,并用PCR方法扩增得到mB7-H4胞外区的基因片段,经XhoI和EcoRI双酶切... 目的:构建小鼠B7-H4胞外区基因的真核表达载体,转染酵母细胞以表达mB7-H4,并检测其生物学活性。方法:以mB7-H4的重组质粒为模板,在克隆引物上加入XhoI和EcoRI酶切位点,并用PCR方法扩增得到mB7-H4胞外区的基因片段,经XhoI和EcoRI双酶切后接入酵母表达载体Ppic9上,构建成Ppic9-mB7-H4重组质粒。经双酶切和核酸测序鉴定,将该重组质粒转染至酵母细胞,用PCR、Western Blot及ELISA等方法检测重组基因的表达,并鉴定表达蛋白的生物学活性。结果:转染Ppic9-mB7-H4重组质粒的酵母细胞内表达mB7-H4,诱导表达的mB7-H4能有效抑制CD3单抗活化的T淋巴细胞的增殖(相对抑制率为28.3%)和IL-2(相对抑制率为68.8%)、IL-4(相对抑制率为78.8%)、IL-10(相对抑制率为67.6%)、IFN-γ(相对抑制率为77.7%)等细胞因子的分泌。结论:成功构建了mB7-H4真核表达系统,并获得了有生物学活性的mB7-H4分子。 展开更多
关键词 遗传载体 重组蛋白质类 mB7-H4 重组 表达 免疫抑制
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中部六省会展城市间的“虹吸效应”研究 被引量:1
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作者 蔡卫民 古丽娟 《城市学刊》 2023年第2期36-40,共5页
在会展城市发展过程中,发达会展城市对欠发达会展城市的资源吸引现象日益明显。以中部六省的会展城市为研究对象,通过改进城市引力模型,对会展城市之间的虹吸效应进行分析,发现中部六省每省有一个核心会展城市,会展城市之间存在着“虹... 在会展城市发展过程中,发达会展城市对欠发达会展城市的资源吸引现象日益明显。以中部六省的会展城市为研究对象,通过改进城市引力模型,对会展城市之间的虹吸效应进行分析,发现中部六省每省有一个核心会展城市,会展城市之间存在着“虹吸效应”,距离核心会展城市越近的欠发达会展城市受到的“虹吸效应”越强烈。随着时间的推移,大部分欠发达会展城市受到的“虹吸效应”不断增加,最终导致极化效应。 展开更多
关键词 会展城市 城市引力模型 虹吸效应
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行政事业单位预算管理存在的问题分析与对策 被引量:5
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作者 古丽娟 《新财经》 2019年第6期166-168,共3页
作为行政事业单位财务管理中一项非常重要的内容,预算管理的效果会对行政事业单位内部控制水平和运行质量产生直接影响。新时期,经济体制改革的持续完善,对于行政事业单位预算管理工作提出了日益严格的要求。文章从行政事业单位预算管... 作为行政事业单位财务管理中一项非常重要的内容,预算管理的效果会对行政事业单位内部控制水平和运行质量产生直接影响。新时期,经济体制改革的持续完善,对于行政事业单位预算管理工作提出了日益严格的要求。文章从行政事业单位预算管理中存在的问题出发,有针对性地提出了问题的解决对策,以期为行政事业单位预算管理的顺利实施提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 行政事业单位 预算管理 预算编制 预算执行
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行政事业单位内部控制存在的问题与措施 被引量:1
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作者 古丽娟 《中国乡镇企业会计》 2019年第6期223-224,共2页
行政事业单位在我国经济发展中具有重要地位,其对提高人民生活质量以及实现社会稳定发展发挥着保障作用,在新时期环境下,行政事业单位面临着新的考验,如何做好内部控制是其发展的关键。在现阶段行政事业单位内部控制过程中仍存在一些问... 行政事业单位在我国经济发展中具有重要地位,其对提高人民生活质量以及实现社会稳定发展发挥着保障作用,在新时期环境下,行政事业单位面临着新的考验,如何做好内部控制是其发展的关键。在现阶段行政事业单位内部控制过程中仍存在一些问题,这对其作用的发挥和长远发展都产生了很大的影响,现本文就针对行政事业单位内部控制存在的问题进行分析,并有针对性地提出解决措施,希望对其优化内部控制和实现健康持续发展提供帮助。 展开更多
关键词 行政事业单位 内部控制 存在问题 解决措施
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“一带一路”背景下木材加工企业的跨境发展策略
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作者 古丽娟 《林产工业》 北大核心 2020年第2期79-81,共3页
随着"一带一路"倡议的提出,我国越来越多的企业加入到跨境发展当中,对全球经济和社会发展产生了深刻影响。由于我国木材加工企业跨境发展的时间较短,在很多方面缺少足够的经验,对风险的实际应对能力有待提高。针对当前我国木... 随着"一带一路"倡议的提出,我国越来越多的企业加入到跨境发展当中,对全球经济和社会发展产生了深刻影响。由于我国木材加工企业跨境发展的时间较短,在很多方面缺少足够的经验,对风险的实际应对能力有待提高。针对当前我国木材加工企业跨境发展的现状和存在的问题进行了分析,进而针对性地提出了相关策略,这对于提升我国木材加工企业的整体跨境发展水平和跨境竞争力等具有重要意义。 展开更多
关键词 木材 木材加工企业 “一带一路” 现状 问题 发展策略
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