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刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
1
作者
遇文婧
刘志华
+3 位作者
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
《安徽农业科学》
CAS
2014年第19期6163-6165,共3页
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并...
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并将pPIC9K-Epl1转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,并用不同中终浓度的遗传霉素G418筛选多拷贝重组酵母菌株。[结果]对重组载体进行PCR及双酶切检测为阳性;在含有终浓度为2 mg/ml遗传霉素G418的YPD平板上筛选得到7株多拷贝的转化子GS115-Epl1,经PCR鉴定1株转化子呈阳性。[结论]Epl1基因的载体构建及多拷贝酵母转化子筛选为以后大量分离纯化Epl1蛋白并研究其功能奠定基础。
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关键词
深绿木霉ACCC30153
刺激植物响应蛋白
毕赤酵母
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职称材料
几种杀虫剂对分月扇舟蛾离体酶活性的影响
被引量：
1
2
作者
刘晓露
古丽吉米拉.米吉提
+1 位作者
王志英
吴红渠
《东北林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期128-133,共6页
以分月扇舟蛾(Clostera anastomosis)3龄幼虫为研究对象,比较了几种杀虫剂对其离体保护酶(SOD和CAT)和解毒酶(Car E和GST)活性的影响。结果表明:0.100 mg·L-1高效氯氟氰菊酯、0.010 mg·L-1吡虫啉、0.001 mg·L-1灭幼脲对...
以分月扇舟蛾(Clostera anastomosis)3龄幼虫为研究对象,比较了几种杀虫剂对其离体保护酶(SOD和CAT)和解毒酶(Car E和GST)活性的影响。结果表明:0.100 mg·L-1高效氯氟氰菊酯、0.010 mg·L-1吡虫啉、0.001 mg·L-1灭幼脲对CAT活性的抑制作用较强,抑制率分别为63.50%、68.89%和62.11%,而敌敌畏、氧化乐果对CAT活性的抑制作用较小。0.100 mg·L-1高效氯氟氰菊酯对SOD活性的抑制作用最强,抑制率为60.82%,氧化乐果对SOD活性有较强的促进作用,激活率可达168.72%(10.000 mg·L-1)。10.000 mg·L-1敌敌畏对Car E的抑制作用最强,抑制率为52.63%,1.000 mg·L-1高效氯氟氰菊酯对Car E的激活作用最强,激活率为43.06%。供试杀虫剂对GST活性均有抑制作用,1.000 mg·L-1灭幼脲对GST抑制率可达51.75%。由此可见,离体保护酶和解毒酶的活性与杀虫剂的类型有直接关系,并且同一类型不同化学结构的杀虫剂对离体酶活性的影响存在显著差异。
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关键词
分月扇舟蛾
过氧化氢酶
超氧化物歧化酶
羧酸酯酶
谷胱甘肽-S-转移酶
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职称材料
题名
刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
1
作者
遇文婧
刘志华
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
机构
东北林业大学林学院
黑龙江省森林保护研究所
出处
《安徽农业科学》
CAS
2014年第19期6163-6165,共3页
基金
哈尔滨市科技局青年科技创新人才项目(2013RFQXJ02)资助
中央高校基本科研业务费专项资金项目(2572014BA08)
文摘
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并将pPIC9K-Epl1转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,并用不同中终浓度的遗传霉素G418筛选多拷贝重组酵母菌株。[结果]对重组载体进行PCR及双酶切检测为阳性;在含有终浓度为2 mg/ml遗传霉素G418的YPD平板上筛选得到7株多拷贝的转化子GS115-Epl1,经PCR鉴定1株转化子呈阳性。[结论]Epl1基因的载体构建及多拷贝酵母转化子筛选为以后大量分离纯化Epl1蛋白并研究其功能奠定基础。
关键词
深绿木霉ACCC30153
刺激植物响应蛋白
毕赤酵母
Keywords
Trichoderma atroviride ACCC30153
Eliciting plant response protein
P.pastoris
分类号
S763.1 [农业科学—森林保护学]
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职称材料
题名
几种杀虫剂对分月扇舟蛾离体酶活性的影响
被引量：
1
2
作者
刘晓露
古丽吉米拉.米吉提
王志英
吴红渠
机构
东北林业大学
湖北生物农药工程研究中心
出处
《东北林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期128-133,共6页
基金
"十二五"农村领域国家科技计划课题(2011BAD37B01 4)
林业公益性行业科研专项(201104069)
文摘
以分月扇舟蛾(Clostera anastomosis)3龄幼虫为研究对象,比较了几种杀虫剂对其离体保护酶(SOD和CAT)和解毒酶(Car E和GST)活性的影响。结果表明:0.100 mg·L-1高效氯氟氰菊酯、0.010 mg·L-1吡虫啉、0.001 mg·L-1灭幼脲对CAT活性的抑制作用较强,抑制率分别为63.50%、68.89%和62.11%,而敌敌畏、氧化乐果对CAT活性的抑制作用较小。0.100 mg·L-1高效氯氟氰菊酯对SOD活性的抑制作用最强,抑制率为60.82%,氧化乐果对SOD活性有较强的促进作用,激活率可达168.72%(10.000 mg·L-1)。10.000 mg·L-1敌敌畏对Car E的抑制作用最强,抑制率为52.63%,1.000 mg·L-1高效氯氟氰菊酯对Car E的激活作用最强,激活率为43.06%。供试杀虫剂对GST活性均有抑制作用,1.000 mg·L-1灭幼脲对GST抑制率可达51.75%。由此可见,离体保护酶和解毒酶的活性与杀虫剂的类型有直接关系,并且同一类型不同化学结构的杀虫剂对离体酶活性的影响存在显著差异。
关键词
分月扇舟蛾
过氧化氢酶
超氧化物歧化酶
羧酸酯酶
谷胱甘肽-S-转移酶
Keywords
Clostera anastomosis
Catalase
Superoxide dismutase
Carboxylesterase
Glutathione-S-transferase
分类号
S763.306.7 [农业科学—森林保护学]
S763.42 [农业科学—森林保护学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
遇文婧
刘志华
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
《安徽农业科学》
CAS
2014
0
在线阅读
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职称材料
2
几种杀虫剂对分月扇舟蛾离体酶活性的影响
刘晓露
古丽吉米拉.米吉提
王志英
吴红渠
《东北林业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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