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spo0A基因缺失对克劳氏芽孢杆菌发酵生产性能的影响
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作者 原梨萍 肖静 +3 位作者 王瑞明 路福平 汪俊卿 李玉 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第11期127-131,共5页
通过基因敲除的方法构建spo0A基因缺失菌株,并评价spo0A基因缺失对克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)QL-1发酵生产性能的影响。经重叠延伸PCR和基因同源单交换技术,获得spo0A基因缺失突变株B. clausii QL-1△spo0A;通过系统比较spo0A基... 通过基因敲除的方法构建spo0A基因缺失菌株,并评价spo0A基因缺失对克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)QL-1发酵生产性能的影响。经重叠延伸PCR和基因同源单交换技术,获得spo0A基因缺失突变株B. clausii QL-1△spo0A;通过系统比较spo0A基因敲除前后芽孢生成率、生物量及淀粉酶酶活的改变,发现B. clausii QL-1△spo0A菌株不产芽孢、生物量提高了24%,且B. clausii QL-1△spo0A发酵72 h淀粉酶酶活为1.58×105 U/g,淀粉酶活提高83.72%。说明克劳氏芽孢杆菌spo0A基因缺失对菌体生物量、芽孢生成率及代谢产物的生成等具有重要影响。 展开更多
关键词 克劳氏芽孢杆菌 spo0A基因 基因敲除 芽孢生成率 生物量 淀粉酶
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spoIIE基因缺失对克劳氏芽孢杆菌淀粉酶酶活的影响 被引量:3
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作者 张虎 肖静 +2 位作者 原梨萍 汪俊卿 王瑞明 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第1期131-135,268,共6页
通过对克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii) QL-1spoIIE基因敲除,研究了其对菌体芽孢形成、生物量以及淀粉酶酶活的影响。将重叠的spoIIE-Cmr片段电转化至B.clausii QL-1感受态细胞,仅通过一次同源单交换实现对spoIIE基因快速敲除,成功获... 通过对克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii) QL-1spoIIE基因敲除,研究了其对菌体芽孢形成、生物量以及淀粉酶酶活的影响。将重叠的spoIIE-Cmr片段电转化至B.clausii QL-1感受态细胞,仅通过一次同源单交换实现对spoIIE基因快速敲除,成功获得spoIIE基因缺失菌株B.clausii QL-1ΔspoIIE。发酵培养B.clausii QL-1ΔspoIIE与出发菌株相比,B.clausii QL-1ΔspoIIE芽孢生成率28 h降低为0.48%,20 h生物量提高了20%,84 h淀粉酶酶活是出发菌株的5.58倍,通过补料发酵B.clausii QL-1ΔspoIIE菌株80 h最大生物量达到7.2 mg·m L^(-1),84 h淀粉酶酶活达到690 U·m L^(-1),较未补料前提高了33.30%。经验证spoIIE基因为B.clausii QL-1芽孢形成关键基因,同时它的缺失有利于淀粉酶酶活的提高,这对后续构建芽孢杆菌类高产淀粉酶工业生产菌株具有重要意义。 展开更多
关键词 克劳氏芽孢杆菌 spoIIE基因 基因敲除 芽孢生成率 生物量 淀粉酶
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