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实时荧光环介导等温扩增快速检测黄曲霉毒素产生菌方法的建立
1
作者
陈晨
陶泽
+5 位作者
王可
李晴晴
安红玉
卢增慧
李拖平
李苏红
《食品与发酵工业》
北大核心
2025年第4期335-344,共10页
黄曲霉毒素是一种具备强致肝损伤性、致癌性和致畸性的微生物毒素。根据产黄曲霉毒素调节基因aflR、柄曲霉素转甲基酶基因omt-1、杂色曲霉素A脱氢酶基因ver-1分别对实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP...
黄曲霉毒素是一种具备强致肝损伤性、致癌性和致畸性的微生物毒素。根据产黄曲霉毒素调节基因aflR、柄曲霉素转甲基酶基因omt-1、杂色曲霉素A脱氢酶基因ver-1分别对实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物进行设计,对其建立并优化LAMP体系。结果显示,该文所建立的方法针对aflR、omt-1、ver-1基因设计的引物,黄曲霉菌DNA的检出限分别是1.0×10^(-2)、1.0×10^(-3)、1.0×10^(-4) ng/μL。此体系与黄曲霉及寄生曲霉反应成阳性,与其他菌体反应皆为阴性,该方法耗时短、设备要求低,借助恒温荧光读取设备或根据显色剂颜色变化可在60 min内迅速判定待检菌株是否为黄曲霉毒素产生菌,可满足各机构现场快速高效检测的需要。
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关键词
黄曲霉毒素产生菌
实时荧光环介导等温扩增
快速检测
黄曲霉毒素调节基因aflR
柄曲霉素转甲基酶基因omt-1
杂色曲霉素A脱氢酶基因ver-1
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职称材料
黄曲霉毒素产生菌UDG-LAMP-LFD检测体系的建立
2
作者
安红玉
陈晨
+5 位作者
王艳华
卢增慧
陶泽
王可
李拖平
李苏红
《食品工业科技》
北大核心
2025年第12期324-333,共10页
为消除气溶胶污染在检测中出现负面影响,实现对黄曲霉毒素产生菌的快速、可视化检测,建立一种基于热敏尿嘧啶糖基化酶(Uracil-DNA Glycocasylase,UDG酶)与横向流动试纸条(Lateral Flow Dipstick,LFD)的防污染环介导等温扩增(Loop-mediat...
为消除气溶胶污染在检测中出现负面影响,实现对黄曲霉毒素产生菌的快速、可视化检测,建立一种基于热敏尿嘧啶糖基化酶(Uracil-DNA Glycocasylase,UDG酶)与横向流动试纸条(Lateral Flow Dipstick,LFD)的防污染环介导等温扩增(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)的反应体系UDG-LAMP-LFD。针对黄曲霉毒素合成关键调控基因omt-1、ver-1以及aflR设计特异性LAMP引物。当aflR、omt-1、ver-1三个基因对应的将含U碱基的扩增产物稀释10~8倍时,该体系能够达到防污染效果,且该体系针对三个目标基因的灵敏度分别达到1×10^(-3)、1×10^(-5)、1×10^(-6)ng/μL,精密度均在5%以下,具有较强特异性和抗干扰能力。建立的UDG-LAMPLFD检测体系可快速灵敏、高特异性、可视化地检测黄曲霉毒素产生菌,同时可避免气溶胶污染导致的假阳性,适用于在加工、贮藏前及时检测粮油原料中黄曲霉毒素产生菌,提前预判污染风险,实施防控,实现减损增质。
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关键词
黄曲霉毒素产生菌
环介导等温扩增技术
气溶胶污染
热敏尿嘧啶糖基化酶
横向流动试纸条
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职称材料
环介导等温扩增技术在食品安全检测领域的研究进展
被引量：
2
3
作者
安红玉
陶泽
+4 位作者
陈晨
卢增慧
万世园
李拖平
李苏红
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第21期388-396,共9页
食品安全是一项重大而持久的挑战,对人类生活质量有着深远的影响。环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种高效、灵敏、快捷、高特异性的核酸等温扩增技术。相较于传统核酸扩增方法,该技术针对目标DNA...
食品安全是一项重大而持久的挑战,对人类生活质量有着深远的影响。环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种高效、灵敏、快捷、高特异性的核酸等温扩增技术。相较于传统核酸扩增方法,该技术针对目标DNA链上的6个区段,设计4个不同的引物。只需将样品DNA、引物、链置换型DNA聚合酶、dNTPs、Mg^(2+)等共同置于60~65℃反应30~60 min,经过一个步骤即可完成核酸快速扩增。广泛应用于食品安全检测领域中食源性致病菌污染、食品掺假、转基因食品、食品过敏原的检测。该文就LAMP技术的原理、与PCR技术的主要特点比较、现存问题以及在食品安全检测领域的创新应用进行了综述,为今后其在食品安全检测方面的应用推广提供参考。
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关键词
环介导等温扩增
核酸检测
食品安全
结果判定
多重LAMP
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职称材料
题名
实时荧光环介导等温扩增快速检测黄曲霉毒素产生菌方法的建立
1
作者
陈晨
陶泽
王可
李晴晴
安红玉
卢增慧
李拖平
李苏红
机构
沈阳农业大学食品学院
中央储备粮新民直属库有限公司
中央储备粮沈阳直属库有限公司
辽宁省检验检测认证中心
出处
《食品与发酵工业》
北大核心
2025年第4期335-344,共10页
基金
沈阳市科技局社会治理科技专项(公共安全项目)(22322339)。
文摘
黄曲霉毒素是一种具备强致肝损伤性、致癌性和致畸性的微生物毒素。根据产黄曲霉毒素调节基因aflR、柄曲霉素转甲基酶基因omt-1、杂色曲霉素A脱氢酶基因ver-1分别对实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物进行设计,对其建立并优化LAMP体系。结果显示,该文所建立的方法针对aflR、omt-1、ver-1基因设计的引物,黄曲霉菌DNA的检出限分别是1.0×10^(-2)、1.0×10^(-3)、1.0×10^(-4) ng/μL。此体系与黄曲霉及寄生曲霉反应成阳性,与其他菌体反应皆为阴性,该方法耗时短、设备要求低,借助恒温荧光读取设备或根据显色剂颜色变化可在60 min内迅速判定待检菌株是否为黄曲霉毒素产生菌,可满足各机构现场快速高效检测的需要。
关键词
黄曲霉毒素产生菌
实时荧光环介导等温扩增
快速检测
黄曲霉毒素调节基因aflR
柄曲霉素转甲基酶基因omt-1
杂色曲霉素A脱氢酶基因ver-1
Keywords
aflatoxin-producing fungi
real-time fluorescent loop-mediated isothermal amplification
rapid detection
aflR
omt-1
ver-1
分类号
TS207.5 [轻工技术与工程—食品科学]
O657.3 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
黄曲霉毒素产生菌UDG-LAMP-LFD检测体系的建立
2
作者
安红玉
陈晨
王艳华
卢增慧
陶泽
王可
李拖平
李苏红
机构
沈阳农业大学食品学院
辽宁省微生物科学研究所
中央储备粮新民直属库有限公司
中央储备粮沈阳直属库有限公司
出处
《食品工业科技》
北大核心
2025年第12期324-333,共10页
基金
沈阳市科技局社会治理科技专项(公共安全项目)(22322339)。
文摘
为消除气溶胶污染在检测中出现负面影响,实现对黄曲霉毒素产生菌的快速、可视化检测,建立一种基于热敏尿嘧啶糖基化酶(Uracil-DNA Glycocasylase,UDG酶)与横向流动试纸条(Lateral Flow Dipstick,LFD)的防污染环介导等温扩增(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)的反应体系UDG-LAMP-LFD。针对黄曲霉毒素合成关键调控基因omt-1、ver-1以及aflR设计特异性LAMP引物。当aflR、omt-1、ver-1三个基因对应的将含U碱基的扩增产物稀释10~8倍时,该体系能够达到防污染效果,且该体系针对三个目标基因的灵敏度分别达到1×10^(-3)、1×10^(-5)、1×10^(-6)ng/μL,精密度均在5%以下,具有较强特异性和抗干扰能力。建立的UDG-LAMPLFD检测体系可快速灵敏、高特异性、可视化地检测黄曲霉毒素产生菌,同时可避免气溶胶污染导致的假阳性,适用于在加工、贮藏前及时检测粮油原料中黄曲霉毒素产生菌,提前预判污染风险,实施防控,实现减损增质。
关键词
黄曲霉毒素产生菌
环介导等温扩增技术
气溶胶污染
热敏尿嘧啶糖基化酶
横向流动试纸条
Keywords
aflatoxin-producing bacteria
loop-mediated isothermal amplification
aerosol pollution
heat-labile uracil-DNA glycosylase
lateral flow dipstick
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
环介导等温扩增技术在食品安全检测领域的研究进展
被引量：
2
3
作者
安红玉
陶泽
陈晨
卢增慧
万世园
李拖平
李苏红
机构
沈阳农业大学食品学院
中央储备粮新民直属库有限公司
中储粮(北京)徐辛庄直属库有限公司
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第21期388-396,共9页
基金
沈阳市科技局社会治理科技专项(公共安全项目)(22322339)。
文摘
食品安全是一项重大而持久的挑战,对人类生活质量有着深远的影响。环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种高效、灵敏、快捷、高特异性的核酸等温扩增技术。相较于传统核酸扩增方法,该技术针对目标DNA链上的6个区段,设计4个不同的引物。只需将样品DNA、引物、链置换型DNA聚合酶、dNTPs、Mg^(2+)等共同置于60~65℃反应30~60 min,经过一个步骤即可完成核酸快速扩增。广泛应用于食品安全检测领域中食源性致病菌污染、食品掺假、转基因食品、食品过敏原的检测。该文就LAMP技术的原理、与PCR技术的主要特点比较、现存问题以及在食品安全检测领域的创新应用进行了综述,为今后其在食品安全检测方面的应用推广提供参考。
关键词
环介导等温扩增
核酸检测
食品安全
结果判定
多重LAMP
Keywords
loop-mediated isothermal amplification
nucleic acid detection
food safety
result determination
multiple LAMP
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
TS201.6 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光环介导等温扩增快速检测黄曲霉毒素产生菌方法的建立
陈晨
陶泽
王可
李晴晴
安红玉
卢增慧
李拖平
李苏红
《食品与发酵工业》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
黄曲霉毒素产生菌UDG-LAMP-LFD检测体系的建立
安红玉
陈晨
王艳华
卢增慧
陶泽
王可
李拖平
李苏红
《食品工业科技》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
环介导等温扩增技术在食品安全检测领域的研究进展
安红玉
陶泽
陈晨
卢增慧
万世园
李拖平
李苏红
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2024
2
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