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microRNA-494通过TLR-4通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制
被引量：
3
1
作者
匡嘉兵
徐昊
+2 位作者
张克良
沈波
许闫严
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018年第10期55-60,共6页
目的探讨microRNA-494(miR-494)通过Toll样受体-4(TLR-4)通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制。方法选用小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为体外模型,采用miR-494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,采用qRT-PCR法测定miR-494在小鼠成骨...
目的探讨microRNA-494(miR-494)通过Toll样受体-4(TLR-4)通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制。方法选用小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为体外模型,采用miR-494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,采用qRT-PCR法测定miR-494在小鼠成骨细胞株MC3T3-E1转染前后的表达情况;通过MTT法检测转染前后小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖情况;通过测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,研究小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的分化情况;通过骨钙素(osteocalcin,OC)定量检测分析和Von Kossa钙化染色检测小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的基质矿化情况;通过Western blot等检测转染前后TLR-4蛋白的表达差异。结果 qRT-PCR测定结果显示,与阴性对照组相比,小鼠成骨细胞株MC3T3-E1转染后的miR-494的mRNA的表达量升高(P<0.05),说明miR-494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,成功使miR-494过表达。与阴性对照组相比,经过miR-494 mimic转染后,小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖能力受到抑制(P<0.05)。转染后的小鼠成骨细胞株MC3T3-E1中ALP的活性降低(P<0.05)。同时,转染后的小鼠成骨细胞株MC3T3-E1中OC的活性显著降低(P<0.05),矿化结节的数目、减少(P<0.05)。Western blot结果显示,与阴性对照组相比,miR-494 mimic转染组细胞中的TLR-4蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论 miR-494能够通过TLR-4通路抑制小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖活力,降低细胞中ALP、OC的活力,减少成骨细胞中的矿化结节数,抑制成骨细胞分化及基质矿化。
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关键词
microRNA-494
成骨细胞
基质矿化
TLR-4
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题名
microRNA-494通过TLR-4通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制
被引量：
3
1
作者
匡嘉兵
徐昊
张克良
沈波
许闫严
机构
武汉市普爱医院暨华中科技大学同济医学院附属普爱医院
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018年第10期55-60,共6页
文摘
目的探讨microRNA-494(miR-494)通过Toll样受体-4(TLR-4)通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制。方法选用小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为体外模型,采用miR-494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,采用qRT-PCR法测定miR-494在小鼠成骨细胞株MC3T3-E1转染前后的表达情况;通过MTT法检测转染前后小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖情况;通过测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,研究小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的分化情况;通过骨钙素(osteocalcin,OC)定量检测分析和Von Kossa钙化染色检测小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的基质矿化情况;通过Western blot等检测转染前后TLR-4蛋白的表达差异。结果 qRT-PCR测定结果显示,与阴性对照组相比,小鼠成骨细胞株MC3T3-E1转染后的miR-494的mRNA的表达量升高(P<0.05),说明miR-494 mimic转染小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,成功使miR-494过表达。与阴性对照组相比,经过miR-494 mimic转染后,小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖能力受到抑制(P<0.05)。转染后的小鼠成骨细胞株MC3T3-E1中ALP的活性降低(P<0.05)。同时,转染后的小鼠成骨细胞株MC3T3-E1中OC的活性显著降低(P<0.05),矿化结节的数目、减少(P<0.05)。Western blot结果显示,与阴性对照组相比,miR-494 mimic转染组细胞中的TLR-4蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论 miR-494能够通过TLR-4通路抑制小鼠成骨细胞株MC3T3-E1的增殖活力,降低细胞中ALP、OC的活力,减少成骨细胞中的矿化结节数,抑制成骨细胞分化及基质矿化。
关键词
microRNA-494
成骨细胞
基质矿化
TLR-4
Keywords
microRNA-494
osteoblast
matrix mineralization
TLR-4
分类号
R-33 [医药卫生]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
microRNA-494通过TLR-4通路抑制成骨细胞分化及基质矿化的分子机制
匡嘉兵
徐昊
张克良
沈波
许闫严
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018
3
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