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鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶双反义腺病毒对大肠癌细胞生长的抑制作用被引量：4: 1; 作者龚磊姜春英 +3 位作者张冰胡海燕王伟刘贤锡《中国现代普通外科进展》 CAS 2007年第1期21-25,共5页; 目的:研究鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(AdoMetDC)双反义腺病毒(Ad-ODC-AdoMetDCas)对大肠癌细胞生长的抑制作用,并初步探讨其参与细胞周期调节的分子机制。方法:将Ad-ODC-AdoMetDCas感染大肠癌细胞株HT-29,通过MTS法观察其... 展开更多; 关键词鸟氨酸脱羧酶 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶细胞周期蛋白D1 结直肠肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA对乳腺癌细胞生长侵袭的抑制作用被引量：2: 2; 作者邓文胜万小卫 +4 位作者卢军孙金娥马榕刘贤锡孙学英《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第39期34-36,共3页; 目的观察鸟氨酸脱羧酶(ODC)在乳腺癌细胞中的表达及腺病毒介导的ODC反义RNA对乳腺癌细胞生长侵袭的抑制作用。方法采用western蛋白印迹法测定乳腺癌MDA-MB-231细胞(乳腺癌细胞)与正常乳腺MCF-10A上皮细胞(正常细胞)中ODC蛋白表达;将腺... 展开更多; 关键词鸟氨酸脱羧酶反义RNA 腺病毒乳腺癌细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

人ODC重组蛋白及其多抗的制备和临床应用被引量：3: 3; 作者胡海燕刘贤锡 +7 位作者姜春英张岩王晓明刘师莲耿昭卢翌张冰孙爱华《中国现代普通外科进展》 CAS 2004年第1期26-30,共5页; 目的 :构建鸟氨酸脱羧酶 (ODC)表达载体 ,表达ODC重组蛋白 ,制备其多克隆抗体并观察其在大肠癌诊断中的意义。方法 :从大肠癌组织中提取总RNA ,反转录PCR法扩增全长ODCcDNA ,将扩增的基因插入表达载体 pQE 30的BamHI和SalI酶切位点之间 ... 展开更多; 关键词鸟氨酸脱羧酶结直肠肿瘤基因表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义研究被引量：7: 4; 作者孙爱华刘贤锡 +5 位作者何庆泗刘传华胡海燕王伟张岩张冰《中国现代普通外科进展》 CAS 2004年第3期150-152,共3页; 目的 :研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因在结直肠癌中的表达 ,探讨其在大肠癌形成中的作用。方法 :建立测定ODC基因mRNA表达的逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)最适条件 ,在半定量水平测定 31例结直肠癌的癌旁正常组织和癌组织中的ODCmRNA表达的... 展开更多; 关键词结直肠肿籀·鸟氨酸脱羧酶·基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

人ODCmRNA反义抑制敏感位点的筛选被引量：1: 5; 作者张冰刘贤锡 +3 位作者张岩姜春英胡海燕龚磊《中国现代普通外科进展》 CAS 2005年第3期146-150,共5页; 目的为建立有效的肿瘤治疗方法,筛查ODCmRNA最佳反义抑制位点。方法采用RT PCR的方法从肝癌细胞中扩增出鸟氨酸脱羧酶(ODC),外显子2、外显子3、外显子610、外显子11124段基因片段。通过TA克隆反向连接到pcDNA3.1上,酶切测序并鉴定插入... 展开更多; 关键词鸟氨酸脱羧酶 RNA 反义真核表达载体外显子; 在线阅读下载PDF 职称材料

ODC单抗的制备及其在大肠癌检测中的应用被引量：1: 6; 作者胡海燕姜春英 +5 位作者张岩耿昭卢翌王晓明张冰刘贤锡《中国现代普通外科进展》 CAS 2005年第6期339-341,共3页; 目的:制备鸟氨酸脱羧酶(ODC)单克隆抗体并观察其在大肠癌检测中的意义。方法:以人ODC重组蛋白免疫小鼠,用杂交瘤细胞技术制备单克隆杂交瘤细胞,以ELISA和Westernblot法验证阳性单克隆细胞所产生的免疫球蛋白。免疫组化检测大肠癌组织中... 展开更多; 关键词鸟氨酸脱羧酶结直肠肿瘤单克隆抗体杂交瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠癌肝转移基因治疗研究进展被引量：2: 7; 作者孙爱华刘贤锡《中国现代普通外科进展》 CAS 2004年第1期1-3,共3页; 关键词大肠肿瘤肝肿瘤转移基因疗法; 在线阅读下载PDF 职称材料

肝内胆管癌hTR反义RNA及锤头状核酶基因真核表达载体的构建: 8; 作者靳斌姜希宏 +6 位作者刘贤锡刘博刘师莲王伟胡海燕卢翌耿昭《山东医药》 CAS 北大核心 2002年第16期3-5,共3页; 用反转录PCR法 ,调取肝内胆管癌细胞内的端粒酶RNA(hTR)基因 ,并针对其序列设计反义RNA封闭基因及锤头状核酶切割基因序列 ,将其构建入真核表达载体pTriEx 4内。根据hTRcDNA序列设计引物 ,经RT PCR法从体外培养的肝内胆管癌细胞内调取hT... 展开更多; 关键词肝内肝管癌锤头状核酶基因真核表达载体真核表达反转录聚合酶链反应端粒酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种测定乳酸含量的简易方法: 9; 作者张伟毅徐松德 +3 位作者张建业刘贤锡吴湘云王明运《山东体育科技》 1988年第2期6-8,共3页; 乳酸系糖元氧代谢的最终产物。当剧烈运动时,糖元氧代谢加强,血乳酸水平成倍增加。而糖有氧代谢提高后,完成同样运动,血乳酸相对减少。因此血乳酸是评定糖元氧代谢和有氧代谢的重要指标。测定乳酸的方法很多,主要有化学法和酶法(1.2)两类。; 关键词血乳酸水平乳酸含量氧代谢终产物酶法血标本光密度值样品管法如紫外分光光度法; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶双反义腺病毒对大肠癌细胞生长的抑制作用被引量：4: 1; 作者龚磊姜春英张冰胡海燕王伟刘贤锡; 机构山东大学医学院分子生物学实验中心山东中医药大学附属医院肛肠科; 出处《中国现代普通外科进展》 CAS 2007年第1期21-25,共5页; 基金山东省科技厅科研基金山东省自然科学基金资助项目(Z2004C01); 文摘目的:研究鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(AdoMetDC)双反义腺病毒(Ad-ODC-AdoMetDCas)对大肠癌细胞生长的抑制作用,并初步探讨其参与细胞周期调节的分子机制。方法:将Ad-ODC-AdoMetDCas感染大肠癌细胞株HT-29,通过MTS法观察其对HT-29细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞周期的影响,采用Western blot检测Ad-ODC-AdoMetDCas对细胞中ODC、AdoMetDC及细胞周期调节蛋白(Cyclin D1 and CDK4)的表达的影响,利用RT-PCR检测Ad-ODC-AdoMetDCas对细胞周期蛋白Cyclin D1的mRNA水平的影响。结果:Ad-ODC-AdoMetDCas可抑制HT-29细胞中ODC和AdoMetDC蛋白的表达,并可明显抑制细胞的增殖,引起细胞周期Gl期阻滞,抑制G1期主要的细胞周期蛋白Cyclin D1的转录和翻译。结论:Ad-ODC-AdoMetDCas可有效下调ODC和AdoMetDC的表达,并通过抑制Cyclin D1的表达使其细胞周期停滞于G1期,从而抑制大肠癌细胞HT-29的增殖,为进一步研究大肠癌的基因治疗打下基础。; 关键词鸟氨酸脱羧酶 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶细胞周期蛋白D1 结直肠肿瘤; Keywords Ornithine decarboxylase .S-adenosylmethionine decarboxylase .Cyclin D1 -Colorectal neoplasms; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA对乳腺癌细胞生长侵袭的抑制作用被引量：2: 2; 作者邓文胜万小卫卢军孙金娥马榕刘贤锡孙学英; 机构山东省警官总医院山东大学齐鲁医院山东大学医学院分子生物学实验中心新西兰奥克兰大学医学院分子医学系; 出处《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第39期34-36,共3页; 文摘目的观察鸟氨酸脱羧酶(ODC)在乳腺癌细胞中的表达及腺病毒介导的ODC反义RNA对乳腺癌细胞生长侵袭的抑制作用。方法采用western蛋白印迹法测定乳腺癌MDA-MB-231细胞(乳腺癌细胞)与正常乳腺MCF-10A上皮细胞(正常细胞)中ODC蛋白表达;将腺病毒介导的ODC反义RNA(rAd-ODC/Ex3as)感染乳腺癌细胞。检测转染后乳腺癌细胞ODC表达及增殖、侵袭能力。结果与正常细胞比较,乳腺癌细胞ODC蛋白明显升高;ODC蛋白表达及细胞增殖、侵袭能力明显降低。结论 ODC基因在乳腺癌细胞中呈高表达;rAd-ODC/Ex3as可抑制其表达。; 关键词鸟氨酸脱羧酶反义RNA 腺病毒乳腺癌细胞; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人ODC重组蛋白及其多抗的制备和临床应用被引量：3: 3; 作者胡海燕刘贤锡姜春英张岩王晓明刘师莲耿昭卢翌张冰孙爱华; 机构山东大学医学院医学分子生物学实验中心山东中医药大学附属医院肛肠科; 出处《中国现代普通外科进展》 CAS 2004年第1期26-30,共5页; 基金卫生部科研基金资助项目 (98 1 173 ); 文摘目的 :构建鸟氨酸脱羧酶 (ODC)表达载体 ,表达ODC重组蛋白 ,制备其多克隆抗体并观察其在大肠癌诊断中的意义。方法 :从大肠癌组织中提取总RNA ,反转录PCR法扩增全长ODCcDNA ,将扩增的基因插入表达载体 pQE 30的BamHI和SalI酶切位点之间 ,DNA测序验证插入片段。将重组载体转化入宿主菌M 15中进行诱导表达 ,产生含 6 His tag的融合蛋白。WesternBlotting法检测表达蛋白。亲和层析法纯化融合蛋白 ,以该蛋白免疫小鼠制备多抗 ,免疫组化检测大肠癌组织中ODC的表达水平。结果 :酶切鉴定和DNA测序显示ODC重组表达载体中含有人ODCcDNA全长序列 ,与NIH基因库的人ODCcDNA比较有 99%的同源性。将该重组载体转化入大肠杆菌M 15中表达所得蛋白经WesternBlotting验证为目的蛋白。纯化融合蛋白 ,免疫小鼠获得多抗效价较高。免疫组化检测大肠癌组织中ODC的表达显示该抗体检测效果较好 ,大肠癌组织中ODC的表达水平明显高于正常组织 (P <0 .0 5 )。结论 :成功地构建了ODC表达载体、表达出ODC重组蛋白、制备出ODC多克隆抗体 ,为进一步研究结直肠癌的发病机理及其诊断和治疗方法打下了良好基础。; 关键词鸟氨酸脱羧酶结直肠肿瘤基因表达多克隆抗体; Keywords Ornithine decarboxylase·Colorectal neoplasms,Gene expression·Antibody; 分类号 R735.34 [医药卫生—肿瘤] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义研究被引量：7: 4; 作者孙爱华刘贤锡何庆泗刘传华胡海燕王伟张岩张冰; 机构山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所山东大学齐鲁医院普外科; 出处《中国现代普通外科进展》 CAS 2004年第3期150-152,共3页; 基金卫生部科研基金资助项目 (98 1 173 ); 文摘目的 :研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因在结直肠癌中的表达 ,探讨其在大肠癌形成中的作用。方法 :建立测定ODC基因mRNA表达的逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)最适条件 ,在半定量水平测定 31例结直肠癌的癌旁正常组织和癌组织中的ODCmRNA表达的相对水平 ,观察其与临床病理学指标的关系。结果 :31例结直肠癌中ODC基因表达较癌旁正常组织高 ,差异显著 (P <0 .0 1) ,ODC基因表达在性别、病理类型之间差异无显著意义 (P >0 .0 5 ) ,在Dukes分期之间差异有显著意义 (P =0 .0 12 )。结论 :ODC在大肠癌组织中表达增高并与恶性程度呈正相关 ,提示ODC表达增加与大肠癌发生、浸润及转移有关 ,为大肠癌病因及诊断和治疗方法研究提供了实验依据。; 关键词结直肠肿籀·鸟氨酸脱羧酶·基因表达; Keywords Colorectal neoplasms·Ornithine decarboxylase·Gene expression; 分类号 R735.34 [医药卫生—肿瘤] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人ODCmRNA反义抑制敏感位点的筛选被引量：1: 5; 作者张冰刘贤锡张岩姜春英胡海燕龚磊; 机构山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所山东中医药大学附属医院肛肠科; 出处《中国现代普通外科进展》 CAS 2005年第3期146-150,共5页; 基金山东省科技厅发展计划项目山东省卫生厅科研基金资助项目(2001CA1CAA3); 文摘目的为建立有效的肿瘤治疗方法,筛查ODCmRNA最佳反义抑制位点。方法采用RT PCR的方法从肝癌细胞中扩增出鸟氨酸脱羧酶(ODC),外显子2、外显子3、外显子610、外显子11124段基因片段。通过TA克隆反向连接到pcDNA3.1上,酶切测序并鉴定插入方向。脂质体法转染重组载体及空载体到肝癌MMC7721细胞中,采用Western blot法检测各载体对ODC蛋白表达的抑制作用,采用四唑盐比色试验验证并比较各载体对MMC7721细胞增殖活性的影响。结果外显子2、外显子3、外显子6103个位点的ODC反义RNA表达载体转染细胞后,细胞内ODC蛋白表达量明显降低,细胞增殖活性受到明显抑制,抑制率分别为59%、62%、64%。结论ODC外显子2、外显子3、外显子610是较好的反义抑制敏感位点。; 关键词鸟氨酸脱羧酶 RNA 反义真核表达载体外显子; Keywords Ornithine decarboxylase RNA,antisense Eukaryotic expression vectors Exons; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ODC单抗的制备及其在大肠癌检测中的应用被引量：1: 6; 作者胡海燕姜春英张岩耿昭卢翌王晓明张冰刘贤锡; 机构山东大学医学院医学分子生物学研究中心山东中医药大学附属医院肛肠科; 出处《中国现代普通外科进展》 CAS 2005年第6期339-341,共3页; 基金卫生部科研基金资助项目(98-1-173); 文摘目的:制备鸟氨酸脱羧酶(ODC)单克隆抗体并观察其在大肠癌检测中的意义。方法:以人ODC重组蛋白免疫小鼠,用杂交瘤细胞技术制备单克隆杂交瘤细胞,以ELISA和Westernblot法验证阳性单克隆细胞所产生的免疫球蛋白。免疫组化检测大肠癌组织中ODC的表达水平。结果:筛选出稳定分泌抗ODC单抗的细胞株,ELISA检测证明其所分泌单抗属于IgG2a型。免疫组化检测大肠癌组织中ODC的表达显示该单抗检测效果较好,大肠癌组织中ODC的表达水平明显高于正常组织(P<0.05)。结论:成功地制备出ODC单克隆抗体,为进一步研究ODC基因表达与大肠癌的发病机理及其诊断的关系打下了良好基础。; 关键词鸟氨酸脱羧酶结直肠肿瘤单克隆抗体杂交瘤; Keywords Omithine deoarboxylase, Monoclonal antibody. Colorectal neoplasms. Hybridomas; 分类号 R735.34 [医药卫生—肿瘤] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠癌肝转移基因治疗研究进展被引量：2: 7; 作者孙爱华刘贤锡; 机构山东大学医学院医学分子生物学实验中心; 出处《中国现代普通外科进展》 CAS 2004年第1期1-3,共3页; 基金山东省科技厅科研基金资助项目; 关键词大肠肿瘤肝肿瘤转移基因疗法; 分类号 R735.34 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肝内胆管癌hTR反义RNA及锤头状核酶基因真核表达载体的构建: 8; 作者靳斌姜希宏刘贤锡刘博刘师莲王伟胡海燕卢翌耿昭; 机构山东大学齐鲁医院山东大学医学分子生物学实验中心; 出处《山东医药》 CAS 北大核心 2002年第16期3-5,共3页; 文摘用反转录PCR法 ,调取肝内胆管癌细胞内的端粒酶RNA(hTR)基因 ,并针对其序列设计反义RNA封闭基因及锤头状核酶切割基因序列 ,将其构建入真核表达载体pTriEx 4内。根据hTRcDNA序列设计引物 ,经RT PCR法从体外培养的肝内胆管癌细胞内调取hTR模板区基因 ,根据其测序结果 ,合成反义RNA基因及核酶基因 ,与经相应酶切的真核表达载体连接 ,酶切鉴定重组体的正确性。经RT PCR从细胞内调出 68bp序列 ,与hTRcDNA比较 ,与模板区域碱基序列一致 ,反义RNA与核酶基因重组子经酶切鉴定序列正确。肝内胆管癌细胞内端粒酶的活性明显增高 ,RT PCR法可调出其hTR基因有效片段 ;; 关键词肝内肝管癌锤头状核酶基因真核表达载体真核表达反转录聚合酶链反应端粒酶; Keywords RT PCR Antisense RNA Ribozyme Real nucleus expression Vector; 分类号 R735.8 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种测定乳酸含量的简易方法: 9; 作者张伟毅徐松德张建业刘贤锡吴湘云王明运; 机构山东医科大学; 出处《山东体育科技》 1988年第2期6-8,共3页; 文摘乳酸系糖元氧代谢的最终产物。当剧烈运动时,糖元氧代谢加强,血乳酸水平成倍增加。而糖有氧代谢提高后,完成同样运动,血乳酸相对减少。因此血乳酸是评定糖元氧代谢和有氧代谢的重要指标。测定乳酸的方法很多,主要有化学法和酶法(1.2)两类。; 关键词血乳酸水平乳酸含量氧代谢终产物酶法血标本光密度值样品管法如紫外分光光度法; 分类号 R6 [医药卫生—外科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶双反义腺病毒对大肠癌细胞生长的抑制作用	龚磊姜春英张冰胡海燕王伟刘贤锡	《中国现代普通外科进展》 CAS	2007	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA对乳腺癌细胞生长侵袭的抑制作用	邓文胜万小卫卢军孙金娥马榕刘贤锡孙学英	《山东医药》 CAS 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人ODC重组蛋白及其多抗的制备和临床应用	胡海燕刘贤锡姜春英张岩王晓明刘师莲耿昭卢翌张冰孙爱华	《中国现代普通外科进展》 CAS	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	大肠癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义研究	孙爱华刘贤锡何庆泗刘传华胡海燕王伟张岩张冰	《中国现代普通外科进展》 CAS	2004	7	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人ODCmRNA反义抑制敏感位点的筛选	张冰刘贤锡张岩姜春英胡海燕龚磊	《中国现代普通外科进展》 CAS	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	ODC单抗的制备及其在大肠癌检测中的应用	胡海燕姜春英张岩耿昭卢翌王晓明张冰刘贤锡	《中国现代普通外科进展》 CAS	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	大肠癌肝转移基因治疗研究进展	孙爱华刘贤锡	《中国现代普通外科进展》 CAS	2004	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	肝内胆管癌hTR反义RNA及锤头状核酶基因真核表达载体的构建	靳斌姜希宏刘贤锡刘博刘师莲王伟胡海燕卢翌耿昭	《山东医药》 CAS 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
9	一种测定乳酸含量的简易方法	张伟毅徐松德张建业刘贤锡吴湘云王明运	《山东体育科技》	1988	0	在线阅读下载PDF 职称材料