采用分步法将仿生硅化与脂质体技术相结合,模拟细胞微结构,以卵磷脂为原料,制备脂质体微囊,以胺类为诱导剂,在其表面硅化形成氧化硅壳层,实现对葡萄糖氧化酶(GOx)与辣根过氧化酶(HRP)双酶固定。研究了超声时间、诱导剂PDADMA用量、硅前...采用分步法将仿生硅化与脂质体技术相结合,模拟细胞微结构,以卵磷脂为原料,制备脂质体微囊,以胺类为诱导剂,在其表面硅化形成氧化硅壳层,实现对葡萄糖氧化酶(GOx)与辣根过氧化酶(HRP)双酶固定。研究了超声时间、诱导剂PDADMA用量、硅前驱体水解液(TMOS)用量、Triton X-100浓度等因素对固定化酶活性影响。结果表明,在200μL PDADMA、0.7 m L TMOS、超声50 min制得的固定化酶活性最高,能迅速硅化形成直径200 nm左右的球形微囊。在此优化条件下制备的固定化酶经重复使用7次,依然达到初始催化酶活的61.46%,经一个月冷藏后酶活仍能达到最初的74.1%。可见,经过固定化,双酶系统的稳定性得到了显著提高。展开更多
利用BLF抗原免疫BALB/c小鼠,采用常规细胞融合技术制备了6株抗BLF的单克隆抗体细胞株,并用此抗原免疫新西兰大白兔获得了55 m L的兔多抗血清。针对腹水单抗及多抗血清进行了一系列特性分析,结果显示,5株抗体效价基本上在1∶10^6以上;间...利用BLF抗原免疫BALB/c小鼠,采用常规细胞融合技术制备了6株抗BLF的单克隆抗体细胞株,并用此抗原免疫新西兰大白兔获得了55 m L的兔多抗血清。针对腹水单抗及多抗血清进行了一系列特性分析,结果显示,5株抗体效价基本上在1∶10^6以上;间接ELISA测定6株抗体与酪蛋白、乳白蛋白和β-乳球蛋白基本无交叉反应,抗体特异性良好;抗体为IgG1亚类,2B12抗体亲和力优于其他抗体。多抗血清效价可达到1∶10^7以上,抗体也具有一定的特异性。展开更多
文摘采用分步法将仿生硅化与脂质体技术相结合,模拟细胞微结构,以卵磷脂为原料,制备脂质体微囊,以胺类为诱导剂,在其表面硅化形成氧化硅壳层,实现对葡萄糖氧化酶(GOx)与辣根过氧化酶(HRP)双酶固定。研究了超声时间、诱导剂PDADMA用量、硅前驱体水解液(TMOS)用量、Triton X-100浓度等因素对固定化酶活性影响。结果表明,在200μL PDADMA、0.7 m L TMOS、超声50 min制得的固定化酶活性最高,能迅速硅化形成直径200 nm左右的球形微囊。在此优化条件下制备的固定化酶经重复使用7次,依然达到初始催化酶活的61.46%,经一个月冷藏后酶活仍能达到最初的74.1%。可见,经过固定化,双酶系统的稳定性得到了显著提高。
文摘利用BLF抗原免疫BALB/c小鼠,采用常规细胞融合技术制备了6株抗BLF的单克隆抗体细胞株,并用此抗原免疫新西兰大白兔获得了55 m L的兔多抗血清。针对腹水单抗及多抗血清进行了一系列特性分析,结果显示,5株抗体效价基本上在1∶10^6以上;间接ELISA测定6株抗体与酪蛋白、乳白蛋白和β-乳球蛋白基本无交叉反应,抗体特异性良好;抗体为IgG1亚类,2B12抗体亲和力优于其他抗体。多抗血清效价可达到1∶10^7以上,抗体也具有一定的特异性。
