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靶向沉默c-Met基因对膀胱癌T24细胞放射敏感性的影响及其机制研究
被引量:
2
1
作者
李建伟
田文静
刘民
(
指导
)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第7期842-847,共6页
目的:探讨靶向沉默肝细胞生长因子受体(c-Met)基因对膀胱癌T24细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法:通过脂质体将特异性c-Met siRNA1和c-Met siRNA2转染至膀胱癌T24细胞,设为si-c-Met1组和si-c-Met2组,转染非特异性c-Met siRNA的T24...
目的:探讨靶向沉默肝细胞生长因子受体(c-Met)基因对膀胱癌T24细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法:通过脂质体将特异性c-Met siRNA1和c-Met siRNA2转染至膀胱癌T24细胞,设为si-c-Met1组和si-c-Met2组,转染非特异性c-Met siRNA的T24细胞设为NC组,同时设置空白对照组(Blank组),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测各组T24细胞c-Met的表达,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况,克隆形成实验检测各组细胞对放射敏感性的影响,流式细胞术检测放射后细胞凋亡变化,Western blot检测放射对细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达的影响。结果:si-c-Met1组和si-c-Met2组细胞中c-Met mRNA和蛋白表达较Blank组明显降低(P<0.05),转染c-Met siRNA2干扰效果更好。靶向沉默c-Met基因对细胞增殖能力无显著影响。si-c-Met2组细胞克隆形成数、D0值和SF2值均低于Blank组(P<0.05)。放射后si-c-Met2组细胞凋亡率显著高于Blank组(P<0.05)。放射后si-c-Met2组细胞中Cleaved Caspase-3和Bax的表达显著高于Blank组(P<0.05),PI3K和p-AKT的表达显著低于Blank组(P<0.05)。NC组和Blank组间以上各指标比较均无显著差异(P>0.05)。结论:靶向沉默c-Met基因可增加膀胱癌T24细胞对放射的敏感性,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。
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关键词
C-MET基因
膀胱癌T24细胞
放射敏感性
PI3K/AKT信号通路
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职称材料
题名
靶向沉默c-Met基因对膀胱癌T24细胞放射敏感性的影响及其机制研究
被引量:
2
1
作者
李建伟
田文静
刘民
(
指导
)
机构
沧州市中心医院泌尿外二科
沧州医学高等专科学校
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第7期842-847,共6页
文摘
目的:探讨靶向沉默肝细胞生长因子受体(c-Met)基因对膀胱癌T24细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法:通过脂质体将特异性c-Met siRNA1和c-Met siRNA2转染至膀胱癌T24细胞,设为si-c-Met1组和si-c-Met2组,转染非特异性c-Met siRNA的T24细胞设为NC组,同时设置空白对照组(Blank组),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测各组T24细胞c-Met的表达,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况,克隆形成实验检测各组细胞对放射敏感性的影响,流式细胞术检测放射后细胞凋亡变化,Western blot检测放射对细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达的影响。结果:si-c-Met1组和si-c-Met2组细胞中c-Met mRNA和蛋白表达较Blank组明显降低(P<0.05),转染c-Met siRNA2干扰效果更好。靶向沉默c-Met基因对细胞增殖能力无显著影响。si-c-Met2组细胞克隆形成数、D0值和SF2值均低于Blank组(P<0.05)。放射后si-c-Met2组细胞凋亡率显著高于Blank组(P<0.05)。放射后si-c-Met2组细胞中Cleaved Caspase-3和Bax的表达显著高于Blank组(P<0.05),PI3K和p-AKT的表达显著低于Blank组(P<0.05)。NC组和Blank组间以上各指标比较均无显著差异(P>0.05)。结论:靶向沉默c-Met基因可增加膀胱癌T24细胞对放射的敏感性,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。
关键词
C-MET基因
膀胱癌T24细胞
放射敏感性
PI3K/AKT信号通路
Keywords
c-Met gene
Bladder cancer T24 cells
Radiosensitivity
PI3K/AKT signaling pathway
分类号
R181.24 [医药卫生—流行病学]
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题名
作者
出处
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1
靶向沉默c-Met基因对膀胱癌T24细胞放射敏感性的影响及其机制研究
李建伟
田文静
刘民
(
指导
)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
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