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猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用
1
作者
曾苗苗
杨小曼
+9 位作者
张鑫
刘大凯
时洪艳
张记宇
张燎原
陈建飞
冯廷帅
李修文
石达
冯力
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第1期319-326,共8页
为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)血清抗体的快速检测方法,本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用...
为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)血清抗体的快速检测方法,本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,以兔抗猪HRP-IgG作为二抗,利用方阵滴定法优化各反应条件,建立了一种以SADS-CoV N蛋白为靶标的检测SADS-CoV血清抗体的间接ELISA方法,并对此方法的敏感性、特异性、重复性及临床应用价值进行鉴定。SDS-PAGE及Western blot结果显示,重组表达的N蛋白约为70 ku,且具有良好的反应原性。采用该方法检测SADS-CoV阳性血清抗体效价可达1∶3 200,并且与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒(PCV)阳性血清均无交叉反应,具有良好的敏感性和特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有较好的重复性。利用该方法和间接免疫荧光方法(IFA)分别对50份猪临床血清样品进行检测,结果显示二者的总符合率为98%。综上,本研究建立了一种基于SADS-CoV N蛋白的间接ELISA抗体检测方法,可用于临床SADS-CoV血清抗体检测以及流行病学的监测,对防控SADS-CoV的流行具有重要意义。
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关键词
猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)
N蛋白
原核表达
间接ELISA
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职称材料
浅议足球音乐之内涵
2
作者
刘大凯
《黄河之声》
2017年第3期121-122,共2页
常言道:"文体不分家",体育与音乐的关系常被研究。本文就足球音乐的定义、内涵、分类、功能做一个系统研究。
关键词
足球音乐
体育
音乐
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职称材料
处理机匣特征参数变化对多级轴流压气机性能的影响
被引量:
2
3
作者
吴昌明
刘大凯
《航空发动机》
北大核心
1997年第1期38-43,共6页
处理机匣对压气机性能的影响已有很多文献发表,大部分都是针对不同处理机匣对压气机性能影响的结果。而本文要介绍的内容则是针对小叶片开槽驻定式处理机匣,在一台四级低压轴流式压气机中,通过改变处理机匣对一级转子叶尖的覆盖比、容...
处理机匣对压气机性能的影响已有很多文献发表,大部分都是针对不同处理机匣对压气机性能影响的结果。而本文要介绍的内容则是针对小叶片开槽驻定式处理机匣,在一台四级低压轴流式压气机中,通过改变处理机匣对一级转子叶尖的覆盖比、容腔比、前伸量以及加大处理机匣开度比对压气机试验性能的影响。试验均在某全台压气机试验器上进行。压气机进口条件为均匀进气。
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关键词
处理机匣
多级
轴流
压气机
航空发动机
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职称材料
多处理机的并行图形系统简介
4
作者
付忠传
阚欣
+1 位作者
胡刚
刘大凯
《黑龙江电子技术》
1999年第6期31-31,36,共2页
简要介绍了计算机图形系统的多处理机并行结构的发展趋势及其主要设计问题,在此基础上,介绍了图形并行处理系统的两种结构方案。
关键词
多处理机
对象并行
图象并行
计算机图形学
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职称材料
一种适合于笔划跟踪的并行细化算法
5
作者
王延青
孙继发
刘大凯
《哈尔滨工业大学学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
1994年第4期42-45,共4页
为了解决字符识别过程中笔划不易跟踪及其若干特征难以提取等问题,给出了一种新的适合于笔划跟踪的并行细化算法。该算法运用井行机理,在满足细化基本要求的前提下,去掉了不便于笔划跟踪的冗余点,细化速度快且质量较好。该算法已成...
为了解决字符识别过程中笔划不易跟踪及其若干特征难以提取等问题,给出了一种新的适合于笔划跟踪的并行细化算法。该算法运用井行机理,在满足细化基本要求的前提下,去掉了不便于笔划跟踪的冗余点,细化速度快且质量较好。该算法已成功地运用于手写数字识别系统及汉字识别系统中,其中利用该算法的表格识别系统已经达到实用水平。
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关键词
模式识别
笔划跟踪
并行算法
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职称材料
新能源汽车维修的关键技术
被引量:
1
6
作者
刘大凯
《时代汽车》
2021年第24期113-114,共2页
随着新能源汽车推广力度增加,市场上新能源汽车数量显著增加,在保护生态环境、实现可持续发展方面发挥着重要作用。文中选择新能源汽车为着手点,分析新能源汽车维修现状,结合实际情况给出做好新能源汽车维修的技术方案,为类似研究提供...
随着新能源汽车推广力度增加,市场上新能源汽车数量显著增加,在保护生态环境、实现可持续发展方面发挥着重要作用。文中选择新能源汽车为着手点,分析新能源汽车维修现状,结合实际情况给出做好新能源汽车维修的技术方案,为类似研究提供借鉴。
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关键词
新能源汽车
电池维修
驱动系统
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职称材料
英语教学中的自信心培养
7
作者
刘大凯
《成才之路》
2009年第14期35-35,共1页
在英语教学活动中,教育者应帮助学生树立较强的学习自信心,促进其主动学习英语知识,提高英语语言能力。
关键词
英语教学活动
自信心培养
英语语言能力
学习自信心
英语知识
主动学习
教育者
学生
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职称材料
题名
猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用
1
作者
曾苗苗
杨小曼
张鑫
刘大凯
时洪艳
张记宇
张燎原
陈建飞
冯廷帅
李修文
石达
冯力
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
出处
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第1期319-326,共8页
基金
国家自然科学基金区域创新发展联合基金(U23A20236)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610302022015)。
文摘
为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)血清抗体的快速检测方法,本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,以兔抗猪HRP-IgG作为二抗,利用方阵滴定法优化各反应条件,建立了一种以SADS-CoV N蛋白为靶标的检测SADS-CoV血清抗体的间接ELISA方法,并对此方法的敏感性、特异性、重复性及临床应用价值进行鉴定。SDS-PAGE及Western blot结果显示,重组表达的N蛋白约为70 ku,且具有良好的反应原性。采用该方法检测SADS-CoV阳性血清抗体效价可达1∶3 200,并且与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒(PCV)阳性血清均无交叉反应,具有良好的敏感性和特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有较好的重复性。利用该方法和间接免疫荧光方法(IFA)分别对50份猪临床血清样品进行检测,结果显示二者的总符合率为98%。综上,本研究建立了一种基于SADS-CoV N蛋白的间接ELISA抗体检测方法,可用于临床SADS-CoV血清抗体检测以及流行病学的监测,对防控SADS-CoV的流行具有重要意义。
关键词
猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)
N蛋白
原核表达
间接ELISA
Keywords
swine acute diarrhea syndrome coronavirus(SADS-CoV)
N protein
prokaryotic expression
indirect ELISA
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
浅议足球音乐之内涵
2
作者
刘大凯
机构
齐鲁师范学院教师教育学院
出处
《黄河之声》
2017年第3期121-122,共2页
文摘
常言道:"文体不分家",体育与音乐的关系常被研究。本文就足球音乐的定义、内涵、分类、功能做一个系统研究。
关键词
足球音乐
体育
音乐
分类号
G843 [文化科学—体育训练]
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职称材料
题名
处理机匣特征参数变化对多级轴流压气机性能的影响
被引量:
2
3
作者
吴昌明
刘大凯
机构
沈阳航空发动机研究所
出处
《航空发动机》
北大核心
1997年第1期38-43,共6页
文摘
处理机匣对压气机性能的影响已有很多文献发表,大部分都是针对不同处理机匣对压气机性能影响的结果。而本文要介绍的内容则是针对小叶片开槽驻定式处理机匣,在一台四级低压轴流式压气机中,通过改变处理机匣对一级转子叶尖的覆盖比、容腔比、前伸量以及加大处理机匣开度比对压气机试验性能的影响。试验均在某全台压气机试验器上进行。压气机进口条件为均匀进气。
关键词
处理机匣
多级
轴流
压气机
航空发动机
分类号
V235.113 [航空宇航科学与技术—航空宇航推进理论与工程]
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职称材料
题名
多处理机的并行图形系统简介
4
作者
付忠传
阚欣
胡刚
刘大凯
机构
哈尔滨工业大学
出处
《黑龙江电子技术》
1999年第6期31-31,36,共2页
文摘
简要介绍了计算机图形系统的多处理机并行结构的发展趋势及其主要设计问题,在此基础上,介绍了图形并行处理系统的两种结构方案。
关键词
多处理机
对象并行
图象并行
计算机图形学
分类号
TP391.41 [自动化与计算机技术—计算机应用技术]
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职称材料
题名
一种适合于笔划跟踪的并行细化算法
5
作者
王延青
孙继发
刘大凯
机构
哈尔滨工业大学计算机中心
出处
《哈尔滨工业大学学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
1994年第4期42-45,共4页
文摘
为了解决字符识别过程中笔划不易跟踪及其若干特征难以提取等问题,给出了一种新的适合于笔划跟踪的并行细化算法。该算法运用井行机理,在满足细化基本要求的前提下,去掉了不便于笔划跟踪的冗余点,细化速度快且质量较好。该算法已成功地运用于手写数字识别系统及汉字识别系统中,其中利用该算法的表格识别系统已经达到实用水平。
关键词
模式识别
笔划跟踪
并行算法
Keywords
Pattern recognition
skeletonization
stroke tracing
分类号
TP338.6 [自动化与计算机技术—计算机系统结构]
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职称材料
题名
新能源汽车维修的关键技术
被引量:
1
6
作者
刘大凯
机构
贵州省遵义市播州区中等职业学校
出处
《时代汽车》
2021年第24期113-114,共2页
文摘
随着新能源汽车推广力度增加,市场上新能源汽车数量显著增加,在保护生态环境、实现可持续发展方面发挥着重要作用。文中选择新能源汽车为着手点,分析新能源汽车维修现状,结合实际情况给出做好新能源汽车维修的技术方案,为类似研究提供借鉴。
关键词
新能源汽车
电池维修
驱动系统
Keywords
new energy vehicles
battery maintenance
drive system
分类号
F42 [经济管理—产业经济]
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职称材料
题名
英语教学中的自信心培养
7
作者
刘大凯
机构
遵义县三合镇中学
出处
《成才之路》
2009年第14期35-35,共1页
文摘
在英语教学活动中,教育者应帮助学生树立较强的学习自信心,促进其主动学习英语知识,提高英语语言能力。
关键词
英语教学活动
自信心培养
英语语言能力
学习自信心
英语知识
主动学习
教育者
学生
分类号
G447 [哲学宗教—发展与教育心理学]
G444 [哲学宗教—发展与教育心理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用
曾苗苗
杨小曼
张鑫
刘大凯
时洪艳
张记宇
张燎原
陈建飞
冯廷帅
李修文
石达
冯力
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
浅议足球音乐之内涵
刘大凯
《黄河之声》
2017
0
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职称材料
3
处理机匣特征参数变化对多级轴流压气机性能的影响
吴昌明
刘大凯
《航空发动机》
北大核心
1997
2
在线阅读
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职称材料
4
多处理机的并行图形系统简介
付忠传
阚欣
胡刚
刘大凯
《黑龙江电子技术》
1999
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
5
一种适合于笔划跟踪的并行细化算法
王延青
孙继发
刘大凯
《哈尔滨工业大学学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
1994
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
6
新能源汽车维修的关键技术
刘大凯
《时代汽车》
2021
1
在线阅读
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职称材料
7
英语教学中的自信心培养
刘大凯
《成才之路》
2009
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职称材料
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