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2004年黑龙江省新城疫病毒分子流行病学分析被引量：9: 1; 作者连宏军刘培欣 +5 位作者闫丽辉曹殿军孙建宏梁宏志韩正博冉多良《动物医学进展》 CSCD 2005年第7期91-97,共7页; 2004年从黑龙江省部分鸡场疑似新城疫(ND)病死鸡和鸽体内分离到9株NDV。对这9株NDV生物学特性进行测定,并对其F基因包括裂解位点在内的540bp片段进行了克隆、测序和同源性分析。结果表明,9株NDV鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接... 展开更多; 关键词 2004年黑龙江省流行病学分析新城疫病毒分子同源性分析裂解位点氨基酸同源性遗传距离 NDV 生物学特性系统发生树分离株死亡时间 F蛋白病死鸡 F基因强毒株核苷酸分析表顺序鸡场接种日龄鸡胚鸽源; 在线阅读下载PDF 职称材料

13株新城疫病毒强毒株的分离鉴定及部分生物学特性被引量：9: 2; 作者连宏军闫丽辉 +4 位作者刘培欣曹殿军韩正博孙建宏梁宏志《动物医学进展》 CSCD 2006年第6期64-69,共6页; 2004年-2005年从黑龙江省11个地区鸡场、鸽场、鹅场疑似新城疫(ND)病死鸡、鸽、鹅体内分离到24株具有血凝活性的病毒,经HA、HI试验和电镜观察证实了13株病毒为NDV。其鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(IC-PI)分别为36.... 展开更多; 关键词新城疫病毒分离鉴定生物学特性毒株; 在线阅读下载PDF 职称材料

NDV La Sota株、V4株F蛋白表位的预测被引量：6: 3; 作者孙建宏曹殿军 +1 位作者刘培欣闫丽辉《动物医学进展》 CSCD 2005年第3期72-75,共4页; 为进一步研究 2 种疫苗的表位,以深入探讨NDV La Sota株、V4疫苗免疫差异的根本所在。应用亲水性、可及性、抗原性、可塑性和二级结构预测等 5 种参数分别对新城疫病毒 La Sota株和 V4 株 F蛋白的 B细胞抗原表位进行了综合预测,预测到... 展开更多; 关键词抗原表位 B细胞表位 F蛋白 NDV 预测抗原性疫苗免疫种参新城疫病毒氨基酸序列; 在线阅读下载PDF 职称材料

Menangle病毒研究进展被引量：2: 4; 作者连宏军刘培欣 +1 位作者曹殿军冉多良《动物医学进展》 CSCD 2005年第2期32-36,共5页; Menangle病毒(MenV)是近几年出现的一种能导致新生仔猪繁殖障碍综合征和人类类似流感症状的副黏病毒科的病原体。 MenV于1997年首次在澳大利亚新南威尔士商品化猪场分离得到。生物分类、分子生物学、系统发育树分析和流行病学等多方... 展开更多; 关键词 Menangle病毒分子生物学流行病学诊断; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪γ干扰素基因真核重组表达质粒的构建及活性测定被引量：1: 5; 作者张立娜刘培欣 +3 位作者曹殿军闫丽辉贾竞波危艳武《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第S2期101-104,共4页; 以含有全长猪γ干扰素基因的质粒为模板,通过PCR方法扩增猪γ干扰素并引入酶切位点,酶切后与PCI真核表达载体连接在一起,测序后经比较,所扩增序列同Genebank报道的IFN-γ序列同源性为99·8%.将重组质粒转染PK细胞,检测所转染的pIFN... 展开更多; 关键词猪Γ干扰素真核表达活性测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

La Sota与V4疫苗F蛋白的B细胞表位活性检测与比较被引量：1: 6; 作者孙建宏曹殿军 +3 位作者刘培欣闫丽辉王磊刘宝全《动物医学进展》 CSCD 2005年第10期55-60,共6页; 根据La Sota和V4疫苗株F蛋白B细胞表位预测的结果,进行了表位区的鉴定和比较。将两疫苗株F基因预测存在差异的表位,根据序列位置邻近合并分成6段表位区,分别对每个毒株的6段表位区进行了亚克隆,并对每个毒株的预测区进行了表达。应用建... 展开更多; 关键词 ND LA Sota疫苗 V4疫苗表位预测; 在线阅读下载PDF 职称材料

银狐生长激素cDNA克隆和原核表达被引量：2: 7; 作者刘玉堂胡晓航 +3 位作者闫丽辉曹殿军刘培欣杨传平《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第4期26-30,共5页; 为了获得重组的银狐生长激素,本试验用Trizol的方法从银狐脑垂体组织中提取总RNA,以mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增出生长激素成熟cDNA片段并克隆到载体质粒pMD18-T中;通过含有BamHⅠ酶切位点的特异引物从pMD18-T-fGH中亚克隆出cDNA片段,... 展开更多; 关键词银狐生长激素克隆原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

mRNA差异显示技术及其改进被引量：3: 8; 作者杨新艳刘培欣 +1 位作者单文鲁曹殿军《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期19-21,共3页; 分子生物学的首要任务之一就是比较不同细胞间或同一细胞不同时间与空间基因表达的差异。在多种基因检测技术中 ,mRNA差异显示技术作为研究细胞、组织在不同条件下 ,基因表达水平差异的重要手段 ,以不可替代的优势已被广泛用于生物学领... 展开更多; 关键词 mRNA差异显示技术改进技术分子生物学生理状态; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名2004年黑龙江省新城疫病毒分子流行病学分析被引量：9: 1; 作者连宏军刘培欣闫丽辉曹殿军孙建宏梁宏志韩正博冉多良; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室新疆农业大学哈尔滨市兽医卫生防疫站; 出处《动物医学进展》 CSCD 2005年第7期91-97,共7页; 基金资助:黑龙江省科学技术计划项目(GB02B505); 文摘 2004年从黑龙江省部分鸡场疑似新城疫(ND)病死鸡和鸽体内分离到9株NDV。对这9株NDV生物学特性进行测定,并对其F基因包括裂解位点在内的540bp片段进行了克隆、测序和同源性分析。结果表明,9株NDV鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)分别在47.8h～78.4h和1.51～2.00之间;8个分离株在F蛋白裂解位点氨基酸顺序为112RRQKRF117,1个分离株F蛋白裂解位点氨基酸顺序为112RRQRRF117,表明了它们全为ND中、强毒株。同源性分析显示,9株NDV分离株之间核苷酸与推导的氨基酸同源性分别为79.7%～99.7%和79.8%～100%;系统发生树分析表明,6株分离株与台湾株(TW98、TW99和TW2000等)遗传距离较近,可能有共同的起源,为基因Ⅶe型NDV,2株为鸽源NDV基因Ⅵ型,1株与我国特有的F48E9遗传距离最近,为基因Ⅸ型NDV。; 关键词 2004年黑龙江省流行病学分析新城疫病毒分子同源性分析裂解位点氨基酸同源性遗传距离 NDV 生物学特性系统发生树分离株死亡时间 F蛋白病死鸡 F基因强毒株核苷酸分析表顺序鸡场接种日龄鸡胚鸽源; Keywords Newcastle disease virus molecular epidemiology genetic variation; 分类号 S858.315.3 [农业科学—临床兽医学] U491.31 [交通运输工程—交通运输规划与管理]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名13株新城疫病毒强毒株的分离鉴定及部分生物学特性被引量：9: 2; 作者连宏军闫丽辉刘培欣曹殿军韩正博孙建宏梁宏志; 机构新疆农垦科学院新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室中国农科院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨市兽医卫生防疫站; 出处《动物医学进展》 CSCD 2006年第6期64-69,共6页; 基金黑龙江省科学技术计划项目(GB02B505); 文摘 2004年-2005年从黑龙江省11个地区鸡场、鸽场、鹅场疑似新城疫(ND)病死鸡、鸽、鹅体内分离到24株具有血凝活性的病毒,经HA、HI试验和电镜观察证实了13株病毒为NDV。其鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(IC-PI)分别为36.8 h^73.6 h和1.51~2.00之间,属于NDV强毒株或中强毒株。除HLJ-12-04株外,强毒株的血凝素热稳定性较差,属快速或中速血凝解脱型;弱毒株的血凝素热稳定性好,属慢速血凝解脱型。所有毒株均可较好地凝集鸡和人(O型血)的红细胞,但对其他动物的红细胞凝集性差异较大,对马和兔的红细胞凝集无规律。; 关键词新城疫病毒分离鉴定生物学特性毒株; Keywords Newcastle disease virus isolation and identification biological characteristics; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名NDV La Sota株、V4株F蛋白表位的预测被引量：6: 3; 作者孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 出处《动物医学进展》 CSCD 2005年第3期72-75,共4页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2003AA241110); 文摘为进一步研究 2 种疫苗的表位,以深入探讨NDV La Sota株、V4疫苗免疫差异的根本所在。应用亲水性、可及性、抗原性、可塑性和二级结构预测等 5 种参数分别对新城疫病毒 La Sota株和 V4 株 F蛋白的 B细胞抗原表位进行了综合预测,预测到二者的 B细胞抗原表位分别有 19 个,这些表位中含有已经确定的 5 个中和表位, A1: 72aa, A2:78aa, A3: 79aa, A4: 157 aa、161 aa、170 aa、171 aa,A5:343 aa。比较发现,二者有 9 个预测的B细胞表位氨基酸序列存在差异。; 关键词抗原表位 B细胞表位 F蛋白 NDV 预测抗原性疫苗免疫种参新城疫病毒氨基酸序列; Keywords ND vaccine epitope prediction; 分类号 S852 [农业科学—基础兽医学] R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Menangle病毒研究进展被引量：2: 4; 作者连宏军刘培欣曹殿军冉多良; 机构中国农科院哈尔滨兽医研究所新疆农业大学动物医学学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 2005年第2期32-36,共5页; 文摘 Menangle病毒(MenV)是近几年出现的一种能导致新生仔猪繁殖障碍综合征和人类类似流感症状的副黏病毒科的病原体。 MenV于1997年首次在澳大利亚新南威尔士商品化猪场分离得到。生物分类、分子生物学、系统发育树分析和流行病学等多方面综合研究表明,MenV具有腮腺炎病毒属的基本特征,并与腮腺炎病毒属(Rubulavirus)的另一成员Tiomanvirus(TiV)亲源关系最近,从而证实MenV为腮腺炎病毒属的新成员。文章重点对Menangle病毒分子生物学、流行病学和诊断等方面内容进行了综述。; 关键词 Menangle病毒分子生物学流行病学诊断; Keywords Menangle virus molecular biology epidemiology diagnosis; 分类号 S855.99 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪γ干扰素基因真核重组表达质粒的构建及活性测定被引量：1: 5; 作者张立娜刘培欣曹殿军闫丽辉贾竞波危艳武; 机构东北林业大学野生动物资源学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室; 出处《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第S2期101-104,共4页; 文摘以含有全长猪γ干扰素基因的质粒为模板,通过PCR方法扩增猪γ干扰素并引入酶切位点,酶切后与PCI真核表达载体连接在一起,测序后经比较,所扩增序列同Genebank报道的IFN-γ序列同源性为99·8%.将重组质粒转染PK细胞,检测所转染的pIFN-γ的抗病毒活性.试验结果表明,转染pIFN-γ试验组与正常细胞接毒对照组比较有显著差异,说明所构建的重组质粒转染后具有抗病毒作用.; 关键词猪Γ干扰素真核表达活性测定; Keywords porcine IFN-gamma, eukaryotic expression, activity mensuration; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S852.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名La Sota与V4疫苗F蛋白的B细胞表位活性检测与比较被引量：1: 6; 作者孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉王磊刘宝全; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学; 出处《动物医学进展》 CSCD 2005年第10期55-60,共6页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2003AA241110); 文摘根据La Sota和V4疫苗株F蛋白B细胞表位预测的结果,进行了表位区的鉴定和比较。将两疫苗株F基因预测存在差异的表位,根据序列位置邻近合并分成6段表位区,分别对每个毒株的6段表位区进行了亚克隆,并对每个毒株的预测区进行了表达。应用建立的Tricine缓冲体系50 g/L^200 g/L线性梯度聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳对表达情况进行了分析,得到5段多肽的大小分别是P1为8.0 ku,P2为10.8 ku,P4为11.6 ku,P5为13.5 ku,P6为10.5 ku。应用La Sota特异性抗血清,利用Western blot-ting对表达的各肽段进行了抗原性鉴定。结果表明,P1、P4、P5、P6段呈阳性反应,说明其中含有线性B细胞表位。这4段分别位于F蛋白的1 aa^48 aa,201 aa^274 aa,377 aa^458 aa和469 aa^530 aa,以前发现的中和性表位均不在这4段区域内。而P2段在West-ern blotting中无抗体反应性,表明它不含线性表位。比较研究发现NDV La Sota与V4株的P4区的B细胞表位活性存在着重要的差异,这种差异可能造成两个毒株的免疫原性差异。; 关键词 ND LA Sota疫苗 V4疫苗表位预测; Keywords ND La Sota vaccine V4 vaccine epitope prediction; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名银狐生长激素cDNA克隆和原核表达被引量：2: 7; 作者刘玉堂胡晓航闫丽辉曹殿军刘培欣杨传平; 机构东北林业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第4期26-30,共5页; 文摘为了获得重组的银狐生长激素,本试验用Trizol的方法从银狐脑垂体组织中提取总RNA,以mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增出生长激素成熟cDNA片段并克隆到载体质粒pMD18-T中;通过含有BamHⅠ酶切位点的特异引物从pMD18-T-fGH中亚克隆出cDNA片段,并将其重组到pPROEXTMHta质粒中,构建了银狐生长激素原核表达质粒pPRO-EXTMHta-fGH。将pPROEXTMHta-fGH原核表达质粒转化DH5α大肠杆菌,用终浓度1 mmol/L IPTG进行诱导,通过SDS-PAGE进行检测。结果表明在转化的大肠杆菌中检测到分子量为26 kD的fGH蛋白的存在,表达量占菌体蛋白总量的35%,并且表达产物以包涵体的形式存在。; 关键词银狐生长激素克隆原核表达; Keywords vulpes vulpes growth hormone cloning prokaryotie expression; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名mRNA差异显示技术及其改进被引量：3: 8; 作者杨新艳刘培欣单文鲁曹殿军; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室新疆农业大学; 出处《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期19-21,共3页; 文摘分子生物学的首要任务之一就是比较不同细胞间或同一细胞不同时间与空间基因表达的差异。在多种基因检测技术中 ,mRNA差异显示技术作为研究细胞、组织在不同条件下 ,基因表达水平差异的重要手段 ,以不可替代的优势已被广泛用于生物学领域。该技术与传统的消减杂交等方法进行比较具有简便、快捷、灵敏、高效等优点 ,但也存在假阳性率高、易污染等缺点。为了克服以上缺点又不断涌现出一些改进技术。文章对该技术的原理。; 关键词 mRNA差异显示技术改进技术分子生物学生理状态; Keywords mRNA differential display gene expression improvement; 分类号 Q522.2 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	2004年黑龙江省新城疫病毒分子流行病学分析	连宏军刘培欣闫丽辉曹殿军孙建宏梁宏志韩正博冉多良	《动物医学进展》 CSCD	2005	9	在线阅读下载PDF 职称材料
2	13株新城疫病毒强毒株的分离鉴定及部分生物学特性	连宏军闫丽辉刘培欣曹殿军韩正博孙建宏梁宏志	《动物医学进展》 CSCD	2006	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	NDV La Sota株、V4株F蛋白表位的预测	孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉	《动物医学进展》 CSCD	2005	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	Menangle病毒研究进展	连宏军刘培欣曹殿军冉多良	《动物医学进展》 CSCD	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	猪γ干扰素基因真核重组表达质粒的构建及活性测定	张立娜刘培欣曹殿军闫丽辉贾竞波危艳武	《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	La Sota与V4疫苗F蛋白的B细胞表位活性检测与比较	孙建宏曹殿军刘培欣闫丽辉王磊刘宝全	《动物医学进展》 CSCD	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	银狐生长激素cDNA克隆和原核表达	刘玉堂胡晓航闫丽辉曹殿军刘培欣杨传平	《中国畜牧兽医》 CAS	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	mRNA差异显示技术及其改进	杨新艳刘培欣单文鲁曹殿军	《动物医学进展》 CSCD	2004	3	在线阅读下载PDF 职称材料