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重组质粒pEGFP-c1-FLT3L的构建及鉴定
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作者 孙念峰 孟庆义 +3 位作者 田爱玲 王瑞华 刘兆轩 李博 《中国现代普通外科进展》 CAS 2011年第9期684-686,706,共4页
目的:构建重组质粒pEGFP-c1-FLT3L并鉴定,为下一步利用纳米载体介导FL基因移植作用于结肠癌细胞的体内实验奠定基础。方法:应用基因合成和克隆技术构建重组质粒pEGFP-c1-FLT3L,并进行酶切鉴定及序列测定,以检测其核苷酸序列与设计的是... 目的:构建重组质粒pEGFP-c1-FLT3L并鉴定,为下一步利用纳米载体介导FL基因移植作用于结肠癌细胞的体内实验奠定基础。方法:应用基因合成和克隆技术构建重组质粒pEGFP-c1-FLT3L,并进行酶切鉴定及序列测定,以检测其核苷酸序列与设计的是否完全一致。结果:重组质粒pEGFP-c1-FLT3L经酶切鉴定分析,琼脂糖凝胶电泳鉴定可见清晰地切出与FLT3L基因大小相符的片段并与DNAmarker相符,同时进行序列测定,证实其核苷酸序列与设计完全一致。结论:成功构建重组质粒pEGFP-c1-FLT3L并得到正确鉴定,为下一步结肠癌的基因治疗打下实验基础。 展开更多
关键词 重组质粒 FL基因 基因治疗
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重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL的构建及鉴定
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作者 孙念峰 孟庆义 +3 位作者 田爱玲 王瑞华 刘兆轩 李博 《中国现代普通外科进展》 CAS 2010年第11期849-851,857,共4页
目的:构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL并鉴定,为下一步利用纳米载体介导FL基因移植作用于结肠癌细胞的体内实验奠定基础。方法:应用基因合成和克隆技术构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL,并进行酶切鉴定及序列测定,以检测其核苷酸序列与设计... 目的:构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL并鉴定,为下一步利用纳米载体介导FL基因移植作用于结肠癌细胞的体内实验奠定基础。方法:应用基因合成和克隆技术构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL,并进行酶切鉴定及序列测定,以检测其核苷酸序列与设计是否完全一致。结果:重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL经酶切鉴定分析,琼脂糖凝胶电泳鉴定可见清晰地切出与TRAIL基因大小相符的片段并与DNA marker相符,同时进行序列测定,证实其核苷酸序列与设计完全一致。结论:成功构建重组质粒pDsRed1-C1-TRAIL并得到正确鉴定,为下一步结肠癌的基因治疗打下实验基础。 展开更多
关键词 重组质粒 TRAIL基因 基因治疗
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方正化保定殉难考
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作者 刘兆轩 《保定学院学报》 2013年第1期132-136,共5页
明末宦官方正化,在崇祯十七年三月甲申之变时,殁于保定之役。目前包括《明人传记资料索引》在内的关于明代史料研究方面,对于方正化的资料只知有《明史》,而事实上关于方正化的史料并非仅此一种。通过对错综复杂的相关文献进行疏理和考... 明末宦官方正化,在崇祯十七年三月甲申之变时,殁于保定之役。目前包括《明人传记资料索引》在内的关于明代史料研究方面,对于方正化的资料只知有《明史》,而事实上关于方正化的史料并非仅此一种。通过对错综复杂的相关文献进行疏理和考证,有助于明末甲申之变历史的相关研究。 展开更多
关键词 方正化 保定 甲申之变 明末 崇祯
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“三省吾身”之“三”的虚实探析
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作者 刘兆轩 《现代语文(下旬.语言研究)》 2012年第11期40-42,共3页
古代汉语中,“三”“九”等数词存在“具体数值”与“泛指”,一虚一实两种意义,在理解这类数词时应当结合具体语境分析其词义。杨伯峻先生在对“三省吾身”的解说中,以“巧合”解释古代汉语中“数词+动词”与上下文指代相吻合的现... 古代汉语中,“三”“九”等数词存在“具体数值”与“泛指”,一虚一实两种意义,在理解这类数词时应当结合具体语境分析其词义。杨伯峻先生在对“三省吾身”的解说中,以“巧合”解释古代汉语中“数词+动词”与上下文指代相吻合的现象,有失稳妥。 展开更多
关键词 三省吾身 数词 具体数值 泛指巧合说
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人Arresten基因真核表达质粒的构建
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作者 曹凯 孟庆义 +2 位作者 王瑞华 刘兆轩 王荣飞 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第30期25-27,共3页
目的构建人Arresten基因的真核表达质粒。方法设计人Arresten基因引物序列,取100 mg新鲜的胎盘组织提取总RNA,采用RT-PCR法扩增Arresten基因。将获取的Arresten基因片段和p IRES2-EGFP质粒分别用Bam HⅠ和EcoRⅠ作双酶切,将酶切产物与... 目的构建人Arresten基因的真核表达质粒。方法设计人Arresten基因引物序列,取100 mg新鲜的胎盘组织提取总RNA,采用RT-PCR法扩增Arresten基因。将获取的Arresten基因片段和p IRES2-EGFP质粒分别用Bam HⅠ和EcoRⅠ作双酶切,将酶切产物与质粒连接,转化感受态大肠杆菌DH-5α进行真核表达。采用酶切、菌液PCR及测序的方法检测Arresten基因真核表达质粒构建的正确性。结果经双酶切鉴定,得到1条约700 bp的片段和1条与p IRES2-EGFP空载体(5.3 kb)相近的片段,符合Arresten基因重组质粒大小。经重组质粒的菌液PCR鉴定,7组菌液均扩增出700 bp大小的扩增片段,均为阳性克隆。测序结果示,Arresten基因mRNA与GenBank中人Arresten序列完全一致。结论成功构建了人Arresten基因的真核表达质粒。 展开更多
关键词 Arresten基因 表皮生长因子受体质粒 真核 酶切 血管狭窄
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