血清中胎盘来源外泌体的分离与鉴定 被引量：22

1

作者 李玉静 刁振宇 +4 位作者 薛平平 沈莉 龚萍 颜桂军 胡娅莉 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第6期632-636,共5页

目的妊娠期间,胎盘可释放外泌体到母体循环,在正常妊娠或胎盘相关妊娠并发症中发挥重要作用。文中旨在建立简便、高效、低耗的母血清胎盘来源外泌体的分离纯化方法,为妊娠疾病研究奠定基础。方法蔗糖梯度离心联合2次8%PEG6000沉淀,分离... 目的妊娠期间,胎盘可释放外泌体到母体循环,在正常妊娠或胎盘相关妊娠并发症中发挥重要作用。文中旨在建立简便、高效、低耗的母血清胎盘来源外泌体的分离纯化方法,为妊娠疾病研究奠定基础。方法蔗糖梯度离心联合2次8%PEG6000沉淀,分离纯化正常孕妇血清中胎盘来源外泌体,Western blot检测胎盘来源外泌体标记蛋白分子（CD63、CD81、PLAP）,银染法分析各密度层中所有蛋白质条带,透射电镜鉴定胎盘来源外泌体形态,动态光散射测定外泌体粒径及分布。结果通过蔗糖密度梯度离心后得到的各分层液经蛋白质SDS-PAGE胶电泳,银染后可见各蛋白分子条带清晰可见,Western blot结果显示CD63、CD81和PLAP同时表达于21%～34%蔗糖密度层,证明血清胎盘外泌体主要存在于1.09～1.16g/m L蔗糖密度层。透射电镜鉴定获得的胎盘来源外泌体形态符合一般外泌体特征,且特异表达PLAP。动态光散射测定获得的胎盘外泌体直径分布于28～91 nm,且大小均一。结论成功建立了一种简便、快捷、高效分离血清中胎盘来源外泌体的改良方法,为研究胎盘外泌体在正常妊娠及胎盘相关并发症中的作用奠定实验基础。 展开更多

关键词 外泌体 胎盘 分离 胎盘碱性磷酸酶

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杆状病毒早期启动子载体的构建及报道基因的表达 被引量：3

2

作者 邓小昭 朱反修 +2 位作者 刁振宇 高健 齐义鹏 《医学研究生学报》 CAS 2001年第3期200-203,,206,,共5页

目的 :用苜蓿尺蠖核多角体病毒 (Ac NPV)的 IE1基因启动子构建杆状病毒早期基因启动子载体。　方法 :以 Ac NPV p10基因为侧翼序列 ,并将新霉素抗性基因 (neo)插入 IE1基因启动子下游 ,得到转移载体 p Ac PIneo。将它和野生型 Ac NPV DN... 目的 :用苜蓿尺蠖核多角体病毒 (Ac NPV)的 IE1基因启动子构建杆状病毒早期基因启动子载体。　方法 :以 Ac NPV p10基因为侧翼序列 ,并将新霉素抗性基因 (neo)插入 IE1基因启动子下游 ,得到转移载体 p Ac PIneo。将它和野生型 Ac NPV DNA共转染昆虫细胞 Sf9,由于 neo基因的表达 ,通过 G418的选择和富集作用 ,得到重组病毒 v Ac PIneo的纯培养。　结果 :用酶切和 Southern印迹杂交证明 ,neo基因整合于 Ac NPV基因组的 p10基因位相。　结论 :成功地构建了杆状病毒早期启动子载体 。 展开更多

关键词 昆虫杆状病毒 IE1基因 p10基因 转移载体 新霉素抗性基因

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HOXA10与连续TTAT基序结合抑制p/CAF表达 被引量：5

3

作者 华美娟 赵静 +4 位作者 陈林君 颜桂军 刁振宇 胡娅莉 孙海翔 《医学研究生学报》 CAS 2009年第11期1143-1146,1149,I0003,共6页

目的:转录因子HOXA10在胚胎着床和子宫内膜蜕膜化过程中发挥重要作用。p/CAF是HOXA10新的靶基因,文章旨在筛选并鉴定p/CAF启动子区与HOXA10功能性结合的序列。方法:制备重组腺病毒HOXA10(ad-HOXA10),用于感染人子宫内膜间质细胞(hESC);... 目的:转录因子HOXA10在胚胎着床和子宫内膜蜕膜化过程中发挥重要作用。p/CAF是HOXA10新的靶基因,文章旨在筛选并鉴定p/CAF启动子区与HOXA10功能性结合的序列。方法:制备重组腺病毒HOXA10(ad-HOXA10),用于感染人子宫内膜间质细胞(hESC);构建p/CAF启动子区多种突变报告基因质粒;采用萤光素酶报告基因实验检测结合腺病毒介导的HOXA10基因过表达,分析hESC中HOXA10对p/CAF启动子转录活性的调控。结果:获得滴度为2.4×1011ifu/mL的重组ad-HOXA10,对hESC的感染率达到80%以上。HOXA10通过结合连续的3个TTAT(-710^-674 nt)基序抑制p/CAF启动子活性,连续的3个TTAT基序的一级结构影响HOXA10的功能性结合。结论:p/CAF启动子区连续的3个TTAT基序是HOXA10功能性结合所必须的,HOXA10可能通过调控p/CAF的表达来控制hESC的增殖与分化。 展开更多

关键词 HOXA10 p/CAF 人子宫内膜间质细胞

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原核和真核细胞表达HBeAg的应用研究 被引量：2

4

作者 何亮 邓小昭 +3 位作者 刁振宇 周宗安 郑纪山 高健 《医学研究生学报》 CAS 2001年第3期204-206,共3页

目的 :将原核细胞和真核细胞分别克隆表达生产的 HBe Ag,经适当纯化后进行检测分析 ,并在乙型肝炎抗HBe检测中进行应用和比较。　方法 :分别用大肠杆菌和家蚕细胞表达生产 HBe Ag,并用 Saphacryl S- 2 0 0柱层析进行纯化 ;紫外分光光度... 目的 :将原核细胞和真核细胞分别克隆表达生产的 HBe Ag,经适当纯化后进行检测分析 ,并在乙型肝炎抗HBe检测中进行应用和比较。　方法 :分别用大肠杆菌和家蚕细胞表达生产 HBe Ag,并用 Saphacryl S- 2 0 0柱层析进行纯化 ;紫外分光光度法测定表达产物的蛋白含量 ;EIA法测定 HBe Ag和 HBc Ag效价及评估 HBe Ag的应用效果。　结果 :原核细胞 HBe Ag:比活性为 10 0 0 0 / m g,HBe Ag/ HBc Ag=5 0 ,用于抗 HBe的检测时特异性为 96 % ,灵敏度符合国家卫生部 panel要求。真核细胞 HBe Ag:比活性为 16 0 0 0 0 / m g,HBe Ag / HBc Ag =5 0 0 0 ,用于抗 HBe的检测时特异性为 10 0 % ,灵敏度高于国家卫生部 panel要求的 1～ 2个滴度。　结论 :真核细胞表达的 HBe Ag比活性高而 HBc Ag含量低 ,在抗 展开更多

关键词 乙肝病毒E抗原 大肠杆菌 家蚕细胞 抗HBE EIA检测法 比活性

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用连续长片段RT-PCR扩增HCV结构基因 被引量：1

5

作者 高健 邓小昭 +3 位作者 王永山 刁振宇 周宗安 何亮 《医学研究生学报》 CAS 2001年第z1期51-53,共3页

目的与方法 :使用连续长片段 RT- PCR,扩增 HCV的结构基因。　结果 :利用连续长片段 RT- PCR技术 ,结合热启动和两段 PCR一次扩增出长 2 .3kb的 HCV结构基因和部分调控序列 ,并用测量分子质量和限制性酶切的方法进行了鉴定。　结论 :利... 目的与方法 :使用连续长片段 RT- PCR,扩增 HCV的结构基因。　结果 :利用连续长片段 RT- PCR技术 ,结合热启动和两段 PCR一次扩增出长 2 .3kb的 HCV结构基因和部分调控序列 ,并用测量分子质量和限制性酶切的方法进行了鉴定。　结论 :利用长片段 RT- PCR可一次扩增出 C、E1、E2基因和部分 5 - N TR。 展开更多

关键词 丙肝病毒 结构基因 长RT-PCR 限制性内切酶

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NPS数据在通信行业中的应用探讨 被引量：7

6

作者 杨福理 刁振宇 《邮电设计技术》 2016年第8期37-40,共4页

净推荐值是一种计量客户向其他人推荐某个企业或商品、服务可能性的指数。净推荐值逐渐替代了传统的客户忠诚度成为衡量企业产品好坏的重要标准。通过净推荐结果辅助的根源分析可以帮助找到阻碍用户发展及盈利的潜在问题,帮助做出决策。... 净推荐值是一种计量客户向其他人推荐某个企业或商品、服务可能性的指数。净推荐值逐渐替代了传统的客户忠诚度成为衡量企业产品好坏的重要标准。通过净推荐结果辅助的根源分析可以帮助找到阻碍用户发展及盈利的潜在问题,帮助做出决策。对NPS方法论在通信行业中的发展应用进行研究,同时结合江苏南京、苏州本地网的调研结果,阐述NPS如何给网络发展带来商业价值。 展开更多

关键词 NPS 推荐值 忠诚度 被动 贬损

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不同源传染性法氏囊病病毒的分离及其生物学特性分析

7

作者 王永山 周宗安 +6 位作者 刘玉 侯继波 何孔旺 丁铲 邓小昭 高健 刁振宇 《动物医学进展》 CSCD 2003年第4期84-86,共3页

用传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)单克隆抗体夹心抑制 EL ISA对麻雀、鸭、鹅进行了血清学调查 ,阳性率分别为 7.4% ( 4/ 54 )、95.5%( 3 6 3 / 3 80 )、9.4% ( 1 1 / 1 1 7)。从 IBD阳性麻雀、IBD病鸡以及同群饲养的鸭、鹅体内分离到了 4... 用传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)单克隆抗体夹心抑制 EL ISA对麻雀、鸭、鹅进行了血清学调查 ,阳性率分别为 7.4% ( 4/ 54 )、95.5%( 3 6 3 / 3 80 )、9.4% ( 1 1 / 1 1 7)。从 IBD阳性麻雀、IBD病鸡以及同群饲养的鸭、鹅体内分离到了 4株不同源病毒 ,IBDV单克隆抗体夹心 EL ISA、Dig-标记 IBDV c DNA探针斑点杂交和交叉中和试验证明该病毒均为 IBDV血清 型。病毒可适应并致死鸡胚 ,适应于鸡胚成纤维细胞并产生细胞病变效应 ( CPE)。病毒代谢抑制试验证明其基因组为 RNA,病毒对乙醚不敏感 ,p H2 .0不能灭活病毒 ,p H 1 2可使病毒失去感染性 ,56℃作用 3 h病毒仍有活性 ,70℃ 1 h可灭活病毒。以上结果表明 ,从鸡、麻雀、鸭、鹅体内分离到的 IBDV生物学性质比较稳定且非常相似。本研究结果提示 IBDV已在我国广泛流行 ,麻雀、鸭、鹅可成为 IBDV携带者或传染源 ,在 展开更多

关键词 传染性法氏囊病 病毒分离 生物学特性 IBDV单克隆抗体 禽病 细胞病变效应 病毒代谢抑制

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不同传染性腔上囊病病毒株结构蛋白表达差异性研究

8

作者 周宗安 王永山 +4 位作者 邓小昭 刁振宇 高健 张建昌 罗函禄 《医学研究生学报》 CAS 2001年第4期285-288,共4页

目的 :了解不同传染性腔上囊病病毒株 (ICBDV)结构蛋白表达的差异。　方法 :将在不同时间、地域 ,从鸭、麻雀及传染性腔上囊病发病鸡群中获得的 18株 ICBDV,分别用 SPF鸡、鸡胚和鸡胚成纤维细胞增生 ,经氯仿处理后 ,采用聚乙二醇沉淀、... 目的 :了解不同传染性腔上囊病病毒株 (ICBDV)结构蛋白表达的差异。　方法 :将在不同时间、地域 ,从鸭、麻雀及传染性腔上囊病发病鸡群中获得的 18株 ICBDV,分别用 SPF鸡、鸡胚和鸡胚成纤维细胞增生 ,经氯仿处理后 ,采用聚乙二醇沉淀、超速离心和不连续蔗糖密度梯度离心的方法纯化病毒 ,并对纯化病毒进行 SDS- PAGE分析。　结果 :病毒主要分布于 40 %蔗糖层 ;鸡源、鸭源、麻雀源 ICBDV在 SDS- PAGE中均出现 5条特异的蛋白带 ,各蛋白带的电泳迁移率毒株间差异不明显 ;15株鸡源 ICBDV结构蛋白 VP2 在不同毒株表达量有较大差异。　结论 :不同传染性腔上囊病病毒株结构蛋白 VP2 展开更多

关键词 传染性腔上囊病病毒 结构蛋白VP2 差异

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通过系统数据挖掘发现天馈系统故障 被引量：1

9

作者 刁振宇 《信息通信》 2016年第8期74-76,共3页

文章主要是对如何快速排查WCDMA网络天馈系统故障进行了研究,采用诸多创新性的优化手段,分别从理论分析、系统数据挖掘发现天馈问题、上站验证测试、基站天馈改造、故障前后对比分析等角度入手,最终快速有效的排除天馈系统中隐藏的故障... 文章主要是对如何快速排查WCDMA网络天馈系统故障进行了研究,采用诸多创新性的优化手段,分别从理论分析、系统数据挖掘发现天馈问题、上站验证测试、基站天馈改造、故障前后对比分析等角度入手,最终快速有效的排除天馈系统中隐藏的故障隐患。 展开更多

关键词 WCDMA 天馈系统 主分集 优化

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WCDMA网络密集场景的深度覆盖优化探讨

10

作者 刁振宇 《信息通信》 2016年第8期290-292,共3页

文章主要对WCDMA网络在密集场景下的深度覆盖优化进行探讨和研究,提出切实可行的优化方案和全新的优化思路,为后期的WCDMA网络规划建设、优化提供有益的思路与建议。

关键词 WCDMA 深度覆盖 网络优化 密集场景

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4G用户TAU失败无法返回4G问题的研究

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作者 谷俊江 杨福理 +1 位作者 张进 刁振宇 《江苏通信》 2016年第6期40-42,共3页

本文针对某省联通公司4G网络中部分用户无法从3G返回4G的问题,进行了分析及研究,提出了通过修改SGSN-MME中TAU失败的原因字段的技术方案。

关键词 互操作 跟踪区更新 网络优化 私有字段

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基于复合维度的移网NPS提升策略研究 被引量：1

12

作者 曹扬 周菊华 刁振宇 《江苏通信》 2019年第3期12-17,共6页

本文首先对NPS的重要性进行了阐述。然后从多个维度分析了某地市四个季度的NPS数据,主要包括NPS贬损用户群体及行为维度、用户网络需求维度、用户使用场景维度、用户投诉维度、B2I2C(企业-互联网-消费者)用户NPS情况维度。针对分析结果... 本文首先对NPS的重要性进行了阐述。然后从多个维度分析了某地市四个季度的NPS数据,主要包括NPS贬损用户群体及行为维度、用户网络需求维度、用户使用场景维度、用户投诉维度、B2I2C(企业-互联网-消费者)用户NPS情况维度。针对分析结果,聚焦了移网NPS贬损用户群体及网络需求,针对性地提出了相应的提升策略。 展开更多

关键词 净推荐值 B2I2C 移网 大数据 多维度

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基于大数据的B2I2C用户分析及保障方法

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作者 曹扬 刁振宇 刘丹丹 《江苏通信》 2018年第3期46-53,共8页

随着联通B2I2C用户迅猛增长,需要从多个维度对B2I2C用户分析及保障。用户基础数据包含B2I2C用户年龄、消费能力等,利用这些数据可以甄别用户群体及使用行为。通过提取用户网络大数据,从订单地址、常驻小区、用户投诉、流量分布四个维度... 随着联通B2I2C用户迅猛增长,需要从多个维度对B2I2C用户分析及保障。用户基础数据包含B2I2C用户年龄、消费能力等,利用这些数据可以甄别用户群体及使用行为。通过提取用户网络大数据,从订单地址、常驻小区、用户投诉、流量分布四个维度可以确定用户聚集区域。根据确定的用户群体、网络需求及聚集区域,就可以从覆盖及容量两方面提出B2I2C用户的保障方法。 展开更多

关键词 B2I2C 大数据 感知提升

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