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miR-29a介导双氢青蒿素对肺腺癌B7H3分子调控
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作者 朱亚玉 凌惠娟 +2 位作者 牛可 唐静 陈礼文 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第4期604-610,共7页
目的探究microRNA-29a(miR-29a)介导双氢青蒿素(DHA)对肺腺癌(LUAD)免疫检查点分子B7H3的调控机制。方法利用公共数据库分析B7H3在肺腺癌中的表达水平和预后意义。采用小干扰RNA(siRNA)敲减肺腺癌细胞株A549和HCC827中B7H3分子,CCK-8法... 目的探究microRNA-29a(miR-29a)介导双氢青蒿素(DHA)对肺腺癌(LUAD)免疫检查点分子B7H3的调控机制。方法利用公共数据库分析B7H3在肺腺癌中的表达水平和预后意义。采用小干扰RNA(siRNA)敲减肺腺癌细胞株A549和HCC827中B7H3分子,CCK-8法检测细胞增殖。将梯度浓度的DHA(0、5、10、25、50、100μmol/L)处理A549与HCC827细胞48 h,计算半数抑制浓度(IC_(50)),以IC_(50)浓度DHA处理A549和HCC827细胞1、2、3 d,CCK-8法检测细胞增殖。采用miR-29a inhibitor转染A549、HCC827细胞,DHA处理后RT-qPCR检测miR-29a表达水平,Western blot检测B7H3表达水平。结果B7H3在肺腺癌中过度表达,与预后不良相关。敲低B7H3后A549、HCC827细胞增殖能力显著降低(均P<0.001)。DHA以剂量和时间依赖形式抑制A549、HCC827细胞增殖,IC_(50)分别是30.16μmol/L和7.50μmol/L。DHA上调A549、HCC827细胞miR-29a表达(P<0.001,P<0.01),同时下调B7H3表达(P<0.01,P<0.001)。A549、HCC827细胞转染miR-29a inhibitor后,B7H3表达上调,并且部分逆转DHA对B7H3的下调作用。结论miR-29a介导DHA对肺腺癌B7H3分子调控。 展开更多
关键词 肺腺癌 双氢青蒿素 B7H3 miR-29a 细胞增殖
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血浆外泌体B7-H3检测在NSCLC中的临床意义与诊断价值
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作者 徐晴 郑霖 +3 位作者 凌惠娟 朱亚玉 牛可 陈礼文 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1120-1126,共7页
目的建立血浆外泌体B7-H3的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,并探讨血浆外泌体B7-H3检测在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床意义与诊断价值。方法收集70例NSCLC患者(NSCLC组)和36例健康对照者(HC组)血浆,先用超速离心法分离血浆外泌体与微囊泡(... 目的建立血浆外泌体B7-H3的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,并探讨血浆外泌体B7-H3检测在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床意义与诊断价值。方法收集70例NSCLC患者(NSCLC组)和36例健康对照者(HC组)血浆,先用超速离心法分离血浆外泌体与微囊泡(MVs),Western blot方法比较经超速离心法分离的NSCLC组与HC组血浆外泌体B7-H3的表达水平,再比较NSCLC组中血浆外泌体与MVs B7-H3的表达水平。然后采用聚乙二醇(PEG)沉淀法初步浓缩富集两组血浆外泌体,建立简便可行的血浆外泌体B7-H3 ELISA检测方法,检测血浆外泌体B7-H3表达水平并分析其临床意义。建立Logistic回归模型对血浆外泌体B7-H3是否为危险因素进行预测,受试者工作特征曲线(ROC)探讨血浆外泌体B7-H3在NSCLC中的诊断价值。结果Western blot实验结果显示经超速离心法分离的NSCLC组血浆外泌体B7-H3表达水平高于HC组(P=0.032),同时在NSCLC组中,其血浆外泌体B7-H3表达水平高于MVs(P=0.012)。PEG沉淀法提取的血浆外泌体B7-H3表达水平NSCLC组同样高于HC组(P=0.024)。NSCLC患者血浆外泌体B7-H3表达水平与性别、年龄、是否吸烟、病理类型无关,与T分期(P=0.002)、N分期(P<0.001)、M分期(P=0.010)及AJCC分期(P<0.001)有关。多因素Logistic回归分析鉴定血浆外泌体B7-H3为NSCLC的危险因素。ROC分析表明,血浆外泌体B7-H3用于诊断NSCLC的敏感度(0.843)高于癌胚抗原(CEA)(0.743),但特异性(0.722)低于CEA(0.833),二者联合检测(AUC=0.928,95%CI:0.877~0.979)对NSCLC的诊断性能高于单项检测。结论血浆外泌体B7-H3表达水平与NSCLC的癌症分期有关,联合检测血浆外泌体B7-H3和CEA有助于NSCLC的实验室诊断。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 ELISA 外泌体 B7-H3 癌胚抗原
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靶向B7-H3抑制人脐静脉血管内皮细胞生长、迁移和血管形成 被引量:1
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作者 刘宇 王南楠 +4 位作者 牛可 凌惠娟 朱亚玉 胡伟 陈礼文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1311-1316,共6页
目的探讨靶向抑制协同信号分子B7-H3对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生长、迁移及血管生成能力影响。方法使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减HUVECs B7-H3分子,采用CCK-8实验检测2... 目的探讨靶向抑制协同信号分子B7-H3对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)生长、迁移及血管生成能力影响。方法使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减HUVECs B7-H3分子,采用CCK-8实验检测24 h、48 h和72 h细胞增殖;采用Transwell实验检测24 h细胞迁移;三维细胞培养观察细胞血管生成。结果与空序列转染的阴性对照(siRNA-Control)组比较,siRNA-720、siRNA-1707和siRNA-16903条备选siRNA对B7-H3表达的抑制效果不同,siRNA-1690抑制率明显高于siRNA-720和siRNA-1707,因此,选择使用siRNA-1690序列进行后续实验。CCK-8细胞活力实验结果显示,敲减B7-H3后24 h、48 h和72 h HUVECs增殖能力分别下降24%、22%(P>0.05,与24 h比较)和15%(P<0.05,与48 h比较);Transwell迁移实验表明,与siRNA-Control组对比,敲减B7-H3的HUVECs 24 h迁移能力明显减低(P<0.01);三维细胞培养结果表明,采用si-B7-H3敲减B7-H3基因后,HUVECs血管生成能力明显下降(P<0.01)。结论靶向B7-H3抑制HUVECs生长、迁移及血管生成。 展开更多
关键词 协同信号分子 血管生成 靶向药物 小干扰RNA 人脐静脉血管内皮细胞 细胞迁移
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双氢青蒿素对非小细胞肺癌细胞诱导的CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫应答的影响 被引量:4
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作者 王南楠 刘宇 +3 位作者 凌惠娟 牛可 朱亚玉 陈礼文 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期424-429,共6页
目的探讨青蒿素衍生物双氢青蒿素(DHA)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞诱导的CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫功能的调控作用。方法将NSCLC细胞系A549细胞分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和DHA处理组;分别用DMSO和不同浓度的DHA(25、50和100μmol/L)处理A... 目的探讨青蒿素衍生物双氢青蒿素(DHA)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞诱导的CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫功能的调控作用。方法将NSCLC细胞系A549细胞分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和DHA处理组;分别用DMSO和不同浓度的DHA(25、50和100μmol/L)处理A549细胞,根据半抑制浓度(IC 50)选择最适浓度的DHA处理A549细胞0、24、48、72 h;CCK-8法和集落形成实验检测DHA对A549细胞增殖和集落形成能力的影响;密度梯度离心法分离健康个体外周血单个核细胞(PBMC),经黏附贴壁法去除单核细胞,随后与丝裂霉素C预处理的A549细胞按照10∶1比例共培养,2周后采用流式细胞术分别检测CD8^(+)T细胞比例及其穿孔素和颗粒酶B的表达水平。结果与对照组相比,25、50和100μmol/L DHA处理24 h后的A549细胞增殖的抑制率均升高(P<0.01);DHA对A549细胞的IC 50为46.26μmol/L;依据IC 50浓度检测50μmol/L DHA处理A549细胞0、24、48、72 h的细胞抑制率分别为1.53%、53.50%、63.84%和69.91%,分别与前一观察时间点即0、24和48 h相比,细胞抑制率均增高(P<0.01);集落形成实验结果显示,与对照组相比,DHA处理组的A549细胞集落形成数减少(P<0.01);流式细胞术结果显示,与对照组相比,DHA预处理组的A549细胞在共培养体系中诱导的CD8^(+)T细胞的比例、表达穿孔素和颗粒酶B的CD8^(+)T细胞比例均更高(P<0.01)。结论DHA能够抑制NSCLC细胞生长,促进NSCLC细胞诱导的CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫应答。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 非小细胞肺癌 肿瘤免疫 CD8^(+)T细胞 穿孔素 颗粒酶B
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