为探究鸭肠炎病毒(DEV)感染后雏鸭脾脏差异代谢物的变化,本研究选取41日龄健康绿壳蛋鸭,随机分为实验组(TD)和对照组(CK),实验组鸭经腿部肌肉接种DEV病毒液(0.2 m L/只,3.16×10^(9)TCID_(50)/0.1 m L),对照组注射等体积灭菌生理盐...为探究鸭肠炎病毒(DEV)感染后雏鸭脾脏差异代谢物的变化,本研究选取41日龄健康绿壳蛋鸭,随机分为实验组(TD)和对照组(CK),实验组鸭经腿部肌肉接种DEV病毒液(0.2 m L/只,3.16×10^(9)TCID_(50)/0.1 m L),对照组注射等体积灭菌生理盐水。于接种后66 h、90 h和114 h时剖杀各组鸭,无菌采集各组鸭脾脏组织样品采用PCR检测病原核酸,观察各组鸭各剖检病变,制备各组鸭脾脏组织切片观察其病理学变化。结果显示,TD组鸭脾脏样品经PCR扩增出DEV特异性DNA片段,而CK组未扩增到该条带;剖检病变观察可见TD组鸭脾脏肿大,呈斑驳状,被膜下有出血点;脾脏组织病变观察可见脾窦内充血,淋巴细胞数量减少,而CK组鸭脾脏无明显病变,确定DEV感染鸭模型建立。采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术检测实验组和对照组鸭脾脏的代谢组学,筛选并分析各组鸭潜在的差异代谢物及相关信号通路。结果显示,与CK组相比,TD组鸭脾脏在感染66 h、90 h和114 h时的差异代谢物质分别有38、64、71种,主要为花生四烯酸乙醇胺、γ-亚麻酸、吲哚-3-乙酸、二十二碳六烯酸、赖氨酸、前列腺素e3、马L-色氨酸、L-苯丙氨酸等;参与的代谢通路主要是色氨酸代谢、苯丙氨酸代谢、组氨酸代谢、酪氨酸代谢、氨基酸的生物合成、细胞色素P450对外源物质的代谢、氨酰t RNA的生物合成等,其中以花生四烯酸乙醇胺和色氨酸代谢为主的差异代谢物和代谢通路与鸭的免疫应答和炎症反应有关。上述结果表明,花生四烯酸乙醇胺和色氨酸可作为DEV感染鸭的生物标志物,DEV感染可能是通过色氨酸代谢通路引起鸭的炎症反应和免疫应答。本实验为进一步研究DEV的致病机制提供参考。展开更多
