通过对A.niger CBS 513.88基因组信息进行阅读和比对分析,发现一个新的丝氨酸羧肽酶基因CapA,并在毕赤酵母中进行克隆表达。在摇瓶发酵水平,重组菌GS115(pPIC9K-CapA)的羧肽酶酶活达到109.7 U/mL。酶学性质研究表明该酶最适温度和pH值...通过对A.niger CBS 513.88基因组信息进行阅读和比对分析,发现一个新的丝氨酸羧肽酶基因CapA,并在毕赤酵母中进行克隆表达。在摇瓶发酵水平,重组菌GS115(pPIC9K-CapA)的羧肽酶酶活达到109.7 U/mL。酶学性质研究表明该酶最适温度和pH值分别为45℃和6.0;在30℃~50℃或pH 4.0~8.0孵育1 h,仍可保持80%或60%以上的活力;Mg^(2+)可以显著提高酶活,Cu^(2+)、Fe^(2+)、Co^(2+)和苯甲基磺酰氟则对酶活有明显的抑制作用。在6种被检测的底物中,CapA可以水解其中的5种,具有较广泛的底物特异性,并且偏好水解羧基端疏水性氨基酸亮氨酸和赖氨酸,苄氧羰基-苯丙氨酰-亮氨酸是其最适底物。CapA较好的耐热性和pH值稳定性以及水解底物特征表明其在食品和生物技术领域有较好的应用基础。展开更多
